全 文 ：ScienceandTechnologyofFoodIndustry
2007年第07期
万政敏 1,郝艳宾 2,杨春梅 1,齐建勋 2,赵丽芹 1,王克建 2,*
(1.内蒙古农业大学食品科学与工程学院,内蒙古呼和浩特010018;
2.北京农林科学院林业果树研究所,北京100093)
摘 要:采用HPLC对核桃仁种皮中的多酚类物质进行了分析研
究。结果表明:核桃仁种皮中的酚酸类物质检测到17种,
标样中的 6种全部含有,含量最高的是没食子酸,为
146.2mg/100g干样,含量最少的是阿魏酸,为6.1mg/100g
干样;黄酮类物质检测到 8种,标样中芦丁的含量最高,
为187.6mg/100g干样,桑色素没有检测到。
关键词:核桃仁种皮,多酚,高压液相色谱
Abstract:The determination ofpolyphenols in the walnut
kernelpeliclewasstudiedbyHPLC.Theresults
showed that17 kinds ofphenolic acids were
determinedinthewalnutkernelpelicle,including6
kindsofstandards;Thegalicacidcontentwas
146.2mg/100gdryweightwhichwasthehighest
inthestandards,andtheferulicacidcontentwas
6.1mg/100g dry weight, the lowest in the
standards;8kindsofflavonoidsweredeterminedin
thepelicle,therutincontentwas187.6mg/100gdry
weight,andthemorinwasnotdetermined.
Keywords:walnutkernelpelicle;polyphenols;HPLC
中图分类号:TS201.1 文献标识码:A
文 章 编 号 :1002-0306(2007)07-0212-03
收稿日期:2006-12-07*通讯联系人
作者简介:万政敏(1980-),女,硕士研究生,研究方向:农产品加工与
贮藏。
核桃(JuglansregiaL)又名胡桃、羌桃,系胡桃科
核桃属植物,是人类所知的最古老的树生坚果之一[1]。
核桃仁中除了含有丰富的不饱和脂肪酸、优质蛋白
质和少量的碳水化合物外,还含有丰富的具有生理
活性的多酚类物质,对人体起到了积极的抗氧化作
用[2,3,4,6]。Szetao等人研究表明,核桃仁中的单宁含量
为372～1095mg,儿茶素/100g干重[3]。LeonardJurd研
究表明,核桃仁种皮含有邻苯三酚的衍生物,即鞣花
酸、没食子酸、没食子酸甲酯和胡桃苷 [5]。KorenJ.
Anderson从英国核桃仁中提取的多酚类物质能有效
抑制由AAPH(2,2′-Azobishydrochloride2,2′-偶氮-
2-眯基丙烷)或 Cu离子诱导的低密度脂蛋白的氧
化;可以显著抑制血浆中硫代巴比妥酸反应物的形
成[2];核桃仁提取物的Trolox当量抗氧化能力要高于
α-维生素E,在评价核桃的抗动脉粥样硬化的作用
时他认为应该考虑到核桃多酚的作用[7]。核桃仁主要
由种皮和胚乳等部分组成,多酚类物质可能主要分
布在核桃种皮中,是核桃仁产生收敛性的主要原因。
为了进一步了解核桃仁中多酚类物质的种类、含量
及分布情况,本文采用高压液相色谱(HPLC)外标法
对核桃仁种皮中的多酚类物质进行了定性定量分
析,并以去掉种皮的核桃仁为对照样品,进行了对比
分析。
1材料与方法
1.1材料与设备
甲醇、乙醚、磷酸 均为分析纯;没食子酸、绿原
酸、咖啡酸、对羟基苯甲酸、香豆酸、阿魏酸、芦丁、桑
色素、槲皮素 为Sigma公司产品,纯度为色谱纯。
冷冻干燥机 TFD-550-5日产;高压液相色谱
(HPLC)Water244型,柱子为 DiamosilC18 (0.4×
25cm)、低温冰柜;超声波 SK3200HP上海科导;万分
之一电子天平 FA1004型,上海精科天平厂。
1.2核桃预处理
采集新鲜核桃果实30个,人工剥离鲜核桃仁种
皮,将获得的种皮立即进行液氮冷冻处理,再进行真
空冷冻干燥48h。将干燥后的样品充氮包装,在-28℃
条件下贮藏,备用。去掉种皮的核桃仁也按上述方法
进行处理,作为对比样品。
1.3多酚类物质的提取
精密称取研细的核桃仁种皮 2.0g,于 100mL
具塞三角瓶中,用甲醇+超声波浸提 2次,合并提
取液,0.45μm滤膜过滤,定容至 50mL,待液相色谱
分析。
去掉种皮的核桃仁中油脂含量比较高,需要先
用乙醚进行脱脂处理。其他步骤同上。
1.4多酚类物质的HPLC色谱分析条件
1.4.1酚酸类
1.4.1.1标准溶液的配制 分别精密称取没食子酸、
核桃仁种皮中的多酚类物质
高压液相色谱分析
分析 检 测
212
DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2007.07.064
Vol.28,No.07,2007
2007年第07期
绿原酸、咖啡酸、对羟基苯甲酸、香豆酸和阿魏酸
5.0mg,用甲醇定容到50mL,待用。
1.4.1.2液相色谱操作条件 色谱柱:Diamosil C18
(0.4×25cm);流动相:35%CH3OH,65%H2O,用 H3PO4
调 pH到 3;流速:0.8mL/min;进样体积 20μL;检测
器:UV254nm。
1.4.2类黄酮
1.4.2.1标准溶液的配制 分别精密称取芦丁、桑色
素、槲皮素5.0mg,用甲醇定容到50mL,待用。
1.4.2.2液相色谱操作条件 色谱柱:Diamosil C18
(0.4×25cm);流动相:70%CH3OH、30%H2O,用 H3PO4
调 pH到 3;流速:0.8mL/min;进样体积 20μL;检测
器:UV365nm。
2结果与分析
现代药理实验表明,多酚类物质对人体一般都
具有抗氧化性、抗诱变性和抗癌活性,如咖啡酸用于
治疗各种原因引起的白细胞减少症、血小板减少症;
绿原酸为众多药材和中成药抗菌解毒、消炎利胆的
主要有效成分,具有清除自由基、抗脂质过氧化、抗
诱变作用,通常被作为定性甚至定量的指标;阿魏酸
在人体内具有抗血栓、抗炎镇痛、抗氧化、抗自由基
等作用,临床主要用于冠心病、脑血管、脉管炎及白
细胞和血小板减少等病症;芦丁是黄酮醇类的主要
来源,有维生素的作用,能降低血管脆性及异常通透
性,可作防治高血压及动脉硬化的辅助治疗剂;槲皮
素具有较好的祛痰、止咳、平喘、降低血压、增强毛细
血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状
动脉、增加冠脉血流量等作用,用于治疗慢性支气管
炎,对冠心病及高血压患者也有辅助治疗作用。
高压液相色谱分析表明(图1),核桃仁种皮中多
酚类物质的种类和含量都比较丰富。在核桃仁种皮
中 HPLC检测到17种酚酸类物质,标样中的没食子
酸、绿原酸、咖啡酸、对羟基苯甲酸、香豆酸和阿魏酸
6种酚酸类物质全部含有,含量最高的是没食子酸,
含量达到146.2mg/100g干样,最少的是阿魏酸,含量
为6.1mg/100g干样;而在无种皮的核桃仁中,HPLC
检测到的酚酸类物质仅为7种,标样中的6种酚酸
类物质只检测到没食子酸和对羟基苯甲酸两种,含
量也明显减少,分别为5.3和0.8mg/100g。
在核桃种皮中黄酮类物质检测到8种(图2),标
样中的芦丁和槲皮素被检测到,含量分别为187.6和
8mg/100g干样;在无种皮的核桃仁中黄酮类物质检
测到 7种,但是芦丁和槲皮素的含量仅为 0.9和
0.6mg/100g干样。
3讨论
核桃仁种皮一般只占整个仁重量的 10%左右,
但是测试结果表明,核桃仁中对人体有益的多酚类
物质主要集中在种皮部分,而在无种皮的核桃仁中
酚酸类物质的种类和含量都明显减少,黄酮类物质
的种类和种皮中的相比虽然差别不大,但是含量也
明显减少。种皮中的没食子酸等酚酸类物质是核桃
仁产生收敛性的主要原因,带种皮的核桃仁一般不
受人们的欢迎。将核桃仁的种皮去掉以后,口感就比
较好,但是核桃仁去掉种皮后,可能会因多酚类物质
种类和含量的减少而降低其生理活性。
参考文献:
没食子酸 绿原酸 咖啡酸 对羟基苯甲酸 香豆酸 阿魏酸 芦丁 桑色素 槲皮素
种皮 146.2 17.6 7.9 30.2 6.9 6.1 187.6 / 8
无种皮的仁 5.3 / / 0.8 / / 0.9 / 0.6
表1核桃仁种皮中的多酚类物质HPLC分析(mg/100g干样)
图1核桃仁种皮中酚酸类物质的高压液相色谱分析
360.0
300.0
240.0
180.0
120.0
60.0
0.0
mV
0 5 10 15 20 25 30 35 min
注:没食子酸保留时间 (min):5.021;绿原酸保留时间
(min):7.682;咖啡酸保留时间(min):10.097;对羟基苯甲
酸保留时间(min):13.438;香豆酸保留时间(min)29.437;
阿魏酸保留时间(min):30.622。
图2核桃仁种皮中黄酮类物质的高压液相色谱分析
120.0
100.0
80.0
60.0
40.0
20.0
0
mV
0 3 6 9 12 15 18 21
注:芦丁保留时间 (min):5.440;槲皮素保留时间(min):
10.273。
(下转第224页)
分 析 检 测
min
213
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(上接第213页)
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