全 文 ：杜仲叶生物活性成分的提纯研究* ⒇
高锦明 1)　　刘　丽 2)　张鞍灵 1)　张康健 2)　王　蓝 3)
( 1)西北林学院基础课部 , 712100陕西杨陵 ; 2)西北林学院园林系 ;
　 3)西北林学院木材工业系 ;第一作者:男 , 34岁 ,讲师 )
摘　要　通过不同混合剂提取及不同处理方法的比较研究 ,筛选出较佳的杜仲叶生物活
性物质的提取技术 ,并讨论了其中有效成分的生物活性。
关键词　杜仲叶 ;生物活性成分 ;提纯
分类号　 S718. 43
杜仲 (Eucommia ulmoides Oliv . )是我国特有的经济林树种。 传统上杜仲以皮作为名贵滋
补药材。近代研究发现 ,杜仲叶与皮具有基本相同的化学成分和药理作用〔 1～ 7〕 ,杜仲以叶代皮
供药用 ,已得到国内外医学界共识 ,这为扩大杜仲资源和提高杜仲叶利用价值提供了理论依
据。杜仲主要药用有效成分有环烯醚萜类和木脂素类及苯丙素类等次生代谢物〔5～ 6〕 ,其中多数
为水溶性大的甙类成分。这些增效协同的活性成分 ,对杜仲叶、皮及其制剂和浸提物所具有的
降压、利尿、抗肿瘤、抗菌、抗衰老和增强免疫等药理药效起决定作用 ,因而研究开发富含生物
活性物质的杜仲叶高纯粉 ,将为杜仲叶资源综合开发利用开辟一条新途径。
1　材料与方法
1. 1　材料、试剂
杜仲叶于 1997年 6月采自西北林学院校园内 ,立即低温干燥 ,备用。
薄层层析用硅胶 G(青岛海洋化工厂 ) ,京尼平甙 ( GP)对照品 (中国医学科学院周光雄先
生提供 ) ,京尼平甙酸 ( GA)与桃叶珊瑚甙 ( AU)对照品 (日本和光纯药工业株式会社 ) ,绿原酸
对照品 (光谱纯 ,德国进口 ) ,石油醚 ( 60℃～ 90℃ ) ( AR) ,混合溶剂 ,萃取剂。
1. 2　方法
1. 2. 1　杜仲叶生物活性成分的提取流程　经反复试验研究 ,确定了较佳的混合浸提溶剂的比
例和萃取剂的浓度及提取杜仲叶活性物质的工艺条件 ,所筛选的提取工艺路线如下图:
1. 2. 2.　杜仲叶生物活性成分的提取方法　称取干燥杜仲叶约 20g ,置于 500mL圆底烧瓶
中 ,加入约 300mL混合溶剂 ,于 80℃± 5℃水浴中加热回流 2h,取出放置冷却 ,抽滤 ,滤液经减
压浓缩至无溶剂残留 ,往浸膏中加蒸馏水溶解并稀释至一定体积 ,过滤 ,残渣用蒸馏水洗涤 3
次 ,将滤液与洗涤液合并 ,减压浓缩到一定体积 ,用石油醚 ( 60℃～ 90℃ )萃取 ,脱去脂溶性杂
质 ,然后改用一定浓度的萃取剂萃取 ,用 TLC跟踪检查水溶液中环烯醚萜成分 ,用 Epstahl试
西北林学院学报　 1998, 13( 1): 83～ 86
Journal of No rthw est Fo r est ry Co lleg e
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
⒇ 收稿日期　 1997- 08- 27
* 林业部“杜仲系列产品开发”中试项目之一。
剂显色 ,以确定最适比例的萃取剂 ,所得萃取液经减压浓缩 ,低温干燥 ,粉碎 ,即得杜仲生物活
性物质。
1. 2. 3　杜仲叶生物活性成分的测定　京尼平甙、京尼平甙酸、绿原酸的含量测定采用 Waters
高效液相色谱系统 ,包括 486UV检测器 , 510型泵。色谱条件∶流动相∶甲醇∶乙酸∶水 ( 5∶
0. 5∶ 140) ,色谱柱: Nova-pak C18 ( 4μm, 3. 9mm× 75mm) ,流速 1mL /min,检测波长 232nm。
(其它活性成分因无标样未测定 )。
2　结果与分析
2. 1　萃取剂浓度的确定
表 1　不同浓度萃取剂萃取的比较*
Table 1　 A compari son among the cons tituents f rom
dif ferent concent rat ions of ext raction s olvent
浓度 (% ) 10 20 30 40 50 70
干物质 ( g) 0. 72 0. 65 0. 50 0. 17 0. 05 0. 10
GP- - + + + - - -
GA + + + - - - -
AU + + + - - - -
　　　注: + :斑点显色极浅 ; + + :斑点显色很深
　　用不同浓度萃取剂萃取杜仲
叶脱脂后的水溶液中有效成分的
比较 (表 1)可知 , 20%浓度萃取
剂萃取效果 最佳 ,薄层层析
( TLC )显示京尼 平甙 ( R f =
0. 60)、京尼平甙酸 ( R f = 0. 14)、
桃叶珊瑚甙 ( Rf = 0. 34) ,斑点清
晰集中 ,显色较深 ,说明这三种有
效成分主要富集于 20%萃取剂
中 ,故萃取剂的最适浓度确定为 20%。
表 2　萃取处理与对照的比较
Tab le 2　 A compari son betw een the s olv en t
treated and unt reated ext ract s
项目 绿原酸 (% ) GP(% ) GA(% ) GP+ GA(% )
萃取处理
CK
58. 7
1. 91
3. 47
0. 18
11. 20
1. 33
14. 7
1. 51
2. 2　萃取处理与对照的比较
用 20%萃取剂萃取脱脂后的杜
仲叶水溶液与未处理对照的比较 ,由
表 2可看出 ,同一浓度混合溶剂提取
杜仲叶后经一定萃取处理所得有效成
分的含量要远大于未经处理的 ,其中绿原酸含量是未处理的 30. 7倍 ,京尼平甙和京尼平甙酸
总含量是未处理的 9. 7倍 ,可见 ,混合溶剂提取后经萃取处理效果比不处理要好得多。
2. 3　不同混合溶剂提取比较
用不同混合溶剂浸提杜仲叶 ,经萃取处理所得有效成分含量比较 ,由表 3可知 ,用不同混
84　　　　　　　　　　　　　　　　　　　西北林学院学报　　　　　　　　　　　　　　　　　 13卷
合溶剂提取得到的总活性成分的含量 (除个别外 )均高于单一极性溶剂水 ,其得率都在 3. 2%
以上 , S1～ S4混合溶剂提取的总活性物质中绿原酸平均含量为水的 2倍多 ,两种甙 (京尼平甙
和京尼平甙酸 )平均含量是水的 3倍多 ;其有效成分的含量随着混合溶剂种类的不同 (溶剂的
极性按 S6～ S1次序降低 )而有所差异 , S1～ S4混合溶剂提取的总活性物质中绿原酸和两种甙
平均含量分别是 S5～ S6混合溶剂的 2倍和 1. 5倍 ,其前者混合溶剂所提取的三种有效成分的
平均含量 ( 69% )几乎是后者 ( 35. 2% )的 2倍。因此 , S4～ S1种类的混合溶剂是较佳的浸提溶
剂。
表 3　不同混合溶剂提取的比较
Table 3　 A compari son among various types of mixed ex t raction s olv en ts
混合溶剂 得率
(% )
绿原酸
(% )
GP
(% )
GA
(% )
GP+ GA
(% )
三种有效
成分 (% )
S1 2. 04 52. 7 4. 42 10. 6 15. 0 67. 7
S2 3. 36 57. 7 2. 23 19. 2 21. 4 79. 1
S3 3. 20 41. 2 2. 49 11. 9 14. 4 55. 6
S4 3. 69 58. 7 3. 47 11. 2 14. 7 73. 4
W 1- 4 52. 6 3. 15 13. 2 16. 4 69. 0
S5 3. 44 36. 1 3. 00 8. 49 11. 5 47. 6
S6 3. 48 13. 8 5. 83 2. 97 8. 80 22. 6
W 5- 6 25. 0 4. 42 5. 73 10. 2 35. 2
水 2. 40 24. 9 2. 55 2. 53 5. 08
3　结论与讨论
杜仲叶生物活性成分应先用
S4～ S1种类混合溶剂提取 ,再经
萃取、纯化等处理 ,所得活性物质
中已知有效成分 (京尼平甙、京尼
平甙酸及绿原酸 )平均含量高达
69%。
文献报导〔6～ 9〕 ,杜仲中的许
多环烯醚萜类化合物具有显著的
生理活性。京尼平甙酸具有预防
性功能低下、增强记忆功能、抗
癌、抗氧化、泻下及促进胆汁分泌
及降压作用 ;京尼平甙具有抗肿瘤活性和显著的抗补体活性。 此外 ,苯丙素类化合物也具有广
泛的药理活性 ,如绿原酸具有利胆、降压、抗菌、消炎、止血、抗氧化及升高白细胞之作用 ,对急
性咽喉炎症及皮肤病有明显疗效 ,对月经过多、子宫功能性出血有良好的止血效果 ,还具有肾
上腺素的类似作用。
采用本工艺从杜仲叶中提取的总活性物质含较高含量的杜仲主要活性成分环烯醚萜甙和
绿原酸 ,因此 ,可以说杜仲总生物活性成分是一种具有综合药理活性的高度浓缩物 ,且保留了
杜仲固有的天然香味 ,是药品、保健食品及疗效化妆品的理想天然添加剂。
我国杜仲林约有 16万 hm2 ,可产叶 300万 t /a,而杜仲叶目前未能充分合理利用 ,所以研
究开发富含多种生物活性物质的杜仲叶高纯粉 ,无疑为杜仲叶资源的深加工找到了出路。
参 考 文 献
1　张康健 .杜仲研究进展及存在问题 .西北林学院学报 , 1994, 9( 4): 59～ 63
2　李家实 ,阎玉凝 .杜仲皮与叶化学成分初步研究 .中药通报 , 1986, 11( 8): 41～ 42
3　于学玲 ,朱荣誉 ,刘晓明 .杜仲皮和叶营养成分的分析 .中草药 , 1992, 23( 3): 161
4　张康健 ,王蓝 ,张凤云等 .杜仲叶与皮有效成分含量的比较研究 .西北林学院学报 , 1996, 11( 2): 42～ 46
5　朱丽青 ,张黎明 .杜仲叶和杜仲皮的药理实验 .中草药 , 1986, 17( 12): 15～ 17
6　尉芹 ,马希汉 ,张康健 .杜仲化学成分研究 .西北林学院学报 , 1995, 10( 4): 88～ 89
7　赵玉英 ,耿权 ,程铁民 .杜仲化学成分研究概况 .天然产物研究与开发 , 1995, 7( 3): 46～ 52
8　油田正树 .环烯醚萜化合物利胆作用机理及利胆作用的构效关系 .国外医学中医中药分册 , 1989, 11( 1): 55
851期　　　　　　　　　　　高锦明等　杜仲叶生物活性成分的提纯研究　　　　　　　　　　　　　
9　苏印泉 ,马希汉 ,杨宗英 .日本的杜仲研究开发评述 .西北林学院学报 , 1996, 11( 2): 94～ 100
A Study on the Ex traction of Bioactiv e Constituents
from the Leaves of Eucommia ulmoides
Gao Jinming
1)　Liu Li2)　 Zhang Anling1)　 Zhang Kangjian2)　Wang Lan3)
( 1)Dept .of Basic Courses; 2)Dept .of Landscape Archi tecture;
　 3)Dep t. of Wood In dustr y; NWFC ,Yangling , Shaanxi , 712100)
Abstract　 A comparison betw een dif ferent types o f mix ed ex t raction solvents and methods
fo r the ex t raction o f bioactiv e consti tuents f rom the leaves of E. ulmoides was made. A satis-
factory ex t raction technolo gy was developed, and the bioactivi ties o f the constituents w ere
also discussed.
Key words　Eucommia ulmoides leaf; to tal bioactive constituent; purification
张仰渠教授逝世
我国著名森林生态学家 ,中国共产党员 ,西北林学院教授张仰渠同志因病于 1998年元月
12日零时 55分在西安不幸逝世 ,享年 76岁。
张仰渠教授 1922年 10月出生于河南省延津县 , 1948年 7月毕业于西北农学院森林系。
张仰渠教授终生从事森林生态学教学和科学研究工作 ,他严谨治学 ,刻苦钻研 ,把自己的
毕生精力献给了我国的林业建设和高等林业教育事业。他主编的《陕西森林》和《简明林业词
典》填补了我国的空白 ,担任过全国统编教材《森林生态学》及《中国主要树种造林技术》等专著
的编写工作。 他精通俄、英、德语 ,在多种刊物上发表论文数十篇。
从 1984年《西北林学院学报》创刊到 1994年底 ,张先生一直担任《西北林学院学报》编辑
委员会主任 ,为《西北林学院学报》的创办和发展作出了突出的贡献。
他多次被评为西北林学院“优秀教师”和“优秀共产党员” ,被林业部表彰为“教书育人先进
个人” ,被陕西省科协授予“陕西科技精英”称号。 1992年他作为有突出贡献的林业专家享受政
府特殊津贴。
张仰渠教授的逝世 ,是我国林业事业的一大损失 ,也是我刊的重大损失 。 他的治学精神、
工作作风和高尚情操是我们学习的榜样 ,并永远激励着我们前进。
西北林学院人事处、本刊编辑部
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