全 文 ：云南植物资源丰富,特别是药用植物滇丹参为
云南特有资源。据调查,鼠尾草属植物云南产37种
11变种4变型,其中作丹参药用的达14种之多〔1〕。滇
丹参为唇形科滇丹参(SakiayunnanensisC.Hwright)
的根及茎,又称小紫丹参,在云南广泛栽培,其药理
活性与丹参类似,具有较强的治疗心血管系统疾病的
作用〔2~4〕,为临床常用的活血化瘀、调经止痛、清热
安神药物,可作为丹参的代用品。滇丹参为地方习用
药材,其化学成分较丹参更为复杂,相关研究不多,
本实验采用HPLC法测定其丹参酮ⅡA的含量〔5~7〕,为
控制滇丹参药材的质量标准提供参考依据。
1 仪器与试剂
1.1 仪器 Agilent-1100高效液相色谱仪(真空在线
脱气机,四元泵,自动进样器,柱温箱,DAD检测器,
Chemstation化学工作站),AL204型电子分析天平。
1.2 试剂 滇丹参药材(产地:大理感通寺半山腰,
高效液相色谱法测定滇丹参中丹参酮ⅡA的含量
王忠英,李艳娥,李海峰,段宝忠,杨永寿
(大理学院药学院,云南大理 671000)
[摘要]目的:建立高效液相色谱法测定滇丹参中丹参酮ⅡA的含量。方法:采用ZORBAXSB-C18(4.6mm×
150mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-水(75∶25);柱温25℃;检测波长270nm;流速1.0ml/min;进样量10μl。
结果:丹参酮ⅡA在0.0041~0.4100μg/L范围内线性关系好,r=0.9999(n=6),平均回收率为98.59%,RSD为
1.05%。结论:该方法准确、快速、灵敏,可用于滇丹参的质量控制。
[关键词]高效液相色谱法;滇丹参;丹参酮ⅡA;含量测定
[中图分类号]R927[文献标识码]A [文章编号]1672-2345(2008)08-0007-02
[基金项目]大理学院大学生科研基金资助项目(07DXS046)
[收稿日期]2008-05-16
[作者简介]王忠英(1986-),女,云南宣威人,2005级药学专业本科生.
ContentDeterminationofTanshinoneⅡAinSalviaYunnanensisC.HWrightbyHPLC
WANGZhong-ying,LIYan-e,LIHai-feng,DUANBao-zhong,YANGYong-shou
(ColegeofPharmacy,DaliUniversity,Dali,Yunnan671000,China)
〔Abstract〕Objective:ToestablishaHPLCmethodforcontentdeterminationofTanshinoneⅡAinSalviayunnanensisC.Hwright.
Method:TheZORBAXSB-C18(4.6mm×150mm,5μm)wasused,mobilephasewasmethanol-water(75:25),columntemperaturewas
setat25℃,thedetectionwavelengthwas270nm,theflowrateofmobilephasewas1.0ml/minandinjectionvolumewas10μl.
Results:ThelinearrangeofTanshinonewas0.0041~0.41μg/L,r=0.9999(n=6),theaveragerecoverywas98.59%,withRSD1.05%.
Conclusion:Themethodwasaccurate,fastandsensitive.ItwassuitableforthequalitycontrolofSalviayunnanensisC.Hwright.
〔Keywords〕HPLC;SalviayunnanensisC.Hwright;TanshinoneⅡA;contentdetermination
大理学院学报
JOURNALOFDALIUNIVERSITY
第7卷 第8期2008年8月
Vol.7 No.8 Aug.2008
7
经大理学院药学院生药学教研室段宝忠老师鉴定
为滇丹参),丹参酮ⅡA对照品(中国药品生物制品
检定所,批号110766-200518),甲醇(色谱纯),水为
纯净水。
2 实验方法
2.1 色谱条件 色谱柱为AgilentZORBAXSB-C18
(4.6mm×150mm,5μm),流动相为甲醇-水(75∶25)〔8〕,
流速为1.0ml/min,检测波长为270nm,进样量为
10μl,柱温为25℃。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品储备液的制备 精密称取丹参酮ⅡA
对照品4.1mg,置10ml容量瓶中,用CH3OH溶解并定
容,得对照品储备液(410μg/ml)。
2.2.2 供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号
筛)约0.3g,精密称定重量,置具塞锥形瓶中,精密加
入甲醇50ml,称定重量,加热回流1h,放冷,再称定
重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,取续滤液,即
得供试品溶液。
2.3 方法专属性 在拟定的色谱条件下,分别取对
照品溶液和供试品溶液10μl进样测定,丹参酮ⅡA
能与杂质较好分离,无干扰。见图1。
A B
图1 对照品(A)和样品(B)的色谱图
*为丹参酮ⅡA;t=17.2min。
3 实验结果
3.1 线性试验 精密移取对照品储备液适量,于
10ml容量瓶中,加甲醇配制成浓度分别为205.00、
102.50、51.25、25.63、4.10mg/L的对照品溶液,分别
精密移取10μl进样。以峰面积为纵坐标,进样浓度
为横坐标,绘制标准曲线,并进行回归分析,回归方
程为Y=47.79741X-42.12504,r=0.9999。结果表明
丹参酮ⅡA在0.0041~0.4100μg/L范围内线性关系
良好。
3.2 精密度试验 精密吸取浓度为102.50mg/L的
丹参酮ⅡA对照品溶液10μl,按照上述色谱条件连
续进样6次得丹参酮ⅡA的平均峰面积为4954.2,测
得峰面积RSD为0.47%(n=6)。
3.3 稳定性试验 取同一供试品溶液,精密吸取
10μl,每隔2h进样测定1次,考察供试品溶液中丹参
酮ⅡA含量变化。结果平均峰面积为418.7(n=6),峰
面积RSD为0.33%,结果表明供试品溶液在10h内稳
定。
3.4 重现性试验 精密称取同一批样品6份,按供
试品溶液的制备方法制备供试品溶液。分别精密吸
取10μl进样,结果丹参酮ⅡA平均含量为0.15%,
RSD为1.6%(n=6),表明该方法具有良好的重现性。
3.5 回收率试验 精密称取已知含量的样品粉末
0.15g(6份),分别精密加入对照品溶液1ml(0.22g/L),
按供试品溶液的制备方法操作,分别精密吸取10μl
进样,测定丹参酮ⅡA含量,结果丹参酮ⅡA的平均
回收率为98.59%,RSD为1.05%(n=6)。
3.6 样品含量测定 按供试品溶液的制备方法制
备样品溶液,并分别取10μl进样测定丹参酮ⅡA含
量。结果见表1。
表1 滇丹参中丹参酮ⅡA含量测定结果(n=3)
4 讨论
滇丹参在云南药用历史悠久,本课题采用HPLC
法对滇丹参中有效成分丹参酮ⅡA的含量进行测
定,从测定结果看,滇丹参中丹参酮ⅡA的含量较丹
参略低〔8〕,但仍具有一定的药用价值。
本实验采用甲醇-水(75∶25)作流动相进行洗脱,
结果表明分离度和峰形均较好,为进一步控制滇丹
参药材的质量标准提供了依据,也为药典丹参资源
的扩大提供了依据。
(下转第17页)
RSD/%
2.0
编号
1
2
3
样品质量/g
0.3006
0.3014
0.3027
丹参酮ⅡA含量/%
0.1608
0.1588
0.1546
平均值/%
0.1581
大理学院学报总第56期 自然科学
8
(上接第8页)
大理学院生药教研室杨月娥老师在实验过程
中给予支持和帮助,药学院2005级2班李鑫、张进、
刘培丽、叶晓等同学给予帮助,在此谨致谢意。
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Xysticusdalisp.nov.(Fig.1)
Holotype.Male,XueshanRiver(25°36′N,99°54′
E),alt.2200m,YangbiCounty,DaliPrefecture,
YunnanProvince,China,28May2001,col.byZi-
ZhongYang;paratypes:fivemales,twofemales,
samedataasfortheholotype;paratypes:fivefe-
males,DaliUniversitycampus,leafliter,9May
2002,col.byZi-ZhongYang;paratypes:eightfe-
malesandtwentymales,CangshanMts.Alt.2000to
2900m,DaliCity,YunnanProvince,China,May
andJun.2004,col.byYu-LongWang;paratypes:
twofemalesandonemale,BaolinValey,Cangshan
Mts.,DaliCity,YunnanProvince,China,24May
2007,col.byYuan-YuanWang.
Diagnosis.ThisnewspeciesissimilartoXysti-
cusconcretusUtochkin,1968(Marusik&Logunov,
1996:133,figs.12-16),butcanbedistinguished
bythecombinationofthefolowingcharacters:male
palpalapicaltegularapophysisthickandshort,
colter-shaped;atriumslightlyrotundity,septumpre-
sent.
Etymology.Thenewspecificnamereferstothe
typelocality,DaliCity;adjective.
李宗煦,杨自忠 中国花蟹蛛属(蜘蛛目:蟹蛛科)1新种记述 第7卷总第56期
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