全 文 ：中华中医药杂志(原中国医药学报)2008年 7月第23 卷第 7 期 CJTCMP, July 2008, Vol . 23, No.7 • 627 •
不肖之徒；良方要保持原本，不要妄自篡改；良方以救人为
务，不要以奇货可居。良医要珍视手中的良方，用于急需的病
人；掌握良方的人越多，救治的病人就越多”[3]。只有敞开心胸
传承医道，使他人有所得，自己的内心也会有所得，则医之仁德
可现矣。
参 考 文 献
[1] 东汉.许慎著.汤可敬撰. 说文解字今释.长沙:岳麓书社,2001
Eastern Han Dynasty.Xu Shen,Tang kejing. Now Explain of
Shuowen Jiezi.Changsha:Yuelu Publishing House,2001
[2] 杜治政,许志伟.医学伦理学词典.郑州:郑州大学出版社,2003
DU Zhi-zheng,XU Zhi-wei. Dictionary of Medical Ethics.
Zhengzhou: Zhengzhou University Press,2003
[3] 张鸿铸,何兆雄,迟连庄.中外医德规范通览.天津:天津古籍出
版社,2000
ZHANG Hong-zhu,HE Zhao-xiong,CHI Lian-zhuang. A Survey of
Chinese and Foreign Medical Ethics Standard.Tianjin：Tianjin
Ancient Books Publishing House,2000
(收稿日期:2007年11月20日)
·研究报告·
红芪总多糖体内抗肿瘤的实验研究*
姚宝泰，赵健雄，王学习，雷丰丰
（兰州大学基础医学院中西医结合研究所，兰州 730000）
摘要：目的：研究红芪总多糖(THPS)单用及与环磷酰胺(CTX)合用对荷瘤小鼠的抑瘤作用，并探讨其机制。
方法：接种S180的昆明种小鼠腹腔注射低、中、高剂量THPS并联合使用CTX14天后，观察瘤重、抑瘤率、胸腺
指数和脾指数，流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群CD4+细胞和CD8+细胞数量。结果：与荷瘤对照组相比，中剂量
THPS明显抑制小鼠S180瘤生长(P<0.01)，增加胸腺指数(P<0.01)和脾指数(P<0.01)，提高CD4+细胞数量(P<0.05)；
中剂量THPS与CTX合用后，与环磷酰胺组比较，明显降低瘤重(P<0.05)，减轻CTX所致的胸腺指数(P<0.01)、脾指
数(P<0.01)、CD4+细胞(P<0.01)和CD8+细胞(P<0.05)数量的下降。结论：中剂量的THPS具有抑制S180瘤生长，减轻
CTX的免疫抑制作用，其机制与提高免疫器官的重量和T细胞介导的免疫应答有关。
关键词： 红芪总多糖；荷瘤小鼠 ；T细胞亚群
Experimental study on anti-tumor activity of total hedysarum polybotrys saccharide in vivo
YAO Bao-tai, ZHAO Jian-xiong, WANG Xue-xi, LEI Feng-feng
(Institute of the Integrated Traditional and Western Medicine in Lanzhou University ，Lanzhou 730000,China)
Abstract: Objective: To investigate the suppressed eff ects of total hedysarum polybotrys saccharide(THPS) alone and
THPS combined with Cytoxan (CTX) on tumor-bearing mice and its mechanisms. Method: Kunming mice inoculated with S180
were given low, moderate and high dose THPS and THPS combined with CTX by intraperitoneal injection. Fourteen day later,
tumor weight , inhibition rate, thymus index and spleen index were observed . CD4+ and CD8+ lymphocyte were counted though
the fl ow cytometer. Results: Compared with the control, the moderate dose THPS showed signifi cantly suppressed eff ect on the
growth of S180 tumor(P<0.01) and increased eff ects on thymus index(P<0.01), spleen index(P<0.01) and CD4+ lymphocyte
count(P<0.05). Compared with the CTX group, THPS combined with CTX obviously reduced tumor weight(P<0.05) and delayed
decrease of thymus index(P<0.01) , spleen index(P<0.01) and the numbers of CD4+ (P<0.01)and CD8+ (P<0.05)lymphocyte
caused by CTX .Conclusions: The moderate dose THPS showed signifi cant suppressed eff ect on tumor in S180 -bearing mice and
reduced immunosuppression caused by CTX through improving the weight of immune organs and T cellular mediated immune
response.
Key words: THPS; Tumor-bearing mice;T-lymphocyte subsets
*甘肃省科技攻关项目(No.2GS064-A43-020-32)，兰州大学医学科研基金（No.LZUYX200601）
通讯作者：赵健雄，兰州市东岗西路兰州市兰州大学基础医学院中西医结合研究所，邮编：730000，电话：0931-8915184
E-mail：zhaojx-01@126.com
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机体的免疫功能对肿瘤的发生、发展、治疗及预后均发挥
着重要作用。多糖类化合物能提高机体的免疫功能，增强机体
抗肿瘤作用，如活化杀伤性T细胞和巨噬细胞、促进细胞因子
分泌[1]、活化补体等，并提高由化疗所致的免疫功能低下状态，对
多糖的研究已成为当今抗癌新药及抗癌辅助药研究的热点之
一。红芪总多糖(total hedysarum polybotrys saccharide,THPS)是
从红芪(radix hedysari)中分离得到的总多糖。红芪学名为多序岩
黄芪(hedysarum polybotrys Hand.-Mazz)，中医认为它有补气升
阳、固表止汗、托毒生肌和利水消肿等作用，能增强和调节免
疫功能及抗肿瘤[2]。以前文献虽有少量红芪多糖抗肿瘤研究，
但多用粗多糖，结构不清，笔者使用本研究所提取THPS，纯度
高，分子量及所含单糖明确，对其单用及与环磷酰胺（CTX）合
用通过整体动物模型荷S180瘤小鼠进行体内抑瘤实验，并初步
探讨其抗肿瘤作用机制。
材料与方法
1. 材料
1.1 实验动物与瘤株 清洁级昆明种小鼠90只，7-8周龄，雌雄
各半，体质量18-22g，由兰州大学实验动物中心提供，合格证号：
14-005，S180瘤株由北京中国医学科学院药物研究所提供。
1.2 药物 THPS：为本研究所提取。甘肃武都产红芪 , 由
兰州大学药学院封士兰教授鉴定，经水提、醇析、酶解及Sevag
法除蛋白，紫外分光光度计280nm检测无蛋白吸收峰为止。经
由中国科学院上海药物研究所丁侃教授测定：分子量为19kD,
纯度为94.3％，成分：阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖及葡萄糖，其
摩尔比为 0.42：0.53：0.34：1.00。临用时加生理盐水溶解至所需
浓度，无菌过滤器过滤除菌。环磷酰胺注射剂（CTX），200mg/瓶，江
苏恒瑞医药股份有限公司生产，批号：06101021。
1.3 试剂与仪器 FITC-CD4+单抗和PE-CD8a+单抗为Bio
Legend的试剂。COULTER EPICS -XL流式细胞仪为美国
COULTER公司生产，BP211D电子分析天平为德国Stor is公
司生产。
2. 方法
2.1 动物分组与造模 健康昆明种小鼠90只，雌雄各半，置
于清洁级动物室中，自由摄食饮水，适应两天后，按质量随机
分10只为正常对照组，剩余80只造模。从S180瘤株传代小鼠腹
腔抽取乳白色的腹水液，用生理盐水稀释至瘤细胞计数为25×
106/ml，在小鼠右前腋皮下接种瘤液0.16ml，造S180实体瘤模型，然后
称质量，按质量随机分8组 , 即荷瘤对照组、环磷酰胺组、THPS小剂
量组、THPS中剂量组、THPS大剂量组、THPS小剂量合CTX
组、THPS中剂量合CTX组和THPS大剂量合CTX组。
2.2 给药方法 腹腔注射，液体量按每20g鼠质量每天注射
0.15ml计算，THPS和CTX均按下述剂量溶于生理盐水中。正常
对照组和荷瘤对照组每天注射生理盐水，环磷酰胺组隔天注
射CTX 20mg/kg，未注射CXT日注射生理盐水。THPS小剂量
组、THPS中剂量组和THPS大剂量组每天注射THPS,剂量分别
为100mg.kg-1.d-1、 200 mg.kg-1.d-1和400 mg.kg-1.d-1，其与CTX的
合用组除每天注射该剂量的THPS外, 隔天注射CTX 20mg/kg 。每3
天称体质量，调整液体与药量，用药14天。
2.3 标本采集与测试方法 于注射给药第15天，称体质
量。摘除眼球采血，用EDTA-Na2 抗凝，测CD4+和CD8+细胞，严
格按照流式细胞仪COULTER EPICS-XL操作规程和试剂说明书
进行。剥离瘤体称质量，计算抑瘤率，抑瘤率＝（荷瘤对照组平
均瘤质量－治疗组平均瘤质量）/荷瘤对照组平均瘤质量×
100％。解剖取胸腺和脾脏称质量，计算胸腺指数和脾指数，胸
腺指数＝胸腺质量/体质量，脾指数＝脾脏质量/体质量。
2.4　统计学处理 数据以x-±s 表示, 均采用SPSS10.0 软
件行单因素方差分析,组间比较用Tukey法。
结果
1. THPS对S180体内生长的抑瘤作用 THPS中剂量组的对
小鼠S180瘤生长有明显抑制作用，平均抑瘤率达27.81％，与荷
瘤对照组相比差异有显著意义（P<0.01），同时与CTX合用有明
显的协同作用，与环磷酰胺组比较有显著性差异（P<0.05）。见
表1 THPS对S180体内生长的抑瘤作用及对小鼠胸腺指数、脾指数、外周血CD4+ 细胞和CD8+ 细胞的影响 (x-±s)
组别
正常对照组
荷瘤对照组
环磷酰胺组
THPS小剂量组
THPS中剂量组
THPS大剂量组
THPS小剂量合CTX组
THPS中剂量合CTX组
THPS大剂量合CTX组
n
10
10
10
10
10
10
10
10
肿瘤重量（g）
—
2.7177±0.2466
1.1024±0.3930▲▲
2.2745±0.2741
1.9618±0.2934▲▲
2.3005±0.2777
1.0984±0.4885▲▲
0.5932±0.2493▲▲△
1.0889±0.4121▲▲
抑瘤率（％）
—
—
59.14
16.31
27.81
15.35
59.58
79.28
59.93
胸腺指数（mg/g）
3.3618±0.5505
2.4440±0.4713 **
1.5460±0.3370 **▲▲
2.9770±0.4322△△
3.6240±0.4458▲▲△△
3.0680±0.6988△△
2.8910±0.5864△△
3.1700±0.5028▲△△
3.0490±0.4368△△
脾指数（mg/g）
4.8045±0.9974
7.8280±0.9400**
5.3400±0.9705▲▲
9.5620±0.9318**△△
11.5210±1.8046**▲▲△△
9.5750±1.4908**△△
8.4650±1.1568**△△
9.7200±1.3532**▲△△
9.3930±1.1751**△△
CD4+ (％)
42.57±4.96
35.34±4.54**
29.33±3.34**▲
38.27±3.66△△
42.06±4.02▲△△
39.45±4.09△△
37.24±4.10△△
41.32±4.03▲△△
37.19±4.45△△
CD8+ (％)
20.79±3.65
29.58±4.56**
26.90±3.28
30.13±4.79**
34.79±4.88**△
29.11±3.39**
27.86±4.64*
33.19±4.57**△
28.22±4.64**
注：与正常对照组比较,*P<0.05, **P<0.01；与荷瘤对照组比较 ，▲P<0.05，▲▲P<0.01；与环磷酰胺组比较 ，△P<0.05， △ △P<0.01。
中华中医药杂志(原中国医药学报)2008年 7月第23 卷第 7 期 CJTCMP, July 2008, Vol . 23, No.7 • 629 •
表1。
2. THPS对荷瘤小鼠胸腺指数和脾指数的影响 与正常对照
组比较，荷瘤对照组胸腺指数明显降低（P<0.01），脾指数明显
增高（P<0.01）。与荷瘤对照组比较，CTX能明显降低荷瘤小鼠
胸腺指数和脾指数（P<0.01），而THPS中剂量组明显增高胸腺
指数（P<0.01）和脾指数（P<0.01）。THPS各剂量组与CTX合用
后，与环磷酰胺组比较，均能明显减轻CTX所导致的胸腺指数
（P<0.01）和脾指数（P<0.01）的下降。见表1。
3. THPS对荷瘤小鼠外周血CD4+细胞和CD8+细胞的影
响 与正常对照组比较，荷瘤对照组 CD4+细胞明显降低（P<0.01），
CD8+ 细胞明显增高（P<0.01）。与荷瘤对照组比较，CTX能明
显降低荷瘤小鼠CD4+细胞（P<0.05），而THPS中剂量组明显
增高CD4+细胞（P<0.05）。与环磷酰胺组比较，THPS各剂量
组与CTX合用后，均能明显减轻CTX所致的CD4+细胞的减少
(P<0.01），而只有THPS中剂量合CTX组明显减轻CTX所导致的
CD8+细胞的减少（P<0.05）。见表1。
讨论
机体抗肿瘤特异性免疫反应以T细胞介导的免疫应答为
主。成熟的T细胞分为CD4 + T细胞和CD8+ T细胞两个亚
群，CD4+ T细胞既可通过分泌细胞因子，调节杀伤性T淋巴细
胞，巨噬细胞，NK细胞等的活性，亦可直接杀伤肿瘤细胞；CD8+
T细胞主要通过释放穿孔素，颗粒酶及Fas/FasL介导的凋亡杀
伤肿瘤细胞。环磷酰胺为公认的治疗肿瘤的有效药物之一，具
有细胞毒作用 , 在杀灭肿瘤细胞的同时, 抑制机体免疫功能[3]。
免疫功能低下 , 尤其是细胞免疫功能紊乱在肿瘤的发生发展
中起重要作用,也是导致目前肿瘤患者“难以治愈”现状的主要
原因之一[4]。如何提高机体的免疫应答能力,减轻化疗药物所致
的免疫抑制，是肿瘤治疗研究的重要课题。
多糖可通过改变细胞膜的生化特性、诱导肿瘤细胞分化与
凋亡、影响肿瘤细胞内信号传递等多途径发挥抗肿瘤作用，
但一般认为免疫调节是其主要作用方式[5]。崔笑梅等[6]研究显
示不同浓度的红芪多糖对淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞)
的增殖均无促进作用,但可显著增强LAK细胞和外周血单个核
细胞(PBMC)对膀胱肿瘤EJ细胞株和原代细胞株的杀伤作用。
本实验表明，中剂量的THPS对荷瘤小鼠S180抑瘤作用最强，大
剂量和小剂量的THPS效果不及中剂量，说明有最适剂量,李晓
玉等[7]认为糖类的免疫调节作用的一个显著特点是具有最适量
效，这可能与多糖的生物活性主要通过与相应受体识别才能发
挥作用有关。近年来发现的糖类受体主要有CR3、甘露糖受体
及Dectin-1等，而表达在免疫细胞表面的此类受体是有限的，故
THPS不是剂量越高越好。
中剂量的THPS明显增加荷S180瘤小鼠胸腺指数和脾指
数，提高CD4+T细胞数，其抑瘤机制与提高免疫器官质量，调节
T细胞亚群，增加CD4+T细胞数，提高机体T细胞介导的免疫应
答有关。THPS各剂量组与CTX合用后，能减轻CTX所导致的
胸腺指数、脾指数和CD4+T细胞数的下降，中剂量的THPS与
CTX合用后，能减轻CTX所导致的CD8+ T细胞数的下降，这也
解释了中剂量的THPS与CTX合用后抑制肿瘤生长具有协同
作用，抑瘤效果比单用CTX好，其机制与中剂量的THPS能拮
抗CTX所导致的免疫器官的萎缩和T细胞亚群CD4+T细胞及
CD8+ T细胞的下降，减轻和恢复CTX所导致的免疫功能低下
有关。
参 考 文 献
[1] Tang W,Heman I,Bertram B.Recent development of anti-tumor
agents from Chinese Herbal medicines,PartⅡ.High molecular
compounds. Planta Med,2003,69(2):193-201
[2] 马骏,任远,崔祝梅,等.红芪多糖对氢化可的松所致免疫抑
制模型小鼠T淋巴细胞亚群的影响.甘肃中医学院学报,
2003,20(3):18-19
MA Jun,REN Yuan,CUI Zhu-mei,et al. Effect of hedysarum
polybotrys saccharide on T- lymphocyte subsets in mouse model of
immunosuppression caused by cetacort .Journal of Gansu College
of Traditional Chinese Medicine, 2003,20(3):18-19
[3] 程嘉艺,柴瑞华,阎醒予,等.扶正颗粒对免疫功能影响的实验
研究.中华中医药杂志,2007,22(11):794-797
CHENG Jia-yi, CHAI Rui-hua, YAN Xing-yu, et al. Experimental
study on effect of Fuzheng granules on immunologic function.
China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy,
2007 , 22(11) : 794- 797
[4] 陈尉峰.医学免疫学.3版.北京:人民卫生出版社, 2002:230-234
CHEN Wei-feng. Medical Immunology(the third edition).Beijing:
People’s Medical Publishing House, 2002:230-234
[5] 王健,龚兴国.多糖的抗肿瘤及免疫调节研究进展.中国生化
药物杂志,2001,22(1):52-54
WANG Jian,GONG Xing-guo. Advances in the studies on the
antitumor activity and immunomodulating action of polysaccharides.
Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics, 2001,22(1):52-54
[6] 崔笑梅,任远,王志华,等.红芪多糖增强LAK细胞对膀胱肿瘤
细胞的杀伤作用.中药药理与临床,1998,14(2):19-20
CUI Xiao-mei,REN Yuan,WANG Zhi-hua, et al. Effect of Radix
Hedysari Polysaccharide (HPS) enhancing cytotoxicity of LAK cell
on bladder cancer in vitro. Pharmacology and Clinics of Chinese
Medica, 1998,14(2):19-20
[7] 李晓玉,李俊.免疫药理学新论.北京:人民卫生出版
社,2004:302-306
LI Xiao-yu, LI Jun.New Viewpoints on Immunopharmacology.
Beijing: People,s Medical Publishing House, 2002:302-306
(收稿日期:2007年10月22日)