全 文 ：紫外分光光度法测定藏药打箭菊中总黄酮的含量
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泽仁达瓦１　胡敏２　林朝展２　李小翚２　祝晨蔯２　康萨·索朗其美１
（１．西藏藏医学院藏医药科技研究所，西藏　拉萨　８５００００；
２．广州中医药大学中药学院，广中尖峰天然产物共建实验室，广东　广州　５１０００６）
摘　要：目的　测定藏药打箭菊中总黄酮含量，为打箭菊的质量评价提供一定的依据。方法　采用紫外
分光光度法，在２７５ｎｍ处测定样品溶液的吸光度，并计算其中总黄酮的含量。结果　以芦丁为对照品，
线性回归方程为Ｙ＝１．６２２８Ｘ＋０．０５２４，相关系数γ＝０．９９９９，线性范围为１．９２～２４μｇ／ｍｌ，平均回收率
（ｎ＝６）为９６．５２±１．９１％（ＲＳＤ＝１．１９％），线性关系良好。结论　该方法测定结果准确，操作简便、快
速，是一种测定打箭菊中总黄酮含量的有效方法。
关键词：打箭菊　芦丁　总黄酮　紫外分光光度法
　　打箭菊，又称鞑新菊，阿恰塞尔郡，为菊科匹菊属
（或小黄菊属）植物川西小黄菊Ｐｙｒｅｔｈｒｕｍ　ｔａｔｓｉｅｎｅｎｓｅ
（Ｂｕｒ．ｅｔ　Ｆｒａｎｃｈ．）Ｌｉｎｇ（Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍ　ｔａｔｓｉｅｒｔｅｎｓｅ
Ｂｕｒ．ｅｔ　Ｆｒａｎｃｈ．）的干燥花序，生于高山草甸，灌丛或
山坡砾石地，分布于青海，四川，云南，西藏；是一种常
用的藏药，在藏族地区民间及临床应用广泛。性寒，味
苦，无毒。具有清热解毒、祛风除湿、消炎止痛的功效，
其藏名塞尔郡就为解痛之意。主要用于治疗头痛，头
伤，跌打损伤，湿热，疮疡，伤口流黄水，黄水疮，肝炎
等。唐代《月王药诊》、《四部医诊》和清初《日珠本草》
都有记载；在《中国药典》方剂“二十五味珊瑚丸”中，药
方含有打箭菊，主要用来治疗“白脉病”，神志不清，身
体麻木，头昏目眩，脑部疼痛，血压不调等疾病。
据文献报道，打箭菊中主要含有黄酮类和生物碱
类等成分，近年来，有学者对该植物化学成分进行了研
究，主要从打箭菊中２３个化合物，其中主要是黄酮类
化合物，并确定了１５个黄酮类化合物分子结构。本文
参考文献中总黄酮的含量测定方法，并测定打箭菊药
材中总黄酮的含量，为打箭菊的质量评价提供依据。
１　仪器与试药
１．１　仪器
ｓａｒｔｏｒｉｕｓ电子分析天平（北京赛多利斯仪器系统
有限公司）；超声仪（中国华南超声设备厂）；２０２－０型
电热恒温干燥箱（上海锦屏仪器仪表有限公司通州分
公司）；万能粉碎机（温岭市大德中药机械有限公司制
造）；棱光７５２型分光光度计（上海精科仪器有限公
司）。
１．２　试药
芦丁对照品购于中国药品生物制品检定所（批号：
００８０－９７０５）；打箭菊药材经药用植物学专家潘超美鉴
定为 菊 科 匹 菊 属 植 物 川 西 小 黄 菊 Ｐｙｒｅｔｈｒｕｍ
ｔａｔｓｉｅｎｅｎｓｅ（Ｂｕｒ．ｅｔＦｒａｎｃｈ．）Ｌｉｎｇ（Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍ
ｔａｔｓｉｅｒｔｅｎｓｅ　Ｂｕｒ．ｅｔ　Ｆｒａｎｃｈ．）的干燥花序，样品留样于
本实验室；本实验所有试剂均为分析纯，水为超纯水。
２　方法和结果
２．１　对照品溶液的制备
精密称取减压干燥至恒重的无水芦丁１２．０ｍｇ，
置于５０ｍｌ容量瓶中，加甲醇溶解，并定容至刻度，摇
匀，即得芦丁对照品溶液（每毫升含芦丁０．２４０ｍｇ）。
２．２　供试品溶液的制备
称取打箭菊药材粉末（过三号筛）约０．５ｇ，精密称
定，将粉末全部转移至１００ｍｌ圆底烧瓶中，加５０ｍｌ无
水甲醇，水浴９０℃回流提取１ｈ，过滤；残渣用甲醇洗
涤，提取三次，将三次的滤液挥干，用无水甲醇定容至
２５ｍｌ容量瓶中，摇匀，即得供试品溶液。
２．３　测定波长的选择
取４个２５ｍｌ容量瓶，１，２号分别加入２ｍ１芦丁对
照品溶液和１ｍｌ打箭菊供试品溶液，各加甲醇稀释至
刻度，以甲醇为空白，在紫外分光光度计上２００～
６００ｎｍ波长范围内进行扫描。３，４号分别加入２ｍｌ芦
丁对照品溶液和１ｍｌ打箭菊供试品溶液，各加甲醇约
至６ｍｌ，再加０．５ｍｌ２％三氯化铝甲醇溶液（含１％冰醋
酸），用甲醇稀释至刻度，摇匀，放置６０ｍｉｎ，在２００～
６００ｎｍ波长范围内扫描。从吸收图谱上可以看出，用
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《西藏科技》２０１２年６期（总第２３１期）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　高原医学
＊ 基金项目：国家自然科学基金项目资助课题（编号：３０９６０５３０）
２％三氯化铝甲醇溶液（含１％冰醋酸）显色后，在紫外
区，打箭菊的吸收峰发生了紫移，而芦丁的吸收峰发生
了红移，但它们的最大吸收波长发生移动后都在
２７５ｎｍ处。因此，可以确定２７５ｎｍ为测定波长。
２．４　线性关系的考察
精密量取芦丁对照品溶液０．２，０．５，１．０，１．５，２．０，
２．５ｍｌ，分别置于２５ｍｌ容量瓶中，各加入甲醇至６ｍｌ，加
入２％三氯化铝甲醇溶液（含１％冰醋酸）０．５ｍｌ，摇匀，
再加甲醇至刻度，以甲醇为空白对照，静置６０ｍｉｎ，在
２７５ｎｍ测定各溶液的吸收度，以吸收值（Ｙ）为纵坐标，
浓度（Ｘ）为横坐标，得到回归方程为：Ｙ＝１．６２２８Ｘ＋
０．０５２４相关系数γ＝０．９９９９，线性范围为１．９２～２４．
０μｇ／ｍｌ。
２．５　精密度试验
精密量取５份芦丁对照品储备液各１．５ｍｌ，置
２５ｍｌ容量瓶中，加甲醇约至６ｍｌ，加入２％三氯化铝甲
醇溶液（含１％冰醋酸）０．５ｍｌ，摇匀，用甲醇稀释至刻
度，静置６０ｍｉｎ，用紫外光扫描仪在２７５ｎｍ处进行测
定。测得结果ＲＳＤ小于１．０％，表明仪器的精密度良
好。
２．６　方法重复性的考查
按照“２．２”项下方法平行制备５份供试品溶液，在
２７５ｎｍ处进行测定吸光度，并计算总黄酮的含量，结
果平均含量为１．７５ｍｇ／ｇ，ＲＳＤ为０．５７％，表明分析方
法的重现性良好。
２．７　稳定性的考察
取同一供试品溶液，用紫外光扫描仪在２７５ｎｍ处
按间隔０分钟，５分钟，１５分钟，３５分钟，６５分钟，９５
分钟，１２５分钟，１５５分钟进行测定。测试结果为样品
溶液在１２５分钟内是稳定的。
２．８　加样回收试验
精密称取已知含量的供试品６份，分别精密加入
一定量的芦丁对照品，按“２．２”项下方法制备回收率试
验液，依法测定，并计算回收率，结果６份的平均回收
率为９６．５２％，ＲＳＤ为１．１９％，说明该方法测定结果
准确，见表１。
　　表１ 芦丁回收率试验结果（ｎ＝６）
称样量／ｇ 样品含量／ｍｇ 加入量／ｍｇ 检出量／ｍｇ 回收率／％ 平均回收率／％ ＲＳＤ／％
０．０５０２９　 ２．６４７２　 ２．５１　 ５．２０４９　 ９８．１４
０．０５０２５　 ２．６４５２　 ２．５０　 ５．２５４６　 ９５．８０
０．０５０１８　 ２．６４１５　 ２．５７　 ５．３３５６　 ９５．３９　 ９６．５２±１．１５　 １．１９
０．０５０１４　 ２．６３９４　 ２．５９　 ５．３００１　 ９７．３４
０．０５００７　 ２．６３５７　 ２．５２　 ５．２３２０　 ９７．０６
０．０５０１１　 ２．６３７８　 ２．４６　 ５．２１６２　 ９５．４１
２．９　样品的测定
取三批打箭菊药材粉末按照“２．２”项下方法制备
供试品溶液，按相同的方法测定，结果三批样品中总黄
酮平均值为５．２７４％，ＲＳＤ为０．１７％，具体数据见表
２。
表２ 实验测定结果
批次 产地 总黄酮含量（％） 平均值（％） ＲＳＤ（％）
１ 西藏昌都 ５．２６４
２ 四川甘孜 ５．２７３　 ５．２７４　 ０．１７
３ 西藏林芝 ５．２８６
３　讨论
目前，黄酮类的含量测定方法较多，紫外分光光度
法测定总黄酮的含量的方法简便、准确、可靠，是测定
总黄酮含量的常用方法。本文针对打箭菊中含有的黄
酮类成分，以芦丁为对照，建立了藏药打箭菊中总黄酮
的含量测定方法，通过不同的的提取条件和提取溶剂
的筛选，最终确定采用甲醇按１：４０的料液比，加热回
流提取３次的方法提取，所获得的总黄酮含量最高。
通过系统的方法学考察和反复验证，本文所建立的紫
外分光光度法测定打箭菊中总黄酮的含量的方法简
便、准确、可靠，可用于藏药材打箭菊的质量控制。
参考文献
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编校　土登达杰
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高原医学　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　《西藏科技》２０１２年６期（总第２３１期）