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复方岗梅冲剂提取工艺的实验研究



全 文 :·专 栏·
 ·中药与天然药·
复方岗梅冲剂提取工艺的实验研究
基金项目:湛江市科技重点攻关项目 47号(99-2001)
作者简介:钟智 , 41岁。广东医学院附院副主任药师 ,药学大专毕业 ,从事调剂 、制剂工作。电话:(0759)2387264
钟智1 ,杨晓军1 ,吴雪梅1 ,陈华萍1 ,吴铁2 ,陈志东2(1.广东医学院附属医院 ,广东 湛江 524001;2.广东医学院 ,广东 湛江
524001)
摘要:目的 寻找复方岗梅冲剂最佳提取工艺 。方法 采取正交试验 ,以水的用量 , 提取时间和提取次数 3 个因素 , 每个因
素选取 3 个水平进行实验 ,以测定抑菌作用和浸膏得率作为考察指标。结果 因素 C 对抑菌作用有非常显著性(P <0.
01),因素 C对浸膏得率和因素 B对抑菌作用有显著性(P<0.05 和 P<0.1), 因素 B 对浸膏得率和因素 A 对浸膏得率 、抑
菌作用无显著性(P>0.1)。结论 最佳工艺 A1B1C1 , 即用 11倍水提取 3次 , 每次 1.5h.。
关键词:复方岗梅冲剂;正交试验;提取工艺
中图分类号:R284.2   文献标识码:B   文章编号:1007-7693(2004)01-0029-02
Study on the extracting procedure of Gangmei compound granules
ZHONG Zhi1 , YANG Xiao-jun1 , WU Xue-mei1 , CHEN Hua-ping1 ,WU Tie2 , CHEN Zhi-dong 2(1.Af filiated
Hospital of Guangdong Medical College , Zhanjiang 524001 , China;2.Guangdong Medical College , Zhanjiang 524001 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To find the best ex tracting pro cedure of Gangmei compound g ranules.METHOD An orthogonal test
w as used.The solvent dosage(A), extracting time(B)and ex tracting times(C)were the three factors in the experiment and three
levels of each facto r were chosen .The bacteriostatic effect o f the extract and the yield of ex tracte were studied.RESULTS The
factor C had very significant effect on the bacteriostatic tests bo th S taphylococus aureus and β-hemolytic Streptococcus (P <0.
01).The factor C had significant on the test of extraction(P <0.05)and the factor B had significant effect on the bacteriosta tic
tests(P<0.05 and P <0.1).The facto r B had no significant effect on the test of ex traction and the factor A had no sighificant
difference effect on the test of ex traction and the bacteriostatic tests(P>0.1).CONCLUSION The best extracting procedure is
A 1B1 C1 , w hich means ex tracting 3 times by using 11 times of water , 1.5 h each time.
KEY WORDS:Gangmei compound g ranules;or thogonal test;the ex tracting procedure
  本院自制的复方岗梅冲剂具有清热解毒 , 消肿止痛 ,生
津利咽功效[ 1] 。其制备方法采用冲剂一般制备方法 , 成品
质量优劣的关键在于提取工艺。本实验采用 L 9(3)4 正交
表进行试验 ,以测定抑菌作用和浸膏得率作为考察指标 ,探
讨最佳工艺条件。
1 实验材料
1.1 药材
岗梅 、山芝麻 、水杨梅购自湛江市同仁药业有限公司 ,
经鉴定岗梅:为冬青科植物梅叶冬青 Ilex asprella (Hook.et
A rn.)Champ.ex Denth.的根。 山芝麻:为梧桐科植物山芝
麻 Helicteres angus tifolia L.的全枝。水杨梅:为茜草科植
物水杨梅 Adina rubella (Sieb.et zuce.)Hance 的根。
1.2 菌种
金黄色葡萄球菌 ,乙型溶血性链球菌 , 均由广东医学院
微生物教研室提供。
1.3 培养基
普通肉汤琼脂培养基由中国药品生物制品检定所提
供 , 乙型溶血性链球菌培养营养要求较高 , 制备平板需加
10%兔血清。
2 实验方法与结果
2.1 正交试验设计
根据传统汤剂的提取方法以及剂型的需要 ,选定提取时
间 、煎煮次数 、加水量作为考察因素, 以测定浸膏得率 , 抑菌
圈直径为考察指标 ,选用 L9(3)4 正交表进行试验 ,见表 1。
2.2 样品溶液的制备
称取岗梅 、水杨梅和山芝麻 , 共 9 份。按表 L9(3)4 正
交表试验水提条件提取 , 煎液滤过 , 浓缩至适量 , 每份定容
于 500mL 量瓶中 ,制得每 1m L含 1g 原生药的供试液 T1 ,
·29·中国现代应用药学杂志 2004年 2月第 21卷第 1期               Chin JMAP , 2004 February , Vol.21 No.1
DOI :10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2004.01.014
T 2 , T 3 , T 4 , T 5 , T 6 , T 7 , T 8 , T 9。精密吸取 T1 ~ T 9 试液各
50m L和 15mL , 分别在水浴上浓缩至适量 , 分别定容于
25m L和 5mL 量瓶中 , 制得供试液 A 1 , A2 , A3 , A4 , A 5 , A6 ,
A 7 , A 8 , A 9和 B1 , B2 , B3 , B4 , B5 , B6 , B7 , B8 , B9 。
表 1 因素水平表
Tab 1 Facto rs and levels in the experiment
因素
水平 加水倍量 A(倍) 煎煮时间 B(h)煎煮次数 C(次)
1 11 1.5 3
2 8 1.0 2
3 5 0.5 1
2.3 指标测定方法
2.3.1 浸膏得率测定:定量取供试液 T 1 ~ T9 各 50mL 于
已恒重的蒸发皿中 ,水浴蒸干 , 置(80±1)℃的烘箱中干燥
16h , 取出至干燥器中 1h , 精确称重 ,计算浸膏得率 , 结果见
表 2 , 3。
表 2 L9(3)4试验设计及抑菌圈直径(mm , n =6 , x±s)
Tab 2 L9(3)4 orthogonal design and bacteriostatic diameter
(mm , n =6 , x±s)
试验号 A B C D
结果
干膏得率
(%)
乙型溶血
性链球菌
金黄色葡
萄球菌
1 1 1 1 1 8.17 9.02 8.95
2 1 2 2 2 6.09 8.56 8.20
3 1 3 3 3 3.70 6.22 5.82
4 2 1 2 3 6.65 8.74 8.59
5 2 2 3 1 4.50 6.72 6.25
6 2 3 1 2 6.45 8.27 7.98
7 3 1 3 2 3.51 6.65 6.12
8 3 2 1 3 6.81 8.63 8.25
9 3 3 2 1 4.69 7.44 7.76
K 1 5.99 6.11 7.14 5.79
干膏 K 2 5.87 5.80 5.81 5.35
得率 K 3 5.00 4.95 3.90 5.72
R 0.99 1.16 3.24 0.44
乙型溶 K 1 7.93 8.14 8.64 7.73
血性链 K 2 7.91 7.97 8.25 7.83
球菌抑 K 3 7.57 7.31 6.53 7.86
菌圈 R 0.36 0.83 2.11 0.13
金黄色 K 1 7.66 7.89 8.39 7.65
葡萄球 K 2 7.61 7.57 8.18 7.43
菌抑菌 K 3 7.38 7.19 6.06 7.55
圈 R 0.28 0.70 2.33 0.22
表 3 浸膏得率方差分析表
Tab 3 Variance analysis o f the yield o f ex tract
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F 显著性
A 1.73 2 0.86 5.38 P>0.1
B 2.18 2 1.09 6.81 P>0.1
C 15.91 2 7.96 49.75 P<0.05
误差 0.33 2 0.16
2.3.2 抑菌作用的测定 采用纸片法(Ф3.5mm , 按常规制
备),用游标卡尺量取抑菌圈直径。每种菌做 3 个培养皿 ,
同一样品在同一培养皿中做 2 份 , 取其平均值。测定乙型
溶血性链球菌的抑菌作用取供试液 A 1~ A 9 , 测定金黄色葡
萄球菌的抑菌作用取供试液 B1 ~ B9 , 结果见表 2 , 4 , 5。
表 4 乙型溶血性链球菌抑菌圈方差分析表
Tab 4 Variance analysis of bacteriostatic tests in β-hemoly tic
Streptococcus
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F 显著性
A 0.24 2 0.12 6.00 P>0.1
B 1.15 2 0.58 29.00 P<0.05
C 7.55 2 3.78 189.00 P<0.01
误差 0.03 2 0.02
表 5 金黄色葡萄球菌抑菌圈方差分析表
Tab 5  Variance analysis of bacteriostatic test in Staphy lo-
cocus aureus
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F 显著性
A 0.13 2 0.07 1.75 P>0.1
B 0.74 2 0.37 9.25 P<0.1
C 9.97 2 4.98 124.50 P<0.01
误差 0.07 2 0.04
F1-0.10(2 , 2)=9 F1-0.05(2 , 2)=19 F1-0.01(2 , 2)=99
3 小结与讨论
3.1 本研究以测定浸膏得率 , 抑菌圈直径为优选正交方案
考察指标 , 方差分析结果表明:因素 C 对抑菌作用有非常显
著性(P <0.01);因素 C 对浸膏得率及因素 B 对抑菌作用
有显著性(P <0.05 和 P<0.1);因素 B对浸膏得率和因素
A 对浸膏得率 、抑菌作用均无显著意义(P>0.1);各列水平
和极差情况:浸膏得率和抑菌作用 , 因素 A , B , C 都是 K1>
K 2>K3 ,极差都是 RC>RB>RA;综合方差分析 、各列水平
和极差情况 , 表明因素 C 为主要因素 , 因素 B 次之 , A 因素
对实验的影响最小 , 即煎煮次数对浸膏得率和抑菌作用影
响最大 , 煎煮时间次之 , 加水量影响最小 , 最佳工艺为
A1B1C1 ,即用 11倍水提取 3 次 ,每次 1.5h。
3.2 本制剂中药材含有黄酮苷 、酚苷类等水溶性成分 , 适
用于热水提取 ,且各药材含淀粉 、黏液质 、糖类都较少 , 出膏
率一般在 7%左右(相对密度 1.28 ,常温), 成品服用量少 ,
因而不必考虑醇沉 ,按照中医药传统 , 煎出液完整保留各成
分 , 有利于全面发挥药效 , 而且减少生产工序 , 降低生产成
本。
3.3 提取液的浓度对不同菌种的抑菌实验影响较大 , 如
A1 ~ A9 试液对乙型溶血性链球菌均有明显的抑菌作用 , 而
对金黄色葡萄球菌 , A3 , A 5 , A7 试液却不显示抑菌圈 , 将试
液进一步浓缩至 B1~ B9试液后 ,对金黄色葡萄球菌的抑菌
作用增强 ,抑菌圈明显。这是由于 A3 , A5 , A7 提取液的浓度
未达到最低抑制金黄色葡萄球菌浓度。
参考文献
[ 1] 郭宏炳 ,林文戈.复方岗梅冲剂的制备及临床疗效观察[ J] .
广东医学院学报 , 1996 , 14(1):66.
收稿日期:2002-03-19
·30· C hin JMAP , 2004 February , Vol.21 No.1               中国现代应用药学杂志 2004年 2月第 21卷第 1期