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蒙药广枣总黄酮对小鼠体液免疫功能影响的研究



全 文 :实验研究
蒙药广枣总黄酮对小鼠体液免疫功能影响的研究
包头医学院生物学教研室 ( 014010) 侯慧英 秦 荣 王玉珍
提 要 观察广枣总黄酮 ( TFC)对小鼠体液免疫功能的影响。 结果显示: TFC( 20. 16mg /kg、 40. 32mg /kg )可
以显著增加小鼠免疫器官脾和胸腺的重量 ,增加小鼠血清溶菌酶的含量 ,提高小鼠血清抗体水平 (小剂量组优
于大剂量组 ) ,小剂量 TFC可明显促进小鼠血清半数溶血值 ( HC50 )的形成。 故广枣总黄酮具有显著增加小鼠
体液免疫功能的作用。
关键词 广枣总黄酮 体液免疫
  广枣 ( Cbo reo spondias a xillaris ( Roxb ) Burt t et
Hill)系漆树科植物南酸枣的干燥成熟果实 ,为蒙医传
统习用药 ,具有行气活血 ,养心安神的功能 ,常用于气
滞血瘀、胸痹作痛、心悸气短、心神不安。 广枣总黄酮
( To tal flayones of Ch or eospondia s axilla ris ( Roxb )
Burtt et Hill, T FC)是广枣的主要有效成分之一。关于
TFC对心血管的药理作用 ,已有报道〔1, 2〕 ,本文则对
TFC对免疫功能的影响进行了研究。
1 材料与方法
1. 1 材料:昆明种小鼠 内蒙古大学实验动物中心
提供 ,体重 20~ 22g,鼠龄 35d左右。
TFC 内蒙古中蒙医研究所药物室提供的注射
液 ,小鼠静脉注射的 LD50为 40. 32mg /kg ,实验所用剂
量按 LD50的 1 /10和 1 /20计算。
溶菌酶 为中国科学院生物物理研究所生化制
药厂出品。
绵羊红细胞 ( SRBC) 绵羊为本院动物室饲养 ,
无菌操作抽取绵羊颈外静脉血液 ,脱纤维后加入阿氏
液中 ,置 4℃冰箱备用。
721型分光光度计 上海第三分析仪器厂生产 ,
波长 50nm。
1. 2 方法:动物分组 小鼠 45只 ,随机等分为 3组 ,
对照组 ( A组 )腹腔注射等量生理盐水 ( NS) ,实验组
则分别腹腔注射 TFC20. 16mg /kg ( B组 )、 40. 32mg /
kg ( C组 )。
脾和胸腺测重 连续给药 7d,停药后次日处死
小鼠 ,剖取脾和胸腺 ,用天平测其重量 ,按下述公式计
算其指数:
脾或胸腺指数= 脾或胸腺重 ( mg )体重 ( g )
血清溶血素测定 于给药第 2天 ,每只小鼠同时
腹腔注射 SRBC2ml( 2× 109 /ml) ,免疫 1次。于第 6天
处死小鼠 ,断头取血 ,分离血清 ,按溶血素测定法 [3 ] ,
用 N S以 1∶ 50稀释后 ,取血清样品 1ml,加 SRBC0.
5ml和补体 1ml(用 NS以 1∶ 10稀释豚鼠血清 ) ,
37℃温浴 10~ 15min,再冰浴后取上清液 1ml,加都氏
液 3ml,用 721型分光光度计测定样品的吸收度值 ,
并计算半数溶血值 ( HC50 )。
血清抗体效价测定 于给药第 2d和第 5d分别
腹腔注射 SRBC0. 2ml,第 9d处死小鼠 ,断头取血 ,分
离血清 ,用常规方法做血球凝集试验 ,测定血清抗体
效价。
血清溶菌酶含量测定 连续给药 7d,停药后次
日处死小鼠 ,断头取血 ,分离血清 ,按文献 [4]方法测定
血清溶菌酶含量 ,每孔加血清 10μ1,将溶菌板置 37℃
温箱中孵育 24h,测溶菌环图 ,求出血清样本含溶菌
酶浓度。
全部数据进行统计学处理。
2 结果
2. 1  T FC对小鼠脾和胸腺重量的影响: T FC可以显
著增加小鼠脾、胸腺的重量。 TFC剂量不同 ,脾和胸
腺重量增加幅度也各不相同。 当 T FC剂量为 20.
16mg /kg时 ,实验组小鼠脾重量比对照组增加 45% ,
胸腺重量增加 36% ;当 TFC剂量为 40. 32mg /kg时 ,
实验组小鼠脾重量比对照组增加 30%。 胸腺重量增
加 69%。 详见表 1。
表 1  T FC对小鼠脾和胸腺重量的影响 (X± s)
Tab. 1 Effect of T FC on th e w eigh t of s pleen and thymu s of M ice x± s)
Group n Dose
Spleen
w eigh t    index
Th ymus
w eigh t    index
A 15 N S 196. 8± 38. 2 6. 21± 2. 14 62. 9± 18. 9 1. 99± 0. 69
B 15 20. 16 285. 4± 96. 8* * 9. 52± 3. 36 85. 5± 20. 2* 2. 86± 0. 71
C 15 40. 32 236. 4± 82. 8* 8. 45± 2. 89 106. 3± 30. 2* * 3. 78± 1. 01
Note: vs con trol ,* P < 0. 05  * * P < 0. 01
38 中国民族医药杂志         1998年 10月 (第 4卷 )第 4期DOI : 10. 16041 /j . cnki . cn15 -1175. 1998. 04. 034
   2. 2  T FC对小鼠血清 HC50的影响
TFC可以促进血清 HC50的形成 ,当 TFC剂量
为 20. 16mg /kg时 ,实验组 HC50升高明显 ,与对照组
相比 ,差异具有统计学意义 (P < 0. 01) ;当 TFC剂量
为 40. 62mg /kg时 ,实验组 HC50与对照组的差异无
统计学意义 (P> 0. 05)。 详见表 2。
2. 3  T FC对小鼠血清抗体的影响: T FC可以明显
增加血清抗体效价 ,当 TFC剂量为 20. 16mg /kg时 ,
实验组血清抗体价效比对照组增加 494% ;当 TFC
剂量为 40. 32mg /kg时 ,实验组比对照组增加 67% ,
其差异均具有统计学意义 (P < 0. 05、 P < 0. 01)。 小
剂量 TFC ( 20. 16mg /kg )的作用明显优于大剂量
TFC( 40. 32mg /kg )。
2. 4  TFC对小鼠血清溶菌酶的影响: TFC可显著
增加血清溶菌酶的浓度 ,当 TFC剂量为 20. 16mg /
kg和 40. 32mg /kg时 ,实验组血清溶菌酶含量比对
照组分别增加 180%和 25% ,其差异均有统计学意
义 (P < 0. 01)。
表 2  TFC对小鼠 HC50、抗体、溶菌酶的影响 ( x± s )
Tab 2 Effect of TFC on th e HC50 , an tibody and lysozyme conten t of M ice( x± s )
Group n Dose HC50 An tibod y valence lys oyme con tent (μg /ml )
A 15 N S 443± 34. 6 431± 1. 7 124. 5± 16. 9
B 15 20. 16 477. 1± 16. 5* 2560± 1. 8* * 448. 4± 104. 2* *
C 15 40. 32 448. 9± 23. 8 718± 6. 7* 3500± 94. 3* *
Note: vs con trol ,* P < 0. 05 * * P < 0. 01
3 讨 论
脾和胸腺是外周免疫系统产生抗体的重要器
官。 血清溶血素是反映和检测机体免疫功能的灵敏
指标。本组实验证实 TFC可以明显增加小鼠免疫器
官脾和胸腺的重量 ,促进血清溶血素增加 ,并促进再
次抗原刺激抗体效价升高 ,表明 TFC具有增加小鼠
非特异性免疫功能和特异性免疫功能的作用 ,可能
与促进 IgM和 IgG介素的体液免疫作用有关。
TFC影响小鼠体液免疫功能的程度与其剂量有
着密切的关系 ,小剂量优于大剂量。故临床运用广枣
时掌握适当的剂量 ,无疑会提高疗效。
溶菌酶水平是反映机体非特异性免疫功能的重
要标志。单核巨噬细胞系统不仅具有吞噬杀菌功能 ,
抗肿瘤作用 ,且参与特异性免疫反应和调节免疫应
答。已证实 TFC可以促进小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬
功能〔5〕。 所以 TFC促进溶菌酶分泌 ,激活单核巨噬
细胞系统 ,可能是其增强小鼠非特异性体液免疫功
能的作用机理之一。
参与文献
1 李增 .广枣总黄酮抗心律失常作用 .中国
药理学报 , 1984, 5( 4): 251
2 李增 .广枣总黄酮对动物耐氧和急性心肌
缺血的保护作用 .中草药 , 1984, 15( 6): 25
3 徐学瑛 .李元 ,许津 ,等 .一个改进的免疫测
定方法—— 溶血素测定 .药学学报 , 1979, 14( 7) 443
4 比爱华 .医学免疫学 .第 3版 .武汉: 同济医
科大学出版社 , 1986, 282~ 285
5 冯作化 .白细胞介素 I诱异激素对免疫应答
的调节 .生理科学进展 , 1989, ( 3): 224
1998年 3月 25日收稿
蒙药乙肝 1号对肝损伤的保护作用
内蒙古锡盟蒙医研究所 ( 026000) 王宁波 赛 汉*  俞腾飞 满 达 牧 荣* *
  蒙药乙肝 1号为本课题组在总结名老蒙医治疗
病毒性肝炎的经验与民间疗法基础上经筛选组成的
新方剂 ,通过近几年临床观察 ,对乙肝疗效显著。 本
文就其对肝损伤的保护作用研究如下:
1 实验材料
* 内蒙古妇幼保健院 ( 010020)
* * 内蒙古医学院 (010059)
1. 1 动物: Wistar- Imimachi种大白鼠 ,购自内蒙
古大学实验动物研究中心 (清洁级 ,二级 ,合格证号
〈京动字〉第 8806R011号 )。
1. 2 蒙药乙肝 1号: 深棕色半透明液体 (含生药 2g /
ml) ,由锡林郭勒盟蒙医研究所提供 ;批号 951105。联
苯双酯滴丸: 北京协和药厂出品 , 1. 5mg /丸 ,批号
940502。
2 实验方法
2. 1 造模方法: 动物随机分为 7组 ,分设空白对照
391998年 10月 (第 4卷 )第 4期        中国民族医药杂志