全 文 ：云 南 中 医 中 药 杂 志 2 0 0 5年第2 6卷第2期
滇丹参醇提工艺中总丹参酮的降解动力学考察
卫 强 ,潘利明 ,指 导 : 梁晓原
(云南中医学院 20 3级研究生 . 云南 昆明 65 02 0 )
摘 要 : 目的 : 考察传统提取工艺中总丹参酮的 降解动 力
学。 方法 : 采用紫外分光光度法 ,考察在常温贮放 、 浓缩 (60 ℃ ) 、
常压干燥 (8 0℃ 、 10 0℃ )和减压 干澡 (60 ℃ 、 70 ℃ )条件下总丹参酮
的含量变化及降解率 。 结 果 : 60 ℃浓缩和 10 ℃干燥下总丹参酮
降解迅速 , 其他千燥温度降解缓慢 ,常温贮放有一定降解 。 结
论 : 醉提液 不宜久贮 , 醇提液和水提液宜分开低温浓缩 , 浓缩
液 宜低温减压干燥 。
关键词 : 淇丹参 ; 复方丹参片 ;总丹参酮 ; 浓缩 ;干燥 ;化
学动力学 ;稳定性
中圈分类号 : R2 84 文献标识码 : A
文章编号 : 10() 7一23 49 ( 20() 5 )0 2一00 44一0 2
解 , 取溶液定容后照U V 。 2次醇提液含量测定结果见表 l 。
表 l 丹参醉提液含. 测定结果
样品 总丹参酮含量 (了士 s, m g / g*)
醇提液 (n = 5)
醇提液 (=n l)
2石 57士 0 0 20 1
2 3 6 7士 0刀 7 9 3
滇丹参为唇形科鼠尾草属植物 , 为临床常用的活血化
痪药 , 在云南资源丰富 , 且分布广泛 ,作为丹参的代用品 。 《滇
南本草》记载 : “ 丹参 , 味苦 ,性微寒 。色赤象火 , 人心经 。补心 ,
生血 ,养心 , 定志 , 安神宁心 ,健忘不寐 , 生新血 , 安生胎 ,落死
胎 。一味可抵四物之功 ” 。丹参酮类是从丹参中提取的二菇醒
类和其他成分的总称 , 其中丹参酮 n A是药典规定用于质量控
制的有效成分。 国内对于丹参酮 n A的降解动力学作了考察 ,’ ! ,
但对总丹参酮未作研究 , 为此我们对滇丹参醇提工艺后处理
过程进行了降解动力学考察 。
1 材料与仪器
1
.
1 仪器 UV 一245 0紫外分光光度计旧本岛津 ) AE G一 12 0型
电子天平旧本岛津 ) 定量毛细管 (美国Dur m m on d厂 ) Z K一 82 A
型电热真空干燥箱(上海实验仪器厂有限公司 ) 烘箱W MW 一02
型 (宁波自动化仪表研究所)
1
.
2 样品 药材滇丹参 , 购自昆明菊花村药材市场 , 经本院中药
学院药用植物教研室钱子刚副教授鉴定为唇形科滇丹参aS vil a
y u n n o n e n s i
s C
.
H
.
W ir g h t的根 。对照品丹参酮 II A (批号 1 1 07 66 -
20 03 14 )由中国药品生物制品检定所提供。
1
.
3 试剂 所用试剂均为分析纯 。
2 实验方法与结果
2
.
1 对照品溶液的制备 精密称取以)℃减压干燥至恒重的丹参
酮 I IA对照品 5 .印m g置 5 0n d棕色容量瓶中 , 用氯仿溶解并稀释至
刻度 ,摇匀 ,得到浓度为0 . n Zm g / inl 的丹参酮 I认对照品溶液 。
2
.
2 标准曲线的绘制 精密吸取丹参酮 n A对照品溶液 0 . 1 ,
a Z
,
.0 4
,
.0 6
,
.0 7ml
,置于 10 inl 容量瓶中 ,用氯仿稀释至刻度 , 使
浓度分别为1 . 12 , .2 24 , .4 48 , .6 72 , .7 84u 盯ml , 以氯仿作空白 , 于
波长 27 0n m 处测定吸收度 , 绘制标准曲线 , 回归方程为 A =
0
.
1 1 3 lC
一 .0 01 52 2
,
=r .0 99 7
,结果表明丹参酮 n A对照品溶液在
1
.
12
一
.7 84
u g / m l范围内呈线性关系 。
.2 3 供试液的制备及含量 按 《中国药典 》 (2 (x x〕版 )的复方丹
参片的生产工艺 12 ,并参考导师对工艺的研究以 ,精密称取如g滇
丹参粗粉5份 , 加入6倍量95 % 乙醇 , 回流提取 1 .h5 ,抽滤 ,各补足
体积至3仪ha l ,移至棕色瓶中 , 密闭避光保存 。另精密称取滇丹
参粗粉如9 3份 ,同法制备后各补足体积至暇刃呱} ,同法保存。
含量测定 : 醇提液挥去乙醇后 , 用蒸馏水溶解 ,并用等量
氯仿萃取 3次 ,合并 , 取萃取液定容后照 U ;v 干膏用氯仿直接溶
* 含量折算成药材标示含量
.2 4 丹参醇提液后处理工序的降解动力学
.2 4
.
1 贮放阶段的稳定性 取丹参醇提液 , 置具塞共角瓶中 ,
室温不避光放置不同时间 , 测定含量 ,结果见表2 。
表 2 室温贮存的稳定性〔X 土 s)
贮放时间 (d ) 0 5 10 15 2 0
总丹参酮含量 2 . 6 5 7 士 2 3 6 2土 2 3 17 土 2 . 13 6土 2 . 0 35 士
(m g / 书, n 二 3 ) o
·
0 2 0 1 0
·
0 5 3 9 0
.以 30 0 . 0 154 0 , 0 2 29
结果表明 ,丹参醇提液中总丹参酮在20 天内降解率为23 .4 % 。
.2 .4 2 浓缩工序的降解动力学 精密吸取丹参醇提液 20 ml , 加
水 180 ml ,置具塞三角瓶中 ,摇匀 , 同时取 5份样品置60 ℃水浴中
放置一定时间 ,测定含量 。结果见表3 。
表3 醉提物在水分散体系中的降解动力学(60 ℃ . X 土 )S
时间 ( h ) 0 16 3 6 4 8 6() 7 2 84
总丹参酮含量 2 . 36 7 士 ZD 14土 1 . 9 18士 l名06 士 1 . 75 3士 1 . 7 0 3士 1 5 88土
(m昨 , n 二 5 ) 0刀7 9 3 0· 0 8 87 0乃8 5 0 0乃 77 7 0乃 7 3 1 0 . 0 8 3 1 0 . 06 8 0
经回归分析 ,得回归方程 :城习 . 8 137 一刀7 x l叭 , 相关系数
广刁 .97 31 。结果显示 , 总丹参酮在水溶液中的降解基本符合一级反
应 ,其印℃的降解速率常数k=4 .27 xl 理 , h84 内降解率为 .32 %9 。
.2 .4 3 干燥工序的降解动力学 精密吸取丹参醇提液 ( n 二 3 )
10m l共60 份 , 置于小瓶中 ,各取巧份分别置 10 ℃ 、 80 ℃ (常压 )和
70 ℃ 、 60 ℃ (减压 , 真空度均为 .0 06 M aP )烘箱中 , 间隔一段时间取
3份样品测定含量 。结果见表图 1 , 表4 , 表5 。
( 0 一 l 0() ℃ , 盛一 7 0℃ . 今一 s o C , D 一 6 0℃ )
圈 l 滇丹参不同温度千澡降解曲线
表4 干操工序的降解动力学 (10 ℃ . X士 )S
时间 (h)
回归方程
相关系数
降解率
10 ℃干燥
(常压 . m g s/ , =n 3)
2 6 5 7 士0 0 2 0 1
2
.
18 3 士0
.
0 2 16
2乃8 4士 0 . 0 1斌叉)
2乃3 3土0 . 0 5 67
2
.仪)3士0乃 180
1
.
9 4 6 土0 . 《抖 6 8
I
n 〔 := 0 . 87 63一0
.
0 10 87 t
=r 一0
.
830 5
2 6
.
8%
04UQ
件乙46、
.
1,`
2 0 0 5年 第2 6 卷第2期 云 南 中 医 中 药 杂 志 4 5
真菌安胶囊体外抗白色念珠菌的实验研究
杨小洁 ` , 李云委 2 , 黄玉芍’ , 罗伟贤 ,
( 1
.云南省中医中药研究所 , 云南 昆明 65 02 23 ; 2 .云南中医学院附属医院 ,云南 昆明 65 0 21 )
摘 要 : 目的探索真菌安胶囊对白色念珠菌杭菌的作用 。
方 法 : 采用菌基混合加药法 、 双倍稀释法 , 体外测定真菌安胶
囊抗 白 色念珠菌作用的效果 。结 果 :真菌安胶囊有明显的抗 白
色念珠菌作用 , 其 M IC 为 .2 o m g / ml 。结论 :为真菌安胶囊治疗 白
色念珠菌感染性疾病 ,提供了实验依据
关键词 : 真菌安胶囊 ; 白色念珠菌 ; MI C
中图分类号 : R 285 . 5 文献标识码 : A
文童编号 : 10 07一 23 4 9 ( 20 0 5 )0 2一 00 4 5一 02
白色念珠菌 (C an d i da a ! ib c an s) 属于重要的条件致病性真
菌 。随着抗生素 、 肾 _ L腺皮质激素类药物的广一泛应用 , 白色念
珠菌病发病率逐年升高 , 是临床治疗中常遇到的棘手问题 , 故
寻找低毒高效的抗白色念珠菌感染的复方 中药制剂至关重
要 。 云南中医学院附属院陈乔林主任医师在防治深部真菌感
染方面积累了丰富的临床经验 , 我们以其经验方制成胶囊剂
型 一真菌安胶囊 , 并对其作了体外抗白色念珠菌的实验 , 以便
为在临床推广应用提供依据 , 现将实验结果报告如下 。
l 实验材料
1
.
1 药物 真菌安胶囊由课题组提供 , 每粒装量 .0 4 3 9 (相当原
药材量 .3 2 5 9 ) , 批号 : 045 1 8 。 将其配制成4 0% 、 20 % 、 10% 、 5% 、
.2 5%等5个不同浓度的混悬药液 。
1
.
2 菌种 白色念珠菌菌株 C[ M C (C F )9 8 001 」 由昆明医学院
微生物免疫教研室提供 。将标准菌珠划线接种培养后 ,挑选典
型菌落接种于 10 m l经灭菌的沙氏葡萄糖液体培养基中 , 37 ℃培
养 2 4 h , 试验时稀释为 10 6 e fu / m l备用 。
1
.
3 培养基 沙氏葡萄糖琼脂 , 沙氏葡萄糖液培养基 。
2 实验方法
2
.
1 抑菌试验 采用菌基混合加药法 。将 1头of /司稀释菌液 lirlT 混
人经灭菌已融化并冷却至 45 ℃的沙氏葡萄糖琼脂 19 耐 ,倾注于内
表5 干燥工序的降解动力学 (80 ℃ 、 60℃ , X 士 S)
时间 (下, )
80℃干燥
(常压 , rng / g , =n 3)
7 0℃ 臀十燥 6 0℃于燥
碱压 , mg / g , =n 3) (减压 , mg / g n = 3)
0 2石5 7 士0刀2 0 1 2 . 6 5 7士 0 . 0 2 0 1 2 .6 5 7士 0 .0 20 1
12 2刀9 2 士0 .0 2 37 2 . 10 2土 0刀4 5 5 2 . 10 3士 0力5 4 4
2 4 2刀6 7 士0 . 0 4 7 0 2刀7 3士O ` 0 3 6 8 2 .0 8 5 士 O刀 1 75
3 6 2刀5 7 士0乃4 2 6 2刀5 8士 0乃3 8 0 2 ,0 6 4 士0力 3 80
4 8 2
.
0 12 士0
.
0 2 3 5 2
一
0 39 士O
.
0() 3 9 2 2
.
0 4 8 士0
.
0 3 7 4
6 0 2力0 1士0乃5 3 8 2刀2 9士 0 . 0 3 3 8 2 .0 3 4 士0 .0 35 5 .
【n l口l方程 l ; , , = 0名 69 2一 0 .0() 36 6 7 t I n ( = 0名 68 5一 0 .0() 34 4 5 t In ( = 0名 69 6一 0刀 0 3 39 4 r
相关系数 r二 一住7 61 4 r二一仓7 3 9l =r 一 0刀3 78
降解率 24 刀% 23 石% 23 4 %
结果表明 , 10 0℃干燥时总丹参酮降解迅速 , 2h4 内降解率
为 2 6 . 8% ; 8 0℃ 、 7 0℃ 、 6 0℃干燥时总丹参酮降解缓慢 , 6h0 内降
解率分别为24 . 7% 、 23 .6 % 、 23 4 % 。
.2 5 滇丹参干膏粉 与醇提液的 T L C比较
2
.
5
.
1 样品的制备 醇提液样品 :取醇提液 (n 二3) 10ml , 备用 干
浸膏样品 : 将经 10 0℃干燥的 1h6 、 2h4 、 4h8 样和经 60 ℃干燥的
3 6 }1
、
4 8h
、
6 o h样直接加 9 5%乙醇溶解并定容至 10m l , 备用 。
2
.
5 .2 薄层层析 分别取 卜述2种样品溶液和对照品溶液佩少量
用95 % 乙醇溶解 )su l ,分别点于同一硅胶 (G 自制板 )上 , 用苯一乙酸
乙酚 ( 19 . 5 : .0 5) 展开 ,取出 ,晾干 , 日光和 365 nl 下观察 。结果见图 2
3 小结与讨论
因滇丹参药材为人 丁粉碎 , 因而粗细有所差异 , 导致 2次
测定含量有一定差别 ,但基本反映了所购药材的含量情况 。
常规贮备有一定降解 , 提示醇提液不可 久贮 ; 60 ℃浓缩
降解回归方程反映了其总丹参酮降解基本符合一级反应 ,
与醇提液 6 0℃直接干燥相比 ,其降解迅速 , 提示在有水分的
情况下浓缩对丹参酮的破坏严重 , 因此在传统工艺中将醇
提液和水提液分开浓缩有意义 , 且在浓缩时尽量避免水分
的影响 。 干燥 工序的总丹参酮降解方程线性差 ,但从降解率
可以看出 , 1 0 0℃降解迅速 , 其他随着温度 的降低其降解率
降低 。
薄层分析显示 , 可见光下 1 0 0℃干燥 4 h8 后丹参酮 H A色
泽变为暗红色 ; 60 ℃干燥 6h0 后色泽稍鲜艳 。 3 6 5 n m下观察 ,
10 0 ℃ 、 60 ℃干燥品同有 3个斑点 , 但 10 ℃干燥 1h6 出现分解
产物 , 4 8 h分解产物较清晰 ; 6 0℃干燥未出现分解产物 , 提示
高温下总丹参酮降解迅速 , 低温对其影响不大 。提示考虑挥
去水分的需要 , _ 〔业生产时应尽量采取减压低温的干燥模
式 。
通过 与丹参酮 l A的降解 ! , ’作比较 , 证明总丹参酮的降解过
程必定伴随着其他成分的降解 , 其降解条件和原理有待作更
深一步研究 、口匕口片
日光 F : ( l0() 飞〕) (6 0飞二) 365 ; lm 下 : ( 10 ℃ ) (6 0℃ )
〔注 : 10 笔 : s一对照品 l一 醇提液 2一干燥 16 卜 3一于一燥 24 h 4一干燥 4 8卜 60 ℃ : s 一对
照品 l一醇提液 2一 卜燥 3h6 3一 干燥 48 卜 4一干燥 6。卜)
图 2 滇丹参干膏粉与醇提液的 IT 」C比较
参考文献 :
11] 苏子仁 , 曾惠芳 , 曾儿儿 ,等 .丹参醇提 _ l 艺中丹参酮 l A降解动力
学研究 IJ ]. `护成药 , 19 9 7 , 19 (一2 ) : l一 3 .
!2] 中国药典委员会 ·中国药典【M] 刁匕京 : 化学 「业出版社 , 20 0 .
5 18一 5 19
.
13 ) 侯安国 , 梁晓原 ,李树帜 ,等 一正交实验优选复方丹参片95 %醇提 _ 1
艺研究 IJ}·云南中医学院学报 ( J曾刊 ) , 20 0 0 , ( 2 3 ) : 3一 3 3 .
收稿 日期 : 2 0 0 5一 0 1一0 3 )