全 文 ：中西医结合肝病杂志 2015年第 25卷第 5期· 284·
doi：10.3969/j.issn.1005-0264.2015.05.011
黄根抗肝纤维化作用有效部位筛选研究*
杨增艳 柏春晖 张青青 黄 鑫
广西民族医药研究院 （广西 南宁，530001）
摘 要 目的：初步确定黄根抗肝纤维化的有效活性部位。方法：用 CCl4复合因素制备肝纤维化模型，对黄根 4个萃取部位进行
药效学筛选。结果：高剂量水部位显著降低肝脏系数、ALT、AST水平；低剂量水部位可降低肝脏系数、ALT水平，高剂量乙酸乙酯部
位可降低肝脏系数、AST水平。结论：提示乙酸乙酯部位和水部位可能为黄根抗肝纤维化的活性部位。
关键词 黄根/药效学；抗肝纤维化；有效部位
Screening test for effective fraction of against hepatic fibrosis from prismatomerisconnata
YANG Zeng-yan，BAI Chun-hui，ZHANG Qin-qin，et al.Guangxi Research Institute of Minority Medicine（Nanning Guangxi，530001）
china
Abstract Obfective：To ascertain the main active site of prismatomerisconnata in effect of against hepatic fibrosis. Method：Preparing
of liver fibrosis model with CCl4 composite factors，four extracts from Prismatomerisconnata were screeded for the effect of against hepatic
fibrosis .Result：The high does group of water site could cut down the liver index and the level of ALT and AST obviously，the low does
group of water site could cut down the liver index and the level of ALT. The high does group of Ethyl acetatesite could cut down the liver index
and the level of AST. Conclusion：Ethyl acetate site and water site may be effective fraction of against hepatic fibrosis from Prismatomeriscon-
nata.
Key Words Prismatomerisconnate/pharmacodynamics；against hepatic fibrosis；effective fraction
黄根又名南山花、狗骨木。为茜草科植物南山花（
）的根［1］，是广西特产特色壮药材之一。
有强筋壮骨，利湿退黄，祛瘀生新，凉血止血之功。广西壮族民
间用以治疗风湿跌打、肝炎、矽肺、贫血等多种疾病。现代研究
黄根含有有机铝化合物、柚木醌、虎刺醛、甲基异茜草素、-各
甾醇及蒽类、萜类。黄根提取物有抗菌消炎、祛瘀平喘、保肝、
抗肝纤维化、抗肺纤维化等作用［2］。
本课题组前期已发现黄根乙酸乙酯部位在体外能抑制肝
星状细胞（HSC）-T6的增殖，其机制可能通过抑制细胞中转化
生长因子- 1（TGF- 1）、胶原蛋白-I（CoL-I）、-肌动蛋白（ -
SMA）的表达，从而减少细胞外基质的合成与沉积［3］。为了进
一步明确黄根抗肝纤维化的有效活性部位，本实验采用系统溶
剂萃取分离法，得到黄根石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部
位和水部位，以大鼠血清ALT（丙氨酸转氨酶）、AST（天门冬氨
酸转氨酶）为指标，结合肝脏系数、TP（总蛋白）、Alb（白蛋白）、
Glo（球蛋白）、A/G等生化指标，观察不同提取部位的抗肝纤维
化活性作用，为今后课题的进一步开展提供依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SPF级Wistar大鼠，雄性，购自广西医科大学动
物实验中心，合格证号 SCXK桂 2014-0002。全部大鼠分笼饲养，
实验室温度控制在（25±2）℃，湿度控制在 50%~60%，自由饮水。
1.2 药物 黄根，采自广西防城，经广西民族医药研究院兰日
春副主任药师鉴定为茜草科植物南山花
的干燥根。黄根醇提物为实验室自制：将药材粉碎
成粗粉，按 1 kg/袋装入布袋中，扎好袋口，共 20袋黄根粗粉，放
入多功能提取、浓缩机组的提取锅中，按料：液=1：7的比例，加
入 140 kg 95%乙醇，浸泡药材粉 1h后，第 1次加热回流提取、
保持微沸 1h，350目滤布过滤，滤液泵入贮液罐，再通过真空抽
至浓缩罐进行浓缩，药渣再按料：液=1：7的比例，加入 140 kg
95%乙醇，共提取 3次。第 2、3次加热回流提取、过滤、浓缩同
第 1次的方法；合并 3次滤液，浓缩至无醇味时，把浓缩液转移
至电磁锅，用电磁炉加热，一边搅拌一边浓缩，至稠浸膏，称重，
*基金项目：国家自然科学基金课题（No.81260683）
· 285·中西医结合肝病杂志 2015年第 25卷第 5期
得稠浸膏 1.25 kg。黄根醇提物加适量蒸馏水溶解，依次用石
油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分别得石油醚部位 56 g（得率
4.48%），乙酸乙酯 169 g（得率 13.52%）；正丁醇 237 g（得率
18.96%），水共得约 574 g（得率 45.92%）。
1.3 试剂 ALT、AST试剂盒均购自南京建成生物工程研究所；
羧甲基纤维素（CMC），分析纯，500ml/瓶，国药集团化学试剂有限
公司，批号：20130426；CCl4（四氯化碳），分析纯，500ml/瓶，北京现
代东方精细化学品有限公司，批号：20110718；秋水仙碱，0.5 mg/
片，吉林省辉南辉发制药股份有限公司，批号：20130401。
1.4 主要仪器 WTD-200多功能提取、浓缩机组（温州中翔轻工机
械厂）；电磁炉（美的WK2101）；分析天平（上海友声衡器有限公司）。
1.5 动物造模、分组及处理 采用 CCl4复合因素法制备大鼠
肝纤维化模型。除正常对照组外，其余各组大鼠按体重 3ml/kg
的剂量皮下注射 40% CCl4花生油溶液。每周 2次，从第 2周
起，隔日以 20%～ 30%乙醇 1 ml灌胃。饲以加有 0.5%胆固醇
低胆碱的饲料，连续 8周。
将动物随机分为 11个组（每组 13只大鼠），分别为正常对
照组、模型对照组、秋水仙碱组（0.1 mg/kg）、水部位高及低剂量
组（0.52 g/kg、0.258 g/kg）、正丁醇部位高及低剂量组（0.21 g/kg、
0.107g/kg）、乙酸乙酯部位高及低剂量组（0.152 g/kg、0.076 g/kg）、
石油醚部位高及低剂量组（0.05 g/kg、0.0252 g/kg）。除正常对照
组和模型对照组大鼠按体重给予相应体积生理盐水外，其余各
组大鼠分别给予相应剂量的相应受试药物，每只大鼠每次灌胃
液体量按体重为 1 ml/100 g，1次/d，连续 8周。
给药 8周后，死亡大鼠正常对照组 1只，水部位低剂量组
为 2只，正丁醇部位低剂量组为 2只，乙酸乙酯部位低剂量组
为 1只，石油醚部位高剂量组为 1只。
1.6 指标检测 给药 8周后，所有大鼠腹腔动脉取血，3 000
r/min离心 10 min，取大鼠血清于-20℃冰箱保存，分别测定血
清 ALT、AST、TP、Alb、Glo及 A/G等生化指标。取大鼠肝脏，
测定肝脏系数［肝脏重量（g）/体重（100g）］。
1.7 统计学方法 计量数据以均数±标准差表示，用SPSS 15.0
软件进行 检验方法统计，以 <0.05为差异有统计学意义。
2 结果
黄根各给药组对肝纤维化模型大鼠肝脏系数及肝功能各
项指标的影响结果详见表 1。
由表 1可见，与正常对照组比较，模型对照组大鼠肝脏系
数、ALT、AST水平显著升高，而 Alb、A/G水平下降，说明模型
制备成功；与模型组比较，水部位高剂量组大鼠肝脏系数、ALT、
AST水平显著降低；水部位低剂量组大鼠肝脏系数、ALT水平
降低，乙酸乙酯部位高剂量组大鼠肝脏系数、AST水平降低。
3 讨论
肝纤维化是各种慢性肝病发展为肝硬化的必经阶段。国
内较早已经有报道，黄根具有抗肝纤维化作用。早在 1986年
甘荔等人［4］首先报道黄根抑制肝纤维化的病理形态学观察，认
为黄根对肝脏吞噬细胞有保护作用，促进肝吞噬细胞对异物的
排除，从而抑制肝纤维化。姜建双等对黄根化学成分进行了研
究，通过反复的提取分离和纯化鉴定了 1-羟基-2-甲基蒽醌等 6
个化合物［5］，邓家刚等又报告黄根醇提物对CCl4所致大鼠肝纤
维化具有保护作用。此后邓家刚等采用黄根醇提物对 CCl4所
致大鼠肝纤维化的作用进行观察，结果认为黄根醇提物各剂量
组可使肝纤维化大鼠肝组织中的Ⅰ、Ⅲ型胶原含量减少，TGF-
1仅微量表达［6~8］。
本实验采用复合因素造模，以血清 ALT、AST活性和血清
相关生化经典指标，并结合肝脏系数，对黄根抗肝纤维化有效
部位进行初步筛选研究，以期从 4个提取部位寻找疗效确切的
活性部位。ALT、AST作为了解肝脏功能的常规指标，被纳入
本次生化指标检测的主要内容。从给药各组的数据来看，乙酸
乙酯部位和水部位的指标提示，这两个部位有可能是黄根抗肝
维化的有效部位。结合课题组前期的研究基础，拟着重对乙酸
乙酯部位开展进一步研究，以明确黄根抗肝纤维化的主要活性
成分及作用机制。
表 1 各组大鼠肝脏系数及肝功能各项指标比较 （ ± ）
组别 n 相应药物 肝脏系数 ALT AST TP Alb Glo A/G
剂量 (g/100g) （U/L） （U/L） (g/L) (g/L) (g/L)
正常对照组 12 － 2.99±0.23 30.08±5.55 85.58±14.58 53.16±2.95 20.97±0.56 32.20±2.84 0.66±0.07
模型对照组 13 － 7.37±0.94△△ 287.54±178.43△△ 383.62±184.33△△ 52.93±3.35 19.82±1.18△△ 33.11±2.76 0.60±0.06△
秋水仙碱组 13 0.1 7.13±0.83 346.69±244.58 567.92±344.23 51.48±3.17 19.45±1.58 32.02±2.11 0.61±0.06
水部位高剂量组 13 0.52 5.94±1.03** 156.30±105.35* 208.46±157.23** 51.44±3.34 19.23±1.06 32.21±2.66 0.60±0.06
水部位低剂量组 11 0.258 6.14±1.02* 168.36±63.53* 391.18±211.37 51.15±3.55 19.18±1.24 31.96±2.96 0.60±0.06
正丁醇部位高剂量组 13 0.21 7.97±2.31 373.08±163.54 599.46±272.88* 54.04±4.46 20.22±1.71 33.82±3.64 0.61±0.09
正丁醇部位低剂量组 11 0.107 7.82±0.59 328.91±133.88 600.09±370.13 53.20±3.67 19.55±1.82 33.65±2.22 0.58±0.06
乙酸乙酯部位高剂量组 13 0.152 5.91±1.57* 216.62±79.42 211.33±181.50** 53.31±3.63 19.32±2.16 34.18±2.26 0.57±0.06
乙酸乙酯部位低剂量组 12 0.076 6.93±1.48 285.50±291.07 371.33±281.50 50.22±2.25 19.93±1.32 32.29±2.03 0.56±0.07
石油醚部位高剂量组 12 0.05 7.95±0.87 325.67±160.05 444.42±227.44 54.95±3.60 20.26±1.31 34.69±2.73 0.59±0.05
石油醚部位低剂量组 13 0.025 7.82±0.72 289.69±120.60 502.69±236.21 52.44±5.23 19.36±1.99 33.08±3.84 0.59±0.09
除秋水仙碱组的相应药物剂量单位为 mg/kg外，其余各组相应药物剂量单位为 g/kg；与正常对照组比较，△ <0.05，△△ <0.01；与模型对照组
比较，* <0.05，** P<0.01
（下转第 297页）
· 297·中西医结合肝病杂志 2015年第 25卷第 5期
像技术是建立在螺旋 CT技术、计算机技术和数学模型技术的
基础上，常使用非去卷积模型（nm-deconwolution model）和去卷
积模型（deconvolution model）两种数学模型［6］，两种模型各有优
势，去卷积模型的应用更广泛些，在肝这一双供血复杂模式中
的应用越来越广泛［7，8］。在肝 CT灌注成像中，由于其具有肝动
脉和门静脉双重供血系统，灌注过程注入对比剂后，肝 CT值
的增加首先来自肝动脉中的对比剂，然后才是门静脉［9］。
3.2 CT 肝灌注成像对肝纤维化的诊断价值及影像特点 关
于 CT肝灌注在各类肝病中的诊断价值，国内外已有较多的学
者进行了大量的研究。国内有学者报道：“随着肝硬化的进展，
门静脉灌注量（portal venous perfusion，PVP）、BF和BV均呈下
降的趋势，而肝动脉灌注指数（hepatic arterial perfusion index，
HPI）、HAF有升高的趋势［10，11］。”Hashimoto等报道称：“肝功能
按照Child-Pugh进行分级，肝功能由A级至C级患者的BF逐
渐下降，HAF逐渐升高，BV和MTT两项参数无明显差异［12］。”
目前，CT肝灌注成像技术的动物实验报道较多，有学者［13］采用
CT灌注对动物肝脏病变进行诊断实验，结果显示HAP、MTT、
BV、BF等各项灌注参数在肝炎、肝纤维化以及肝硬化早期诊
断中均有较大的可靠性。
本研究提示，HAF在诊断肝纤维化以及对肝纤维化程度
判断中具有较高的价值，肝纤维化较轻、肝纤维化较重者的
HAF参数与正常人 HAF比较，F=5.972， =0.004，CT肝灌注
HAF参数 ROC曲线下面积为 0.719，在 0.7~0.9之间，这说明
CT灌注成像技术在肝纤维化诊断以及严重程度分级中具有一
定的意义，但诊断价值比较有限。根据相关报告，其诊断价值
不如磁共振扩散加权成像。这一结论与国内外大多数学者的
研究结论基本一致。
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（收稿时间：2015－ 05－ 08 编辑：胡肃平）
（上接第 285页）
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（收稿日期：2015－ 07－ 07 编辑：胡肃平）
表 2 32例肝纤维化患者 CT肝灌注各参数 ROC曲线下面积比较
ROC曲线 BV BF HAF MTT PS
AZ值 0.561 0.541 0.719 0.551 0.581
值 0.5144 0.6046 0.0009 0.5245 0.2918
AZ值为 ROC曲线下面积值