全 文 ：第 33卷第 6期
2010年 12月
云南中医学院学报
JournalofYunnanUniversityofTraditionalChineseMedicine
Vol. 33No. 6
12. 2010
紫外 -可见分光光度法测定蓝花参中多炔类化合物的含量＊
孙 娇 1 , 庄绪会2 , 张庆芝■2
(1.玉溪市中医医院 , 云南玉溪 653100;2.云南中医学院 , 云南昆明 650500)
[摘 要 ] 目的:建立蓝花参提取物中多炔类化合物含量测定方法。方法:以党参炔苷为指标成分 , 对蓝花
参提取物中多炔类化合物采用乙醇回流提取 , 采用紫外 -可见分光光度法测定其含量。结果:多炔类化合物在 4
～ 28μg/mL范围内线性良好 , 精密度 、 稳定性 、 重复性和加样回收率均达到要求。结论:该实验方法简便 、 快
捷 、 结果可靠。
[关键词 ] 蓝花参;多炔类化合物;紫外 -可见分光光度法
中图分类号:R284 文献标志码:A 文章编号:1000— 2723(2010)06— 0051— 04
蓝花参始载于 《滇南本草 》, 为桔梗科植物蓝
花参 Wahlenbergiamarginata(Thunb.)A.DC.的全
草 , 具有补虚健脾 , 止咳化痰的功效。其别名有:
娃儿草 、 乳浆草 、 蓝花草 、 拐棍参 、 疳积药 (云
南)[ 1] ;罐罐草 、 蛇须草 、沙参草 (四川)[ 2] ;金
钱吊葫芦 、 寒草 (福建)[ 3] ;小绿细辛 (贵州)[ 4] ;
金箍棒 、毛鸡腿 、沙参 、细叶沙参 (湖南)[ 5] 。据
报道 , 蓝花参中含有多炔类化合物 -党参炔苷
(lobetyolin)[ 6] , 多炔类化合物具有明显的生物活
性 , 如抗菌 、杀菌 、 抗炎 、抗癌 、免疫力抑制的作
用 [ 7] 。经初步的药理学研究表明[ 8] , 党参炔苷对
乙醇造成的胃粘膜损伤有较好的保护作用 , 这与蓝
花参补虚健脾的传统功效相符 , 但由于蓝花参药材
中党参炔苷的含量极少 , 为简化实验操作 , 故采用
紫外 -可见分光光度法 , 以党参炔苷为指标性成
分 , 测定蓝花参药材中多炔类化合物的含量 , 为蓝
花参进一步深入研究提供依据 。
1 实验材料
实验材料采于昆明 (阿子营 、海口 、 西山)、
玉溪 (新平)、大理 (五里桥 、 苍山)及昆明菊花
村商品 、福建 , 由云南中医学院中药学院张庆芝副
教授鉴定为桔梗科蓝花参属植物蓝花参 Wahlenber-
giamarginata(Thunb.)A.DC.的干燥全草。
2 实验仪器及试剂
2.1 实验仪器
UV-2450紫外 -可见分光光度仪 (日本岛
津)、 HH-6数显恒温水浴锅 (国华电器有限公
司)、 CS101型电热鼓风干燥箱 (重庆试验设备
厂)、干燥器 、 蒸发皿 、 锥形瓶 、 分液漏斗 、 冷凝
回流管 、 JJ1000型精密电子天平 (常熟双杰测试
仪器厂)、 BS224S分析天平 (北京赛多利斯仪器
系统有限公司)。
2.2 实验试剂
党参炔苷对照品 (自制 , 经波谱分析得到 ,
纯度≥95%)、 甲醇 、 60%乙醇 、 氯仿 (均为分析
纯)。
3 方法及结果
3.1 对照品溶液的制备
称取对照品 10mg, 精密称定 , 置 100mL量瓶
中 , 加甲醇定容至刻度使其溶解 , 配成溶液浓度为
0.1mg/mL的对照品溶液 , 备用 。
3.2 供试品溶液的制备
取供试品 (过二号筛)约 2g, 精密称定 , 置
250mL锥形瓶中 , 加入 60%乙醇 60mL, 密塞 , 连
接回流冷凝管 , 90℃水浴中加热至沸腾并保持微沸
1h。放至室温后 , 取下锥形瓶 , 密塞 , 再称定重
量 , 用 60%乙醇补足减失的重量 , 摇匀 , 用干燥
滤器滤过 , 精密量取续滤液 30mL, 置与已干燥至
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＊收稿日期:2010— 05— 17 修回日期:2010— 07— 28
作者简介:孙娇 (1983 ～ ), 女 , 云南玉溪人 , 研究方向:中药资源开发与利用。 ■通讯作者:张庆芝 , 0871 -
5918026, Email:zhangqingzhi99@tom.com
2010年 云南中医学院学报 第 33卷
恒重的蒸发皿中 , 在水浴上挥至无醇味后 , 置于分
液漏斗中 , 用等体积的氯仿萃取 2次 , 弃去氯仿
层 , 留水层溶液待测 。
3.3 测定吸收波长的确定
取对照品溶液 4mL, 置 25mL量瓶中 , 加甲醇
定容至刻度 , 另取供试品溶液 0.3mL, 置 25mL量
瓶中 , 加 60%乙醇定容至刻度 。用紫外 -可见分
光光度仪对对照品溶液和供试品溶液进行 200 ～
800nm范围的吸光度值的扫描。对照品溶液在
214nm, 253nm, 267nm, 283nm处均有吸收 , 而供
试品溶液在 267nm处有较大吸收 , 故选择对照品
溶液和供试品溶液的共有吸收峰 267nm作为测定
吸收波长。 (扫描图谱见图 1、图 2)
3.4 标准曲线的绘制
精密量取对照品母液 1mL, 2mL, 3mL, 4mL,
5mL, 6mL, 7mL分别置于 25mL量瓶中 , 用甲醇
定容至刻度 , 以甲醇溶液作为空白对照 , 在 267nm
处测定吸收度 。以对照品溶液浓度 (μg/mL)为
横坐标 , 吸收度为纵坐标 , 绘制标准曲线 。回归方
程为 y=0.02742x+0.01449, r=0.99928, 表明对
照品溶液在 4μg/mL～ 28μg/mL范围内呈良好的线
性关系。
3.5 方法学考察
3.5.1 精密度实验
取蓝花参药材粉末约 2g, 精密称定 , 按供试品
溶液制备方法得到供试品溶液。精密量取同一对照
品溶液和供试品溶液 , 在 267nm波长处连续测定 6
次 , 记录吸收度值 (A), 计算 RSD值 , 对照品溶液
RSD%=0.1673%, 供试品溶液 RSD% =0.2466%,
表明仪器精密度良好 。(测定结果见表 1)
表 1 精密度实验结果
吸收度 /A
1 2 3 4 5 6
RSD/%
对照品溶液 0.451 0.451 0.452 0.450 0.450 0.451 0.1673
供试品溶液 0.554 0.556 0.553 0.553 0.554 0.556 0.2466
3.5.2 稳定性实验
取蓝花参药材粉末约 2g, 精密称定 , 按供试
品溶液制备方法得到供试品溶液 。精密量取同一对
照品溶液和供试品溶液 , 在 5h内 , 分别在 0h、
1h、 2h、 3h、 4h、 5h时间点于 267nm波长处进行
测定 , 记录吸收度值 (A), 计算 RSD值 , 对照品
溶液 RSD% =0.5518%, 供试品溶液 RSD% =
0.8873%, 表明对照品和供试品在 5h内稳定。 (测
定结果见表 2)
表 2 稳定性实验结果
时间
溶液
吸收度 /A
0h 1h 2h 3h 4h 5h RSD/%
对照品溶液 0.560 0.562 0.561 0.558 0.556 0.554 0.5518
供试品溶液 0.467 0.469 0.467 0.463 0.460 0.459 0.8873
3.5.3 重复性实验
取同一批次的蓝花参药材粉末 6份 , 每份约
2g, 精密称定 , 按供试品溶液制备方法得到供试品
溶液 。精密量取供试品溶液 , 以 60%乙醇溶液作
为空白对照 , 在 267nm波长处进行测定 , 记录吸
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第 6期 孙 娇 , 等:紫外 -可见分光光度法测定蓝花参中多炔类化合物的含量
收度值 (A), 计算 RSD值 , RSD% =0.7509%,
结果表明该实验重现性良好。 (测定结果见表 3)
表 3 重复性实验结果
供试品 1 2 3 4 5 6 平均/‰ RSD/%
吸收度 0.489 0.488 0.487 0.493 0.483 0.489
多炔类化
合物含量/‰ 1.443 1.439 1.425 1.455 1.453 1.445 1.443 0.7509
3.5.4 加样回收率实验
取蓝花参药材粉末 6份 , 每份约 1g, 精密称
定 , 分别加入 60%乙醇 30mL以及 1.7mg党参炔苷
对照品 , 90℃水浴中加热至沸腾并保持微沸 1h。
放至室温后 , 取下锥形瓶 , 密塞 , 再称定重量 , 用
60%乙醇补足减失的重量 , 摇匀 , 用干燥滤器滤
过 , 滤液在水浴上挥至无醇味后 , 置分液漏斗中 ,
用等体积的氯仿萃取 2次 , 弃去氯仿层 , 水层溶液
作为供试品溶液 。精密量取供试品溶液 , 以 60%
乙醇溶液作为空白对照 , 在 267nm波长处进行测
定 , 记录吸收度值 (A), 计算回收率及 RSD值 。
平均回收率为 98.90%, RSD% =1.071%.(测定
结果见表 4)
表 4 加样回收率实验
样品中多炔类化
合物的含量/mg
加入党参炔
苷量 /mg
实测值
/mg
回收率
/%
平均回收
率 /%
RSD
/%
1.616 1.7 3.280 97.88
1.616 1.7 3.309 99.59
1.616 1.7 3.275 97.59
1.616 1.7 3.290 98.47
1.616 1.7 3.317 100.06
1.616 1.7 3.313 99.82
98.90 1.071
3.6 样品含量测定
取不同产地的蓝花参药材粉末每份约 2g, 精
密称定 , 按供试品溶液制备方法得到供试品溶液 。
精密量取供试品溶液 , 以 60%乙醇溶液作为空白
对照 , 在 267nm波长处进行测定 , 记录吸收度值
(A), 按回归方程计算含量。 (结果见表 5)。
表 5 样品含量测定结果
样品 多炔类化合物含量 /‰
1 2 3
平均含量
/%
RSD
/%
菊花村商品(20090220) 1.624 1.598 1.626 1.616 0.9666
昆明阿子营(20080620) 1.338 1.334 1.358 1.343 0.9572
昆明西山 (20080907) 1.589 1.618 1.635 1.614 1.4411
昆明海口(20080928) 1.447 1.440 1.464 1.450 0.8510
大理(20080420) 1.884 1.845 1.857 1.862 1.0728
大理(20090410) 1.696 1.668 1.687 1.684 0.8490
新平(20080904) 1.656 1.648 1.657 1.654 0.2983
福建(20090215) 1.205 1.215 1.221 1.214 0.6660
4 讨论
蓝花参是我国常用的民族民间药 , 为彝族 、 土
家族 、畲族常用的补益之品 , 疗效确切 。通过查阅
相关文献资料发现 , 目前还未见到关于蓝花参含量
测定方面的研究。本实验中采用的对照品党参炔苷
(lobetyolin)为自制 。据报道 [ 8] , 党参炔苷对乙醇
造成的胃粘膜损伤有较好的保护作用 , 与蓝花参补
虚健脾的传统功效相符 。在没有更适合的标示性成
分的情况下 , 选择与蓝花参补虚健脾的传统功效更
为接近的党参炔苷作为指标成分 , 并首次采用紫外
-可见分光光度法进行样品的含量测定 , 将党参炔
苷的含量测定转化为蓝花参药材中多炔类化合物的
测定 , 简化实验操作 , 使实验具有可操作性 , 为控
制蓝花参药材的质量提供实验依据。研究结果表
明 , 精密度 、 重复性 、 稳定性良好 , 加样回收率合
格 , 该方法简便 、 快速 、仪器要求不高 , 可作为评
价蓝花参药材质量的方法之一。
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(编辑:迟 越)
QuantitativeDeterminationofTotalPolyactetylenesinWahlenbergia
marginata(Thunb.)A.DC.byUVSpectrophotometry
SUNJiao1 , ZHUANGXu-hui2 , ZHANGQing-zhi■2
(1.YuxiMunicipalHospitalofTCM, YuxiYunnan, 653100,
2.YunnanUinversityofTCM, KunmingYunnan650500)
[ ABSTRACT] Objective:TodeterminethetotalpolyactetylenesinWahlenbergiamarginata(Thunb.)A.
DC..Method:Usingdetectionwavelengthandlobetyolinastheindexcomponent, thepolyacetylenessubstances
inWahlenbergiamarginata(Thunb.)A.DC.extractweredeterminedthroughethanolrefluxextractionandultra-
violetspectrophotometer.Results:Samplesizeshowedagoodlinearrealationshipattherangeof4 ～ 28μg/mL,
precision, stability, repeatabilityandrecoveryareachieved.Conclusion:Thismethodiseasy, rapidandreili-
able.
[ KEYWORDS] wahlenbergiamarginata(Thunb.)A.DC.;polyactetylenes;UVspectrophotometry
(原文见第 28页)
YinandYangRunningOrderlyOnlyYangQiisSealedintheKidneyWater
WUWen-Di
(DepartmentofKunmingHospitalofTCM, KunmingYunnan650011, China)
[ ABSTRACT] Thisarticle, fromfouraspectsoftheprinciple, method, formulaandherbs, fulydis-
cussedYinandYangofhumanmovementmethodsofactive-qi.Withspecialemphasisonindentificationrelation-
shiparethefundamentalconditionsandcorepowerwhichcongenitalheartandkidneyintersection, YangQiis
sealedinthekidneywater, andacquiredspleenandstomachoflifting.Itisprovidedwithrealpracticalsignifi-
cance, andguideofapplicationwithclinicalherbalprescription.
[ KEYWORDS] YinandYangrunningorderly;Yang-qiissealedinthekidney;checkinghyperactivity
ofyangandkeepingmingmenfireinthekidneyessence
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