全 文 ：葫芦巴对四氧嘧啶致糖尿病大鼠药理作用
林 辉 ,周玖瑶 ,黄桂英
(广州中医药大学 ,广东广州 510405)
摘要 目的:研究葫芦巴的降血糖药理作用。方法:采用 Aloxan(四氧嘧啶)致 SD大鼠糖尿病模型 ,分别以 2、
4、8 g/kg体重葫芦巴提取物连续灌胃给药 30 d, 于给药 10、20、 30d检测各鼠血糖含量 , 给药 20、30d检测各鼠血清
胰岛素水平 , 给药 30 d测定各鼠糖耐量。结果:4、8g/kg葫芦巴对高血糖模型大鼠有显著降低血糖作用并升高血
清胰岛素含量。 2、4、8g/kg葫芦巴则可明显提高糖耐量功能。结论:葫芦巴具有降低血糖药理作用 , 升高血清胰
岛素水平是其作用机理之一。
关键词 葫芦巴;四氧嘧啶;糖尿病模型
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2006)06-0586-03
作者简介:林辉(1964-),男 ,副教授 , 020-39358388。
葫芦巴 Trigonelafoenum-graecumL.又名芸香
草 、香苜蓿 ,系豆科蝶形花亚科一年生草本植物 ,目
前我国不少省区均有栽培或野生资源分布 。我国历
代编修的本草著均收载有葫芦巴条目 ,入肝 、肾二
经 ,味苦 ,性温 ,无毒 ,补肾阳 ,祛寒湿 ,属于常用中药
材之一 ,目前常将其作为补肾药 、祛(肠)风药和健
胃药使用。在印度 、埃及 、中东和南非普遍种植 。该
植物的种子已被用作许多疾病的传统治疗剂 ,包括:
肠疾病 、痛风 、疗伤及炎症 、高血脂和糖尿病 。葫芦
巴种子在临床试验中的降血糖作用大部分可能源于
胶粘性纤维对葡萄糖吸收的抑制作用 ,在一个研究
中 ,接受葫芦巴的患者每天摄取约 80 g纤维 ,但也
观察到葫芦巴在外周组织中对葡萄糖吸收和利用的
影响〔1〕。为进一步探索和证实葫芦巴降血糖药理
作用。本实验选用 Aloxan(四氧嘧啶)致高血糖大
鼠模型 ,检测血糖 、血清胰岛素及糖耐量等指标 ,研
究葫芦巴降血糖作用并初步探讨其作用机理。
1 材料
1.1 药物 葫芦巴:购自广州清平药材市场 ,经广
州中医药大学中药学院中药标本中心张秋镇教师鉴
定为系豆科蝶形花亚科葫芦巴 Trigonelafoenum-
graceumL.缩写为 TF)的种子干品。取葫芦巴打碎
加水煎煮 3次 ,合并煎液 ,过滤 ,滤液浓缩至每 100
ml相当于原生药 50 g,置于冰箱备用 ,临用时稀释
成所需浓度 。达美康(gliclazide,格列齐特片 Ⅱ),法
国施维雅药厂 、天津华津制药厂合作生产 ,产品批
号:030232。
1.2 试剂和仪器 Aloxan(四氧嘧啶),美国 Sig-
ma产品 , 实验前用生理盐水新鲜配制浓度为
1.5%。美国雅培 PrecisionQ.I.DTM手握型血糖
仪 , 型号:Q7708-0119;PrecisionPlusTM Electrodes
BloodGlucoseElectrods(血糖试纸),美国雅培制药
有限公司 ,注册号:国药管械(进)2001第 2400934
号。胰岛素测定:胰岛素放射免疫测定盒 ,购自北京
北方生物技术研究所。胰岛素测量仪器:上海日环
厂 TSN-695B智能放免 γ测量仪 。本次实验的 r=
0.999 , CV=1.15%, BO/T=62%, NSB=4.8%。
1.3 动物 SD大鼠 ,雄性 ,体重 150 ～ 200 g,购自
广东省医学实验动物中心 ,合格证号:2002A024。
2 方法和结果
2.1 对糖尿病模型大鼠血糖 、胰岛素的作用 取
雄性 150 ～ 200 gSD大鼠 70只 ,腹腔注射 Aloxan
(四氧嘧啶)150 mg/kg,注射 4 d,禁食 8 h,检测血
糖(注 ,以下实验中测定动物血糖前 ,动物均禁食 8
h〔2〕), 选取高血糖合格模型大鼠 (血糖大于 10
mmol/L)50只进行随机分为:模型对照组 、葫芦巴高
剂量组(2 g/kg)、葫芦巴中剂量组(4 g/kg)、葫芦巴
低剂量组(8 g/kg)、Gliclazide组(30mg/kg)。另取
10只未造模的同批大鼠作正常对照组 。连续灌胃
给药 30d,正常对照组 、模型对照组动物给予等容积
20 ml/kg生理盐水。观察指标:于给药 10 d、20 d、
30 d分别取血测定血糖。于给药 20 d、23 d分别取
血测定血清胰岛素 。实验数据以 χ±s表示 ,数据用
统计 SPSS13.0软件处理 ,组间用 t检验 。
结果:大鼠注射 Aloxan150mg/kg4 d后 ,血糖
含量显著升高 ,于药后 10 d、20 d、30 d模型组大鼠
血糖明显升高 ,药后 20 d、药后 30 d大鼠血清胰岛
素含量显著降低 , 与正常组比较 , P<0.01或 P<
0.05,有显著性差异 ,说明 Aloxan致糖尿病模型成
功 ,并在实验期高血糖 、低血清胰岛素持续。于药后
10 d、药后 20 d、药后 30 dGliclazide组大鼠血糖明
显下降并持续 ,于药后 20d、23d血清胰岛素含量显
·586· 中药材第 29卷第 6期 2006年 6月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2006.06.026
著升高 ,与模型组比较 ,均 P<0.01,有显著性差异 ,
说明 Aloxan致糖尿病模型评价药物降血糖作用方
法可行 。药后 20d,葫芦巴中 、高剂量组大鼠血糖开
始下降 , 与模型组比较 , 分别为 P<0.05和 P<
0.01,有显著性差异。药后 30 d葫芦巴中 、高剂量
组大鼠血糖明显下降 ,与模型组比较 , P<0.01,有显
著性差异。药后 20 d、30 d,葫芦巴中 、高剂量组大
鼠血清胰岛素含量显著升高 ,与模型组比较 , P<
0.05或 P<0.01,有显著性差异 。结果提示 ,葫芦巴
具有降血糖药理作用 ,其升高血清胰岛素作用可能
是其作用机理之一。见表 1和表 2。
2.2 对糖尿病模型大鼠糖耐量的影响 取雄性
150-200gSD大鼠 70只 ,腹腔注射 Aloxan(四氧嘧
啶)150 mg/kg,注射 4 d手 ,禁食 8 h后检测血糖
(注:实验中测定动物血糖前 ,动物均禁食 8 h)〔2〕 ,
选取高血糖合格模型大鼠(血糖大于 10 mmol/L)50
只进行随机分为:模型对照组 、葫芦巴高剂量组 (2
g/kg)、葫芦巴中剂量组(4 g/kg)、葫芦巴低剂量组
(8 g/kg)、Gliclazide组(20 mg/kg)。另取 10只未
造模的同批大鼠作正常对照组。连续灌胃给药 30
d,正常对照组 、模型对照组动物给予等容积 20 ml/
kg生理盐水。观察指标:第 30d给药后动物开始禁
食(不禁水),第 31d,先测定各大鼠空腹血糖 ,然后
按 3 g/kg葡萄糖负荷灌胃 ,于灌胃后 0.5 h、1 h、2
h、2.5 h各测定血糖一次。实验数据以 x±s表示 ,
数据用统计 SPSS13.0软件处理 ,组间用 t检验。
结果:大鼠糖耐量实验结果表明 ,正常组大鼠血
糖于灌胃给予 3 g/kg葡萄糖 0.5h后迅速升高并达
峰值 ,以后血糖开始下降 , 2.5 h降至接近正常大鼠
空腹水平 。模型组大鼠血糖于糖负荷后持续升高 ,
表 1 葫芦巴对糖尿病模型大鼠血糖的作用( χ±s, mmol/L)
组别 剂量g/kg 动物数 给药前 药后 10d 药后 20d 药后 30d
正常对照组 - 10 6.24±2.18 5.78±2.02 6.2±2.05 7.13±2.08
模型对照组 - 10 24.69±4.75＊ 24.67±4.32 22.77±3.88 21.9±3.76
葫芦巴低剂量组 2 10 24.16±4.56＊ 23.45±4.39 21.22±3.62 17.21±2.53##
葫芦巴中剂量组 4 10 23.6±4.13＊ 22.32±3.72 18.53±3.30# 16.61±3.92##
葫芦巴高剂量组 8 10 25.49±4.09＊ 23.53±2.46 16.99±2.86## 15.87±2.64##
Gliclazide组 0.03 10 24.07±4.54＊ 17.53±4.22## 13.53±3.19## 11.71±2.50##
注:与正常组比较 , ＊为 P<0.01;与模型组比较 , ##P<0.05, #P<0.01,下表皆同
表 2 葫芦巴对糖尿病模型大鼠胰岛
素的作用( χ±s, mmol/L)
组别 剂量g/kg动物数n 药后 20d 药后 30d
正常对照组 - 10 351.3±57.31 343.4±45.84
模型对照组 - 10 247.0±45.14＊ 259.0±35.35＊
葫芦巴低剂量组 2 10 256.4±43.85＊ 269.6±30.97＊
葫芦巴中剂量组 4 10 289.5±41.45＊## 299.6±47.54##
葫芦巴高剂量组 8 10 239.9±46.72＊## 316.5±33.05#
Gliclazide组 0.03 10 314.8±55.89＊# 330.2±60.69#
虽 2.5 h有所降低 ,但仍明显高于糖负荷前血糖浓
度。葫芦巴高 、中 、低剂量组与 Gliclazide组糖负荷
后 0.5 h达峰值 , 2.5h明显降低至糖负荷前血糖水
平附近 ,表明葫芦巴各剂量组与 Gliclazide组比较 ,
具有较好糖耐量功能。见表 3。
3 讨论
葫芦巴系豆科蝶形花亚科植物 ,其种子为著名
补阳中药 ,具有温肾壮阳 ,祛寒除湿等功效。除药用
外 ,葫芦巴还被广泛应用于食品工业 ,如其果实可作
表 3 葫芦巴对糖尿病模型大鼠糖耐量的作用( χ±s, mmol/L)
组别 剂量g/kg动物数n
血糖含量(mmol/L)
0 0.5h 1h 2h 2.5h
正常对照组 - 10 5.32±1.62 15.43±2.66 14.39±3.35 10.06±2.03 5.45±1.63
模型对照组 - 10 21.67±4.11＊ 25.84±4.64＊ 24.05±4.33＊ 22.77±3.65＊ 21.9±3.59＊
葫芦巴低剂量组 2 10 18.36±4.17＊ 21.63±2.97＊# 20.92±2.79＊ 18.38±2.13＊## 18.32±4.10＊
葫芦巴中剂量组 4 10 17.04±2.71＊## 22.87±4.68＊ 21.06±4.18＊ 17.98±2.63＊## 16.85±2.34＊##
葫芦巴高剂量组 8 10 16.61±3.51＊## 23.79±4.92＊ 22.14±4.27＊ 18.53±2.74＊## 16.77±3.33＊##
Gliclazide组 0.03 10 12.35±2.53＊## 15.95±2.55## 13.99±2.20## 15.77±1.90＊## 12.21±2.76＊##
·587·中药材第 29卷第 6期 2006年 6月
为调味品 ,为了更深入地对葫芦巴这一重点药用植
物进行研究 ,开发其多层次 、多领域的应用价值 ,我
们总结了近几十年来在植物资源 、化学成分及药理
活性方面的研究进展 。葫芦巴种子主要含有半乳甘
露聚糖等多糖物质 、蛋白质 、芹菜香脂等成分 ,此外 ,
它还含葫芦巴碱 、游离氨基酸 、甾体皂甙 、香豆素与
黄酮类物质 。几年前西方药理学家发现 ,葫芦巴所
含的 “葫芦巴甙”(共有 19种不同的分子结构)具有
出色的降血糖作用 ,提示其有望开发成为新型抗糖
尿病保健食品新原料 。国外所做动物实验表明 ,将
含有 “葫芦巴甙 ”的提取物粉末喂饲糖尿病动物模
型小鼠以及健康小鼠 ,可显著降低两者的血糖并可
相应降低血脂。 Ⅰ型与Ⅱ型糖尿病人以及健康志愿
受试者服食葫芦巴粉末胶囊后同样可观察到较明显
的抑制血糖上升的作用〔3〕。
本实验中 ,选用 Aloxan(四氧嘧啶)破坏大鼠 β
细胞 ,使其机体内胰岛素分泌不足 ,血糖值持续升高
而导致糖尿病 ,并在一定时间内不易缓解。在此基
础上 ,应用葫芦巴提取物灌胃 30天进行治疗 ,结果
显示 ,葫芦巴对高血糖模型大鼠具降血糖 、升高血清
胰岛素水平及提高糖耐量功能 ,其降糖作用很可能
是通过改善受损的胰岛素功能来实现的 ,其确切的
作用机制有待进一步研究。
参 考 文 献
[ 1] TheExpertCommitteeontheDiagnosisandClassificationof
Dia2 betesMellitus.Peportoftheeppertcommitteeondi-
abetesmellitus.DiabCard, 1999, 22(supp.1):51.
[ 2] H.G.沃格尔等编著.药理实验指南-新药发现和药理
学评价 .北京:科学出版社 , 2001:699.
[ 3] 周淑晶 .中药葫芦巴的化学成分研究进展 .中药研究
与信息 , 2000, 2(5):19.
(2006-11-23收稿)
浙产山茱萸水醇提取物毒性 、药效比较研究
杨明华 ,毛培江 ,杨苏蓓
(浙江省中药研究所 ,浙江杭州 310023)
摘要 目的:对浙产山茱萸水提物与醇提物的毒性和部分药理作用进行初步的比较研究 , 考察二者的毒效差
异。方法:毒性试验采用小鼠急性毒性观察法;药效研究包括对小鼠阈下剂量戊巴比妥钠催眠作用的影响 、对二甲
苯致小鼠耳肿胀的影响 、对肾上腺素引起小鼠高血糖的影响及对四氧嘧啶致大鼠糖尿病模型的影响等。结果:水
提物与醇提物同样 59.26 g/kg剂量一次灌胃给药致小鼠的死亡率分别为 20%和 50%(P<0.01);醇提物对小鼠阈
下剂量戊巴比妥钠具有明显催眠作用;二者对二甲苯致小鼠耳肿胀具有抑制作用 ,作用强度无明显差异;两种提取
物对肾上腺素引起的小鼠高血糖均有明显降低作用;二者均能降低四氧嘧啶致大鼠糖尿病模型的高血糖 , 并能提
高该型大鼠的 SOD、降低 MDA。结论:浙产山茱萸水提物与醇提物的毒性具有显著差异 ,其药理活性也存在一定的
差异。
关键词 山茱萸;水提物;醇提物;毒性;药效
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2006)06-0588-03
山茱萸为山茱萸科灯台树属植物山茱萸(Cor-
nusoficinalisSieb.etZucc)的干燥成熟果肉 ,中医
功能补肾益肝 ,涩精止汗 ,是中医常用的补肾延缓衰
老药物 。现代研究表明 ,它具有免疫 、抗炎 、降糖 、抗
肿瘤 、抗休克 、抑菌等活性〔1〕。传统上认为山茱萸
属无毒级药食两用中药。本课题组在研究以山茱萸
为主药的一个中药复方中 ,发现该处方具有一定的
毒性 ,经拆方追踪其毒性主要来源是山茱萸 ,因此对
山茱萸的水提物和醇提物进行小鼠的急性毒性和部
分药效观察 ,以考察比较二者可能存在的毒性和药
效差异 。现将结果报道如下。
1 材料
1.1 动物 ICR小鼠 ,体重(20±2)g, ♀♂兼用;
SD大鼠 ,均由浙江省医学实验动物中心提供 ,合格
证号:医动字第 22-2001001号。
1.2 药物与试剂 山茱萸来自浙江临安昌化 ,经
浙江中医学院中药资源室张水利副教授鉴定 ,山茱
萸水提物 ,药材经二次水回流提取 ,浓缩至 1.4815
g/ml;山茱萸醇提物 ,药材经 70%乙醇回流提取二
次 ,浓缩到 1.4815 g/ml;戊巴比妥钠(进口分装),
批号为 971104,中国医药(集团)上海化学试剂公
司;肾上腺素(注射液),批号为 980528, 10 ×1 ml,
·588· 中药材第 29卷第 6期 2006年 6月