全 文 :云 南 中 医 中 药 杂 志 !#年第!$卷第%期
滇丹参醇提与&’()*+!萃取中总丹参酮的降解动力学比较
卫 强,梁晓原,陈 奎
,云南中医学院,云南 昆明 $#!-
摘 要: 目的:考察传统提取工艺与超临界二氧化碳
(&’()*+!)萃取中总丹参酮在干燥过程中的降解动力学异
同。方法:采用紫外分光光度法,考察在常压干燥(./)和减
压干燥(0#/)条件下总丹参酮的含量变化及降解率。结果:
足三里穴位,定位取穴按《实验针灸学》1!2。
34% 试剂及仪器
34%43试剂 氢化可的松:扬州制药有限公司生产,,苏卫药准字(3.5!)第
!6303号-;血清&+7、879试剂盒:南京建成生物工程公司提供。
34%4!仪器 :;<)64!型台式冷冻离心机(北京医用离心机厂),
=>)3$型紫外可见分光光度计检测,北京瑞利分析仪器公司-。
346 统计分析 应用&?&&334统计软件对本研究结果和所得
数据进行统计学处理,计量资料采用@检验。
! 结果与分析
结果见表3A6
表3 治疗前后各组家兔血清&+7 ,B=/CD-检测结果对比(!EF )
空白对照组 模型组 电针组 补法组 泻法组
治疗前 35.45#E#403 30.4$E.4%# 3054.3E%403 3004#E6455 305405E#46!
治疗后 3554%.E.4!%! 35!4$$E045.! 3.3430E#4#G 3.040!E$4%G 3554!E5450H
注:!? I4#,G? J43,H? J4#
表! 治疗后各组家兔血清&+7,B=/CD-检测结果组间对比(!EF )
组别 K &+7 组间对比 L ? 值
空白对照组 $ 3554%.E.4!% 空白对照组——模型组 4$## 4#63
空白对照组——电针组 )40.. 46$3
模型组 . 35!4$$E045. 空白对照组——补法组 )34$00 43#6
空白对照组——泻法组 46# 4.$#
电针组 $ 3.3430E#4# 模型组——电针组 )!4##! 4#3
模型组——补法组 )%46.0 430
补法组 $ 3.040!E$4% 模型组——泻法组 )4030 4##
电针组——补法组 )!43% 43
泻法组 $ 3554!E5450 电针组——泻法组 4$5# 4#!6
补法组——泻法组 34.$$ 43$
注:模型组与补法组比较,? J4#;其余各组相比较,? I4#。
表% 治疗前后各组家兔血清879 ,KCMD/CD-检测结果对比(!EF )
空白对照组 模型组 电针组 补法组 泻法组
治疗前 !465E466 %45%E343$ #4#0E!46% #40!E!4! 645#E34$!
治疗后 !4%6E4!.! %4%5E!4#!! !4!0E4#6G !4!!E34.G !40E4#!H
注:!? I4#,G? J43,H? J4#
表6 治疗后各组家兔血清879,KCMD/CD-检测结果组间对比(!EF )
组 别 K 879 组间对比 L ? 值
空白对照组 $ !4%6E4!. 空白对照组)模型组 )343$# 4!.$
空白对照组)电针组 4%#. 40%6
模型组 . %4%5E!4#! 空白对照组)补法组 4!6! 453.
空白对照组)泻法组 34$.% 43#3
电针组 $ !4!0E4#6 模型组))电针组 34!33 4!5
模型组))补法组 3436! 4%#
补法组 $ !4!!E34. 模型组))泻法组 34%. 4!!%
电针组))补法组 405 4.63
泻法组 $ !40E4#! 电针组))泻法组 450. 46!
补法组))泻法组 4!$6 45!
注:各组相比较,? I4#,无明显差异。
由以上6表可知,治疗以后,除空白对照组、模型组外,
其它各组家兔血清&+7都比治疗前显著升高。治疗以后,
除空白对照组、模型组外,其它各组家兔血清879都比治
疗前显著降低。针刺治疗后各组家兔血清&+7结果,模型
组——补法组比较,? J4#;提示补法组&+7提高较为明
显;其余各组相比较,? I4#,组间无明显差异。针刺治
疗后各组家兔血清879结果,除各组相比较,? I4#,组
间无明显差异,但从其降低的趋势可看出,针刺补法组优
于其它!组。
% 讨论
&+7是一种极其有效的抗氧化剂,对机体的氧化和抗氧
化的平衡起着至关重要的作用,能抵御超氧阴离子自由基
,NOPP OQRSQTQD-对细胞的破坏,对机体组织细胞有着抗衰老、
抗氧化的重要作用。人体内自由基能攻击生物膜中的多不饱
和脂肪酸(UMDVWKFQ@WOQ@PR NQ@@V QTSR,?=’9),引发脂质过
氧化作用,并因此而形成脂质过氧化物,如丙二醛(879),
879含量的高低,可以反映机体自由基代谢情况,亦可以间
接反映机体细胞受损、衰老的程度。古人对衰老的发展规律
早有认识,并强调人到中年已显露开始肾阳气虚征象,暮年
则更为明显。肾阳虚和衰老虽不完全等同,但由于肾阳为元
阳真阳,肾又为水火之宅,故在临床上肾阳虚表现出全身机
能减退,其征象与衰老相似,由此肾阳虚与衰老有着密不可
分的关系。本实验造模成功的肾阳虚家兔,其血清&+7含量
下降,血清879含量上升,我们对其分别施以电针、提插补
法、提插泻法治疗。观察发现,治疗后均能提高&+7的含量,
降低879的含量,清除体内自由基,减少其对机体的损伤。
同时还发现,提插补法对提高&+7含量,降低879的含量,优
于电针及提插泻法。此结果肯定了本实验提插补泻所设定量
化操作,但是否此操作同样适用于临床,还有待于今后的进
一步研究。
参考文献:
132 孙国杰4针灸学1824上海:上海科学技术出版社,3..#4304
1!2 林文注4实验针灸学1824上海:上海科学技术出版社,3..#4!5%4
(收稿日期:!#)%)3。)
6!
DOI:10.16254/j.cnki.53-1120/r.2005.03.048
!#年第!$卷第%期 云 南 中 医 中 药 杂 志
表& 干燥工序的降解动力学(!’( )
时间()) 常规醇提液 *+,-./!萃取液 常规醇提液 *+,-./!萃取液
(01,常压) (01,常压) (2#1,减压) (2#1,减压)
!3$!’3!%! !3%%2’3&2 !3$!’3!%! !3%%2’3&2
&! &300’3&$ !34$’3!55 &302&’30%% !3’3&%#
!5 &34&5’3404 &302$’3&&0 &30%5’3!!$ !3&%$’3$
%$ &322$’3!2& &30%!’3&%# &30’3$$ !3&!&’3&42
54 &3$#%’35$! &3424’3& &34!2’3##$ !3&&&’3&$#
$ &3##4’34 &3$#4’3$02 &32$%’3&4! !300’3!4#
回归方程 678932&%#-355: 678934!%%-3540: 678932&0-3!550: 678934!%%-3&550:
相关系数 ;9-300&% ;9-30$5 ;9-3005 ;9-34&%&
降解率 !5355< !03#< &53#< &3&4<
*+,-./!萃取液有效成分纯度高,更不宜用常压干燥;其减压
干燥降解较醇提液缓慢。结论:*+,-./!萃取液在减压干燥时
与传统提取液相比有一定优势。
关键词:滇丹参;复方丹参片;总丹参酮;干燥;化学动力
学;稳定性
中图分类号:=!45 文献标识码:>
文章编号:&2-!%50(!#)%-5!-!
滇丹参为唇形科鼠尾草属植物,为临床常用的活血化瘀
药,在云南资源丰富,且分布广泛,作为丹参的代用品。丹参酮
类是从丹参中提取的二萜醌类和其他成分的总称,其中丹参
酮Ⅱ>是药典规定用于质量控制的有效成分。国内对于丹参酮
Ⅱ>的降解动力学作了考察?&@,已得出其一部分降解规律。
在《中国药典》(!版)的复方丹参片的生产工艺中,0#<
乙醇提取一次,由于醇浓度高,回收乙醇与浓缩时间均较短,对其
总丹参酮的降解影响较小,故笔者重点对常规乙醇提取液与*+,-
./!萃取液中总丹参酮在干燥过程的降解过程作比较实验。
& 材料与仪器
&3& 仪器 A>!!&-#-$超临界萃取装置(南通华安超临界萃取
有限公司生产),BC-!5#紫外分光光度计(日本岛津),>,D-&!
型电子天平(日本岛津),EF-4!>型电热真空干燥箱(上海实验
仪器厂有限公司),烘箱GHG-!型(宁波自动化仪表研究所)。
&3! 样品 药材滇丹参,购自昆明菊花村药材市场,经本院中
药学院药用植物教研室钱子刚副教授鉴定为唇形科滇丹参
*I6JKI LM77I7N7(K( .3A3G;KO):的根。对照品丹参酮Ⅱ>(批号
&&2$$-!%&5)由中国药品生物制品检定所提供。
&3% 试剂与原料 ./!气体(昆明氧气厂生产),所用试剂均为
分析纯。
! 实验方法与结果
!3& 对照品溶液的制备 精密称取$1减压干燥至恒重的
丹参酮Ⅱ>对照品#3$PO置#P6棕色容量瓶中,用氯仿溶解
并稀释至刻度,摇匀,得到浓度为3&&!PO/P6的丹参酮Ⅱ>
对照品溶液。
!3! 标准曲线的绘制 精密吸取丹参酮Ⅱ>对照品溶液3&Q3!Q35Q
3$Q32P6Q置于&P6容量瓶中Q用氯仿稀释至刻度Q使浓度分别为
&3&!Q!3!5Q5354Q$32!Q2345MO/P6Q以氯仿作空白Q于波长!27P处测定吸
收度Q绘制标准曲线Q回归方程为>93&&%&.-3!!Q;930002Q结果
表明丹参酮Ⅱ>对照品溶液在&3&!R2345MO/P6范围内呈线性关系。
!3% 供试液的制备及含量 按《中国药典》(!版)的复方丹
参片的生产工艺?!@,并参考导师对工艺的研究?%@,称取%O滇丹
参粗粉,加入$倍量0#<乙醇,回流提取&3#)Q抽滤!次Q浓缩后补
足体积至5P6Q移至棕色瓶中Q密闭避光保存。另称取滇丹参粗
粉%O用*+,-./!萃取设备进行萃取(萃取温度%#1,压力
HSI,流量!#T/),0#<乙醇,萃取%)),收集萃取液补足体积
至5P6后同法保存。
含量测定:取醇提液&P6,2#1减压挥干,用#P6蒸馏水溶
解,并用等量氯仿萃取%次,合并萃取液,取萃取液定容后照
BC;*+,-./!萃取液同取&P6,2#1减压挥干,直接用一定量氯
仿溶解定容后照BC。
!35 醇提液与萃取液干燥工序的降解动力学 精密吸取丹参醇提
液(79%)&P6共%份,置于小瓶中,各取份分别置01(常压)、
2#1(减压,真空度为3#HUI)烘箱中,间隔一段时间取%份样品
测定含量。同法取萃取液置于同一条件下。结果见表&和图&。
图& 不同提取工艺下的干燥工序降解过程
(醇提液:V-01,!-2#1 *+,-./!萃取液:-01,#-2#1,)。
% 小结与讨论
为了更好的考察其降解过程,与考察液取样一致,我们
将其测定起始含量的取样量由!R%P6改为&P6,所以其
起始含量小于其真实含量,以致其降解率较以前考察偏低。
考虑到挥去少量水分的需要,我们将温度定为常压01,减
压2#1。
从降解过程可知,在低温减压(2#1)下,*+,-./!萃取液
降解稍慢,提示在减压2#1干燥下萃取液有一定优势;但常压
01干燥下,*+,-./!萃取液降解较迅速,提示萃取液更不宜
常压干燥。
常压干燥(01)后,用氯仿和水萃取后,常规醇提液其水
层颜色为黄色,并有较多白色粉状不溶物;而*+,-./!萃取液
水层近透明无色,白色粉状不溶物较少。提示常规提取液中可
能有酚酸类成份,其起到了抗氧化作用;而*+,-./!萃取液由
于为./!与夹带剂共同萃取,提取温度低,提取出酚酸类成分
少,总丹参酮含量高,在高温下降解较迅速。
参考文献W
?&@ 苏子仁,曾惠芳,曾元儿,等3丹参醇提工艺中丹参酮Ⅱ>降解动力
学研究?X@3中成药,&002,&0(&!):&R%3
?!@ 中国药典委员会3中国药典?H@3北京3化学工业出版社3!3#&4R#&03
?%@ 侯安国,梁晓原,李树帜,等3正交实验优选复方丹参片0#<醇提工
艺研究?X@3云南中医学院学报(增刊),!,!%:%&R%%3
Y收稿日期:!#-!-!4。Z
5%