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香豆蔻药材的鉴别研究



全 文 :图 6 荠菜薄层色谱图
1. 精氨酸 2. 丙氨酸 3. 亮氨酸 4. 荠菜样品
4 小结
通过对荠菜的药材性状、显微及薄层色谱鉴别
表明,药材中含有氨基酸等成分。荠菜的根、茎显微
特征中皮层都有裂隙,都是由薄壁细胞构成。木质
部都由导管和纤维束组成。茎的横切面中部由 7 ~
8 个维管束断续排列成环。本研究可以为荠菜的药
材鉴定及药材质量标准的制定提供参考依据。
参 考 文 献
[1]江苏新医学院 . 中药大辞典[M]. 下册 . 上海:上海人
民出版社,1977: 1606.
香豆蔻药材的鉴别研究
张 伟1,刘柏英1,吴孟华2,顾利红1
( 1. 广州市药品检验所,广东 广州 510160; 2. 香港浸会大学,香港)
摘要 目的:对香豆蔻药材进行鉴别研究。方法:采用系统的中药鉴定方法对香豆蔻药材性状、显微特征进行
研究,并用气相色谱-质谱联用( GC-MS) 分析香豆蔻药材所含挥发油的化学成分。结果:一侧平坦、具 10 余条波状
狭翅可作为本种性状鉴别的特征; 内种皮厚皮细胞壁极厚,切面观排列成栅栏状,界限不甚清晰可作为本种显微鉴
别的特征;桉油精可作为本种 GC-MS法鉴别的特征性成分。结论:本研究结果可作为香豆蔻药材鉴定的方法。
关键词 香豆蔻;性状鉴别; 显微鉴别; GC-MS
中图分类号: R282. 5 文献标识码: A 文章编号: 1001-4454( 2012) 08-1243-03
收稿日期: 2012-04-19
作者简介:张伟( 1976-) ,男,主管药师,主要从事中药检验及质量标准制定的研究; Tel: 13826001382,E-mail: zyffzw@ hotmail. com。
香豆蔻药材来源于姜科豆蔻属植物香豆蔻
Amomum subulatum Roxb. 的干燥成熟果实,主要分
布于西藏( 墨脱) 、云南、广西等省区的荫湿林中,孟
加拉、尼泊尔、印度等国也有分布〔1〕。中医传统理
论认为,香豆蔻具有散寒行气、健胃消食的功效,主
治胃脘腹胀,食积不化,肺寒咳嗽等症〔2〕。香豆蔻
是云南多个少数民族的传统药物,常用于治疗喉痛、
肺结核、眼睑炎及消化不良等〔1〕。亦可当香料,用
来制作甜品和糕点〔2〕。香豆蔻还是印度阿育吠陀
和尤纳尼传统医学用于治疗胃肠功能紊乱的药物,
也是印度咖喱和奶茶习用香料之一〔3,4〕。香豆蔻的
生药学研究至今尚未见详细报道,为了更好的开发
利用中国的民族用药,并能准确鉴别,本研究对香豆
蔻药材的性状、显微特征进行了研究,并用 GC-MS
鉴别了香豆蔻挥发油中的主要成分。
1 仪器与材料
1. 1 仪器 挥发油提取器; Shimadzu GCMS-
QP2010 气相色谱质谱联用仪( 日本岛津公司) 。
1. 2 材料 香豆蔻药材购自广州清平药材市场和
印度旧德里香料市场,经广州市药品检验所刘柏英
老师鉴定为姜科豆蔻属植物香豆蔻 Amomum subula-
tum Roxb. 的干燥成熟果实,凭证标本保存于广州
市药品检验所中药标本室。α-蒎烯 ( 批号: 110898-
200502 ) 、柠檬烯 ( 批号: 100470-200801 ) 、桉油精
( 批号: 110788-201105) 对照品购自中国药品生物制
品检定所;石蜡为专供生物组织切片用;乙酸乙酯为
色谱纯,其他试剂均为分析纯。
2 方法和结果
2. 1 药材性状 果实呈长卵形,稍弯曲,一侧平
坦,长 1. 8 ~ 2. 5 cm,直径 0. 9 ~ 1. 4 cm。表面暗棕
色,具 10 余条波状狭翅,由一端向另一端逐渐明显,
先端有长形管状花萼。果实 3 室,每室有种子 6 ~
12 粒,暗棕色,呈不规则多面体,质硬。果皮较厚,
不易撕裂。气微,味微辛。
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DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2012.08.023
2. 2 显微鉴别
2. 2. 1 果皮横切面: 外果皮为 1 列扁平细胞。中
果皮薄壁细胞,类圆形或长圆形,内侧有外韧型维管
束,维管束外侧纤维群半月形;另有油细胞散在。见
图 1。
图 1 香豆蔻果皮横切面简图
1. 外果皮 2. 中果皮 3. 油细胞 4. 纤维鞘5. 韧皮部
6. 木质部 7. 内果皮 8. 维管束
2. 2. 2 种子横切面:种皮表皮细胞 1 列,呈长圆形
或类圆形,壁稍厚。下皮细胞 1 列,长方形,切向排
列,充满红棕色色素。油细胞 1 列,类长方形,切向
延长,内含油滴。色素层细胞数列,内含棕红色色素。
内种皮厚壁细胞 1 列,径向延长,圆柱形,壁极厚,含
硅质块。外胚乳为薄壁细胞,含众多草酸钙结晶和淀
粉粒。内胚乳细胞和胚细胞含糊粉粒。见图 2。
图 2 香豆蔻种子横切面简图
1. 假种皮 2. 表皮层 3. 下皮层( 含色素) 4. 油细胞层
5. 色素层 6. 内种皮 7. 外胚乳 8. 内胚乳 9. 胚
10. 种脊维管束
2. 2. 3 粉末:黄棕色。果皮表皮细胞表面观长条
形。果皮油细胞含油滴。果皮纤维长条形,末端渐
尖。种皮表皮细胞表面观长条形,末端渐尖或钝圆,
外具角质层。下皮细胞长方形或类圆形,常与表皮
细胞上下层垂直排列,胞腔含棕红色物。油细胞切
面观类长方形,有的胞腔可见油滴。色素层细胞数
列,内含棕红色色素。内种皮厚壁细胞表面观多角
形,直径 60 ~ 80μm,胞腔含硅质块,切面观细胞排
列成栅栏状,界限不甚清晰,胞腔位于上端。外胚乳
细胞含多数淀粉粒,淀粉粒或多个汇聚成淀粉团。
见图 3。
图 3 香豆蔻药材粉末显微图谱
1. 果皮表皮细胞 2. 果皮油细胞 3. 果皮纤维 4. 假种
皮 5. 种皮表皮细胞 ( a. 表面观,b. 断面观,c. 纵面观)
6. 下皮细胞( 含色素) 7. 油细胞 8. 色素层 9. 内种皮
细胞( 杯状含硅质块,a. 表面观,b. 断面观) 10. 外胚乳细
胞( 示含淀粉团等) 11. 色素块
2. 3 气相色谱-质谱联用分析
2. 3. 1 对照品溶液的制备: 分别取 α-蒎烯、柠檬
烯、桉油精适量,精密称定,置 10 mL容量瓶中,加乙
酸乙酯分别制成每 mL含 α-蒎烯、柠檬烯、桉油精分
别为 3 mg、5 mg、8 mg的溶液,即得对照品溶液。
2. 3. 2 挥发油的提取: 称取香豆蔻药材 100 g,置
圆底烧瓶中,加水约 500 mL,按中国药典 2010 年版
一部附录 XD挥发油测定法提取 5 h,收集挥发油提
取器中的油状液体,用无水硫酸钠脱去水分,得挥发
油 1. 4 mL,置 - 18 ℃保存备用。2. 3. 3 供试品溶
液的制备:精密吸取上述挥发油 10 μL,置 50 mL容
量瓶中,加乙酸乙酯至刻度,摇匀,得浓度为 0. 0143
g( 药材) /mL 的香豆蔻挥发油乙酸乙酯溶液,作为
供试品溶液。
2. 3. 4 气相色谱条件:色谱柱为 GC DB-5 毛细管
柱 ( 30 m × 0. 25 mm × 0. 25 μm ) ,进样口温度
220 ℃,程序升温: 起始温度40 ℃,保持 1 min,以
3 ℃ /min升至70 ℃,保持 5 min,再以 5 ℃ /min 升
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至250 ℃,保持 5 min。进样量 1 μL,载气 He,总流
速 6. 0 mL /min,柱流速 1. 0 mL /min,分流比 2∶ 1。
2. 3. 5 质谱条件:连接质谱接口温度250 ℃ ; 电子
轰击( EI) 离子源,离子源温度200 ℃,扫描范围 m/z
75 ~ 400,扫描间隔 0. 5 s;溶剂延时 5 min;数据采集
时间 6 ~ 30 min。
2. 3. 6 结果:用毛细管气相色谱法对供试品溶液
进行了分析,均出现与对照品溶液色谱峰保留时间
一致的色谱峰,对照品溶液色谱图见图 4。供试品
溶液共分离出 7 个主要成分,见表 1,总离子流图见
图 5。经面积归一化法测定各组分的百分含量,并
用气相色谱-质谱联用技术对各成分进行计算机质
谱数据库检索,并按各色谱峰的质谱裂片图与文献
资料核对,确定了香豆蔻挥发油中的主要成分。分
析结果见表 1。
图 4 α-蒎烯( a)、柠檬烯 ( b)、桉油精 ( c)
对照品 GC-MS总离子流图
图 5 香豆蔻挥发油 GC-MS总离子流图
表 1 香豆蔻挥发油 GC-MS分析结果
NO. 化学名称 分子量 分子式 保留时间/min 峰面积
相对含量
/%
1 α-Pinene α-蒎烯 136 C10H16 9. 637 2130708 5. 37
2 Sabinene 香桧烯 136 C10H16 11. 422 376044 0. 95
3 β-Pineneβ-蒎烯 136 C10H16 11. 614 2028492 5. 11
4 Limonene 柠檬烯 154 C10H18O 14. 653 1454387 3. 66
5 Eucalyptol 桉油精 154 C10H18O 14. 849 32428202 81. 65
6 4-Terpineol 4-松油醇 154 C10H18O 22. 784 360702 0. 91
7 α-Terpineol α-松油醇 154 C10H18O 23. 364 935313 2. 36
3 讨论
3. 1 与香豆蔻同属的姜科豆蔻属植物如白豆蔻、
草果等,所含成分均以挥发油为主,因此本实验的色
谱鉴别方法优先选用 GC-MS,桉油精占挥发油成分
的 80%以上,可作为香豆蔻药材鉴别的指标性成
分。
3. 2 文献报道香豆蔻果实含原儿茶酸〔5〕、小豆蔻
明、山姜素〔6〕等成分。本实验曾尝试采用高效液相
色谱法,以原儿茶酸、小豆蔻明、山姜素为对照品,
0. 5 g香豆蔻药材用 50 mL甲醇和 70%甲醇超声或
回流提取制备供试品溶液,在对照品出峰良好的情
况下,供试品中均未检出以上三种成分。推测以上
三种成分在香豆蔻药材中含量较低,不易检出。因
此高效液相色谱法不能作为药材的鉴别方法。
3. 3 香豆蔻药材的外观与草果较为相似而略小,
果皮均呈棕黑色。其性状鉴别以一侧平坦、具 10 余
条波状狭翅为显著鉴别点,可作为本种区别于草果
的鉴别特征。
3. 4 香豆蔻药材的显微鉴别中,内种皮厚壁细胞壁
极厚,切面观排列成栅栏状,界限不甚清晰为显著鉴
别点,可作为区别于其他姜科药材果实的鉴别特征。
参 考 文 献
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