全 文 ：后 6(0． 391 6，0． 4511，0． 456 9，0． 476 9)标本组进行比较，发现
两组变化趋势相同，但后 6 相对应的频率变化率数值均升高，究
其原因，可能与前 6 正常平滑肌频率及滴加乙酰胆碱频率升高相
关。另外，针对给药前后正常平滑肌频率差值有时为正、有时为
负的实验结果，采用变化率的绝对值发现均小于滴加工具药乙酰
胆碱兴奋后的离体回肠平滑肌的变化率，四个比例组别的数值分
别是 0． 164 3，0． 121 1，0． 199 9，0． 206 3，说明无论是正常平滑肌
频率还是用药后的平滑肌频率的数值均与肠段标本的状态相关，
实验中必须重视这个问题，以验证临床重用白芍发挥芍药甘草汤
缓急止痛的功效。
参考文献:
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［J］．世界科学技术 －中医药现代化中药研究，2009，11(3) :382．
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例［J］．中医药临床杂志，2007，19(3) :248．
［3］ 范占民． 芍药甘草汤加味治疗习惯性便秘 56 例［J］． 河北中医，
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Gancao － Tang and a laxative with respect to alteration of paeoniflorin
metabolism by intestinal bacteria in rats［J］． Phytomedicine ，2007，14:
452．
［5］ Emi Goto，He JX，Teruaki Akao，et al． Bioavailability of glycyrrhizin
from Shaoyao － Gancao － Tang in laxative － treated rats［J］． Pharmacy
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滑肌的影响［J］．解放军药学学报，2009，25(1) :49．
［8］ 马晓燕，王 建，等．远志厚朴及其不同配比对家兔离体回肠平滑
肌的影响［J］．中药药理与临床，2011，27(3) :90．
收稿日期:2012-07-12; 修订日期:2012-11-12
基金项目:广东省中医药局科技基金资助项目( No． 20110178)
作者简介:胡 莹( 1984-) ，女( 汉族) ，云南宣威人，现任广州中医药大学
附属中山医院中药师，硕士学位，主要从事广东地产药材研究与开发工
作．
* 通讯作者简介:梅全喜( 1962-) ，男( 汉族) ，湖北蕲春人，现任广州中医
药大学附属中山医院教授、主任中药师、硕士研究生导师，学士学位，主要
从事广东地产药材研究与开发工作．
大叶蛇泡簕各提取部位抗炎作用的活性物质筛选研究
胡 莹，梅全喜* ，高玉桥，林 慧，戴卫波，张文霞，何骏青，王智亮，袁志华
(广州中医药大学附属中山医院药学部，广东 中山 528400)
摘要:目的 探讨大叶蛇泡簕水提物、醇提物及其各萃取部位的抗炎作用，筛选出活性物质。方法 通过对醋酸所致小鼠
腹腔毛细血管通透性增高实验、小鼠耳廓肿胀实验、大鼠棉球肉芽肿实验，观察大叶蛇泡簕各提取部位对急慢性炎症的
作用。各给药组，均按部位浸膏浓度 1． 5 g /kg给药，连续灌胃 7 d，每天 1 次。结果 与正常对照组比较，大叶蛇泡簕的醇
总提物及其萃取部位对炎症的抑制作用较好，特别是正丁醇部位对急慢性炎症均有显著的抑制作用。结论 大叶蛇泡簕
正丁醇部位对炎症有显著抑制作用。
关键词:大叶蛇泡簕; 毛细血管通透性; 耳廓肿胀; 棉球肉芽肿
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2013． 02． 045
中图分类号:R285． 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805( 2013) 02-0349-02
大叶蛇泡簕，又名大破布刺，老虎泡，虎掌竻，为蔷薇科植物
粗叶悬钩子 Rubus alceaefolius Poir． 的干燥根。大叶蛇泡簕主要
分布于广东、广西、贵州、云南等地［1］，其根、茎、叶及全草均可药
用。大叶蛇泡簕具有清热利湿、止血、散瘀的作用;临床主要用于
治疗肝炎，痢疾，肠炎，乳腺炎，口腔炎，外伤出血，肝脾肿大，跌打
损伤，风湿骨痛等病症［1］。本文采用大叶蛇泡簕各提取部位观
察其对急性炎症及慢性炎症的作用，根据实验结果进一步分离，
寻找其有效部位。
1 材料与仪器
1． 1 药物、药品与试剂 大叶蛇泡簕购于广东至信药厂，批号:
120201，经广州中医药大学附属中山市中医院曾聪彦主任中药师
鉴定为粗叶悬钩子 Rubus alceaefolius Poir的干燥根。将药材打成
粉，过标准检验二号筛得到粗粉。
大叶蛇泡簕水提物:取药材粗粉与蒸馏水先后按 1∶ 10、1∶
8 的比例提取两次，每次 1 h，双层纱布过滤，合并两次滤液，加热
浓缩直至得到流浸膏(提取率 59%，以下简称 RAP水提物)。
大叶蛇泡簕醇提物:取药材粗粉与 95%乙醇先后以 1∶ 10、1
∶ 8 的比例于 75℃水浴下回流两次，每次 1 h，双层纱布过滤，合
并两次滤液，75℃水浴挥醇直至得到流浸膏。将大叶蛇泡簕醇总
提取物(以下简称 RAP醇总提取物)流浸膏用石油醚、氯仿、乙酸
乙酯、正丁醇依次按极性大小萃取，得到大叶蛇泡簕石油醚萃取
物(提取率 0． 24%，以下简称 RAP 石油醚)、大叶蛇泡簕氯仿萃
取物(提取率 0． 48%，以下简称 RAP 氯仿)、大叶蛇泡簕乙酸乙
酯萃取物(提取率 0． 81%，以下简称 RAP 乙酸乙酯)、大叶蛇泡
簕正丁醇萃取物(提取率 2． 64%，以下简称 RAP 正丁醇)、大叶
蛇泡簕水层(提取率 1． 16%，以下简称 RAP 水层) ;以上各给药
组均按各提取浸膏 1． 5 g /kg体质量的剂量，按 10ml /kg的给药体
积，将浸膏匀浆混悬于水中配制而成，以下给药方式及药物剂量
均以相同方式处理。
药品与试剂:吲哚美辛(广东华南药业股份有限公司，批号:
110401) ，冰醋酸(广州化学试剂厂，批号:20070902 － 2)伊文思蓝
(Evanss blue 中国医药公司，批号:871225) ，二甲苯(广州化学试
剂厂，批号:970302 － 2)。
1． 2 动物 SPF 级 KM 小鼠，购自广东省实验动物中心，许可证
号:SCXK(粤)2008 － 0002;SPF级 SD大鼠，购自广东省实验动物
中心，许可证号:SCXK(粤)2008 － 0002。实验动物饲养室温控制
在中山市中医院屏障级实验室，许可证号:SYXK(粤)2010 －
0109，室温控制在(20 ± 2)℃，湿度控制在 40% ～70%。
1． 3 仪器 JJ300 型电子天平(常熟双杰)。UV － 2550 型紫外分
光光度计(日本岛津)。YLS － Q4 耳肿打孔器(直径 8mm，山东省
医学科学院设备站)。微量移液器(上海求精生化试剂仪器有限
公司) ，TD25 － WS48 孔多管架自动平衡离心机(长沙湘仪离心机
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2013 VOL． 24 NO． 2 时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 2 期
仪器有限公司)。
2 方法与结果
2． 1 大叶蛇泡簕水、醇提物及不同萃取部位抗急性炎症作用
2． 1． 1 醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验 取 18 ～ 22 g，SPF
级 KM小鼠 90 只，雄性，分成 9 组，每组 10 只。分别是正常对照
组、吲哚美辛对照组、RAP 醇提组、RAP 水提组、RAP 石油醚组、
RAP氯仿组、RAP乙酸乙酯组、RAP正丁醇组、RAP水层组，各组
动物均灌胃给药，除吲哚美辛对照组仅末次给药外，其余各组均
连续给药 7 天。末次给药后 1 h，于小鼠尾静脉注射 0． 5%伊文
思蓝 10 ml /kg，随后立即腹腔注射 0． 7%冰醋酸 10 ml /kg，观察
20 min内小鼠扭体次数，然后脱颈椎处死小鼠，剪开腹部皮肤，用
6 ml生理盐水分数次冲洗腹腔，吸管吸出洗涤液，合并后加入生
理盐水至 10 ml，液体于 3 000 r /min离心 15 min;取上清液于 590
nm比色测定之，比较给药组与正常对照组吸光度。组间比较采
用单因素方差分析进行 t 检验，利用统计学分析软件 SPSS19． 0
作统计分析处理。结果见表 1。
表 1 对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(珋x ± s)
组别 剂量 吸光度
RAP水提 1． 5g浸膏 /kg 0． 24 ± 0． 07
RAP石油醚 1． 5g浸膏 /kg 0． 28 ± 0． 09
RAP氯仿 1． 5g浸膏 /kg 0． 19 ± 0． 10
RAP乙酸乙酯 1． 5g浸膏 /kg 0． 24 ± 0． 05＊＊
RAP正丁醇 1． 5g浸膏 /kg 0． 17 ± 0． 09＊＊
RAP醇提物 1． 5g浸膏 /kg 0． 280 ± 0． 09
RAP水层 1． 5g浸膏 /kg 0． 22 ± 0． 06
吲哚美辛对照 0． 013mg /kg 0． 20 ± 0． 03＊＊
正常对照 1． 5g浸膏 /kg 0． 29 ± 0． 10
与正常对照组比较，＊＊P ＜ 0． 01，有极显著性差异;n = 10
从表 1 可以看出，RAP乙酸乙酯组、RAP 正丁醇组及吲哚美
辛对照组均能较好的抑制小鼠毛细血管通透性增高，与正常对照
组相比有极显著性差异，P ＜ 0． 01。
2． 1． 2 小鼠耳廓肿胀实验 取 18 ～ 22 g，SPF 级 KM 小鼠 90 只，
雌雄各半，随机分成 9 组，每组 10 只。分别是正常对照组、吲哚
美辛对照组、RAP醇提组、RAP水提组、RAP石油醚组、RAP氯仿
组、RAP乙酸乙酯组、RAP正丁醇组、RAP水层组，各组均灌胃给
药，除吲哚美辛对照组仅末次给药，其他组连续给药 7 d。末次给
药后 1h用 100%二甲苯致炎液 50 μl涂于右耳正反两面，左耳作
空白对照。20 min后，将小鼠断颈处死，沿耳廓基线剪下两耳，用
8 mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片，用精密天平称重，
计算各组肿胀度之均值与标准差，求出给药组的肿胀抑制率，组
间比较采用单因素方差分析进行 t 检验，利用统计学分析软件
SPSS19． 0 作统计分析处理。结果见表 2。
抑制率(%)=对照组平均肿胀度 ×给药组平均肿胀度
对照组平均肿胀度
× 100%
表 2 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(珋x ± s)
组别 剂 量 耳肿胀抑制率(%)
RAP水提 1． 5g浸膏 /kg 0． 0147 ± 0． 0054＊＊
RAP石油醚 1． 5g浸膏 /kg 0． 0127 ± 0． 0043＊＊
RAP氯仿 1． 5g浸膏 /kg 0． 0141 ± 0． 0054＊＊
RAP乙酸乙酯 1． 5g浸膏 /kg 0． 0108 ± 0． 0063＊＊
RAP正丁醇 1． 5g浸膏 /kg 0． 0131 ± 0． 0051＊＊
RAP醇提物 1． 5g浸膏 /kg 0． 0104 ± 0． 0064＊＊
RAP水层 1． 5g浸膏 /kg 0． 0135 ± 0． 0034＊＊
吲哚美辛对照 0． 013mg /kg 0． 0129 ± 0． 0041＊＊
正常对照 1． 5g浸膏 /kg 0． 0254 ± 0． 0114
与正常对照组比较，＊＊P ＜ 0． 01，有极显著性差异;n = 10
从表 2 可以看出，大叶蛇泡簕的各提取部位及吲哚美辛对照
组可显著抑制小鼠耳廓肿胀，与正常对照组相比有极显著性差
(P ＜ 0． 01)。
2． 2 大叶蛇泡簕水、醇提物及不同萃取部位对大鼠棉球肉芽肿
实验抗慢性炎症作用 取 180 ～ 220 g，SPF级 SD大鼠 90 只，雌雄
各半，随机分为 9 组，每组 10 只。分别是正常对照组、吲哚美辛
对照组、RAP醇提物组、RAP 水提组、RAP 石油醚组、RAP 氯仿
组、RAP乙酸乙酯组、RAP 正丁醇组、RAP 水层组。各组均腹腔
注射 10%的水合氯醛 0． 4 ml /kg麻醉，无菌状态下于大鼠两侧腹
股沟部皮下切开一小口，将高温高压灭菌棉球(20 mg /个)分别
植入大鼠腹股沟开口皮下，随即缝合皮肤，常规消毒。各给药组
开始灌胃给药，连续给药 7d。末次给药后 1h 脱颈椎处死小鼠，
然后将棉球连同周围组织一起取出，剔除多余脂肪，放入 70℃烘
箱中烘至恒重并称重，减去棉球重得到肉芽肿干重，计算干棉球
体质量系数。组间比较采用单因素方差分析进行 t 检验，利用统
计学分析软件 SPSS19． 0 作统计分析处理。结果见表 3。
表 3 对大鼠棉球肉芽肿胀的影响(珋x ± s)
组别 剂量 肉芽肿干重 / g
RAP水提 1． 5g浸膏 /kg 0． 277 ± 0． 010
RAP石油醚 1． 5g浸膏 /kg 0． 241 ± 0． 005
RAP氯仿 1． 5g浸膏 /kg 0． 034 ± 0． 007
RAP乙酸乙酯 1． 5g浸膏 /kg 0． 025 ± 0． 006
RAP正丁醇 1． 5g浸膏 /kg 0． 022 ± 0． 004*
RAP醇提物 1． 5g浸膏 /kg 0． 031 ± 0． 006
RAP水层 1． 5g浸膏 /kg 0． 031 ± 0． 007
吲哚美辛对照 0． 013mg /kg 0． 023 ± 0． 006*
正常对照 1． 5g浸膏 /kg 0． 036 ± 0． 008
与正常对照组比较，* P ＜ 0． 05
从表 3 可以看出，RAP 正丁醇组和吲哚美辛对照组与正常
对照组相比，有显著性差异，P ＜ 0． 05。
3 讨论
大叶蛇泡簕为广东地产药材，有清热利湿、止血、散瘀的作
用;临床主要用于肝炎，痢疾，肠炎，乳腺炎，口腔炎，外伤出血，肝
脾肿大，跌打损伤，风湿骨痛［4］。本实验选用的对乙酸所致小鼠
腹腔毛细血管通透性增高、二甲苯致小鼠耳廓肿胀及大鼠棉球肉
芽肿等实验均是经典的评价药物抑制炎症的模型，可明确反映出
药物抑制炎症的情况。
RAP乙酸乙酯部位和 RAP正丁醇可显著抑制醋酸所致小鼠
毛细血管通透性的增高，与正常组相比有极显著性差异(P ＜
0． 01) ;大叶蛇泡簕各部位对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀均有显著
抑制作用，与正常组相比有极显著性差异(P ＜ 0． 01) ;大叶蛇泡
簕 RAP正丁醇部位对大鼠棉球肉芽肿胀有抑制作用，与正常组
相比有显著性差异(P ＜ 0． 5)。从实验结果看出，大叶蛇泡簕对
急性炎症的抑制作用优于慢性炎症，这一结论与清热解毒药抑制
炎症作用的效果是相符合的。大叶蛇泡簕抑制急、慢性炎症作用
的活性成分主要都集中于萃取物的正丁醇部位，表现出良好的持
续性抗炎效果。徐丹丹等［2］首次于大叶蛇泡簕中分离出白桦
酸，鉴定为羽扇豆烷型三萜类化合物，文献表明此类化合物并不
常出现于悬钩子属的植物中;有研究表明［3］，该类化合物有抗
炎、抗 HIV病毒活性，并可以有效抑制肿瘤细胞的增殖和转移。
我们应对大叶蛇泡簕这类广东地产药材进行更加深入的研究探
讨，为今后临床能充分利用地产药材的丰富资源提供有利保障。
参考文献:
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413．
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2818．
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时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 2 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2013 VOL． 24 NO． 2