全 文 :2016年 第 16期 广 东 化 工
第43卷 总第330期 www.gdchem.com · 173 ·
刺芫荽中总黄酮含量的测定
杨梦成 1,谢飞 1,黄晓孟 1,林华铭 1,艾朝辉 1,杨瑞 2,翟锐锐 1*
(1.海南医学院,海南 海口 571199;2.海南省农垦卫生学校,海南 海口 570311)
[摘 要]目的 用紫外分光光度法测定刺芫荽中总黄酮的含量。方法 用 60 %的乙醇提取总黄酮,以芦丁为对照品,在紫外 510 nm处测定。
结果 芦丁检测浓度在 0.0128~0.064 mg/L范围内与吸光度呈现良好的线性关系,R2=0.9996,加样平均回收率 101.69 %,RSD=0.57 %(n=6);用
乙醇回流提取法提取的总黄酮含量可达到 1.079 %。结论 本方法简便、快速、准确,操作简单易行,适用于黄酮类物质含量的测定。
[关键词]刺芫荽;分光光度法;总黄酮含量
[中图分类号]O65 [文献标识码]A [文章编号]1007-1865(2016)16-0173-02
Determination of Total Flavonoids in Eryngium Foetidum Linn
Yang Mengcheng1, Xie Fei1, Huang Xiaomeng1, Lin Huaming1, Ai Zhaohui1, Yang Rui2, Zhai Ruirui1*
(1. Hainan Medical College, Haikou 571199;2. Hainan Nongken Medical School, Haikou 570311, China)
Abstract: Objective: To determine total flavonoids in Eryngium foetidum Linn by UV-spectrometry. Methods: Total flavonoids was extracted with 60 %
ethanol and rutin was used as reference. The content was detected at 510 nm. Results: Calibration graphs were constructed in the range of 0.0128~0.064 mg/mL for
total flavonoids, R2=0.9996. The averager ecovery was 101.69 % for total flavonoids. The RSD of the method was 0.57 %, and the content of total flavonoids was
1.079 %. Conclusion: The method was proved to be simple, feasible, fast, and can be used for quality control for flavonoids in Eryngium foetidum Linn.
Keywords: Eryngium foetidum Linn;spectrophotometry;total flavonoids
刺芫荽(Eryngium foetidum L.)又称刺芹、洋芫荽、野芫荽、
假芫荽、大叶芫荽、缅芫荽、阿佤芫荽等,为伞形科刺芹属多年
生草本植物,目前在世界范围内,刺芫荽主要分布于拉丁美洲、
东南亚和非洲等地区[1]。在中国,主要分布于海南、广东、广西、
云南等热带、亚热带地区[2]。刺芫荽通常以全草入药,可用于治
疗感冒寒咳,哮喘,胃气痛,产后出血,跌打损伤,肠炎腹泻,
消化不良,胸痛,麻疹内陷,气管炎,急性传染性肝炎及蛇咬伤
等症[2-4]。迄今为止国内外对刺芫荽中黄酮的含量和成分还没有过
报道,本次试验就是以刺芫荽为研究对象,用紫外分光光度法首
次对其总黄酮的含量进行测定。
1 器材
1.1 仪器
752 型分光光度计(上海精密科学仪器有限公司);TP 电子天
平(湘仪天平仪器设备有限公司);分析天平(瑞士 METILER);粉
碎机(天津泰斯特仪器有限公司);回流提取器(天津泰斯特仪器有
限公司)。
1.2 试剂
芦丁对照品(中国药品生物制品检定所);镁粉,盐酸,硝酸
铝,亚硝酸钠,氢氧化钠,无水乙醇及其他试剂均为分析纯(广州
化学试剂公司);刺芫荽(采摘于海南海口府城地区,经海南医学
院药学院曾念开教授鉴定为刺芫荽全草,干燥,粉碎至 40~60目)。
2 方法与结果
2.1 样品的制备
电子天平称取 1 g刺芫荽粉末,置 30 mL圆底烧瓶内,用 60 %
乙醇 20 mL回流提取 1 h,常压过滤,用 60 %乙醇定容至 50 mL,
备用。
2.2 定性鉴别反应
盐酸—镁粉反应,取样品 1 mL,加少量镁粉,再加几滴浓盐
酸,水浴加热后呈红色。
2.3 标准品溶液的制备
精密称取芦丁标准品 32 mg于 100 mL容量瓶中,加适量的
60 %的乙醇溶液溶解并定容至刻度,摇匀,得 0.32 mg/mL的芦丁
标准储备液。
2.4 最大吸收波长的选择
分别量取3.0 mL芦丁标准储备液和5 mL刺芫荽样品溶液于25
mL容量瓶中,加入60 %乙醇补至5 mL,分别加入5 %亚硝酸钠溶
液1 mL,摇匀,放置6 min,加入10 %硝酸铝溶液1 mL,摇匀,
放置6 min,再加入4 %氢氧化钠溶液10mL,最后用60 %乙醇定容
至刻度,摇匀,静置15 min。以60 %乙醇为空白配制空白对照液,
在480~540 nm每隔5 nm测标准溶液及样品溶液的吸光度,结果对
照品溶液及样品溶液显色后均在510 nm处有最大吸收,因此确定
以510 nm为最大吸收波长来测定刺芫荽总黄酮的含量。
2.5 标准曲线的绘制
精密量取芦丁对照品溶液 0(空白),1.0 mL,2.0 mL,3.0 mL,
4.0 mL和 5.0 mL,分别置于 25 mL容量瓶中,按 2.4中显色方法
进行显色,在 510 nm处测定吸光度。结果见表 1。
表 1 浓度与吸光度线性实验结果
Tab1 The results of linear determination
编号 浓度/(mg·mL-1) 吸光度
1 0.0128 0.134
2 0.0256 0.260
3 0.0384 0.401
4 0.0512 0.525
5 0.064 0.653
以吸光度(A)为纵坐标,浓度(C)为横坐标绘制标准曲线得回
归方程:A=10.18C+0.0037,R2=0.9996,在 0.0128~0.064 mg/mL
之间有良好的线性关系。见图 1。
y = 10.18x + 0.0037
R2 = 0.9996
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07
浓度mg/ml
吸
光
度
图 1 浓度与吸光度的线性关系图
Fig1 The results of linear determination
2.6 精密度实验
取芦丁标准品储备液 3 mL按“2.4”项的方法在波长 510 nm
处,以空白对照为参比,重复测定 6次,计算得 RSD=0.12 %(n=6),
结果表明仪器精密度良好。
[收稿日期] 2016-06-13
[基金项目] 海南省大学生创新项目(20150072);海南医学院培育基金项目(HY2014-21)
[作者简介] 杨梦成(1993-),男,本科,湖北人,研究方向为中草药质量分析。
*为通讯作者:翟锐锐(1983-),女,硕士,河南洛阳人,化学高级实验师,研究方向为中草药质量分析。
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2.7 稳定性试验
取供试品溶液 5 mL,按“2.4”项下方法显色,在波长 510 nm
处,每间隔 10 min测定吸光度,考察其在 1 h之内的稳定性,计
算得 RSD=2.11 %,结果表明稳定性良好。
2.8 重复性试验
取 3份刺芫荽粉末各 1 g,按“2.1”项下方法平行制备 3份
供试品溶液进行含量测定,计算得 RSD=1.73 %(n=3)。结果表明
该方法的重复性较好。
2.9 加样回收率试验
分别量取刺芫荽样品溶液 3 mL共 6份于 25 mL容量瓶里,
并分别精密加入 1 mL芦丁标准储备液,按“2.4”项下方法显色,
在波长 510 nm处测定含量,并计算回收率,结果见表 2。
表 2 加样回收率实验
Tab.2 Results of recovery test (n=6)
编号 原有量/mg 加标量/mg 测定量/mg 回收率/% 平均回收率/% RSD/%
1 0.7575 0.32 1.096 101.72
101.69 0.57
2 0.7575 0.32 1.096 101.72
3 0.7575 0.32 1.084 100.60
4 0.7575 0.32 1.101 100.60
5 0.7575 0.32 1.101 102.18
6 0.7575 0.32 1.096 101.72
2.10 样品含量测定
取 3份刺芫荽药材各 1.0 g,按“2.1”项下方法制备各供试品
溶液,再各取 5 mL供试品溶液按照“2.4”项下的方法进行显色,
于 510 nm波长处测定吸光度。按标准曲线法计算,结果 3份供试
品的总黄酮含量分别为 1.003 %,1.079 %,0.988 %。
3 结论
本实验采用紫外分光光光度法,用 60 %的乙醇提取刺芫荽的
总黄酮,加样回收率为 101.69 %,此方法准确可靠,结果稳定,
重复性好,可作为该药材的测定方法,本研究为进一步研究刺芫
荽的药理作用提供了实验依据。
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(本文文献格式:杨梦成,谢飞,黄晓孟,等.刺芫荽中总黄酮含
量的测定[J].广东化工,2016,43(16):173-174)
(上接第 167页)
3 总结
本文初步讲述了蒸汽加热导热油系统的设计思路,尽可能的
使设计合理,保证整个系统的安全可靠性、经济性,符合规范要
求。
参考文献
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号.
(本文文献格式:严进生.蒸汽加热导热油系统的设计思路[J].广
东化工,2016,43(16):166-167)
(上接第 172页)
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