免费文献传递   相关文献

木芙蓉叶提取物对糖尿病大鼠抗氧化能力的影响



全 文 :木芙蓉叶提取物对糖尿病大鼠抗氧化能力的影响
王立勉(福建省立医院 福州 350001)
摘要:目的 研究木芙蓉叶提取物对 2 型糖尿病大鼠血糖及抗氧化能力的影响。方法 采用高糖高脂饲料联合小剂量链脲佐菌素制备 2 型糖
尿病大鼠模型,给予二甲双胍及木芙蓉叶提取物灌胃治疗,连续给药 4 周。给药 2 周后,检测血清 SOD 含量;给药 4 周后,检测血清 SOD、GSH-
PX和肝脏 SOD、GSH含量。结果 给药 2 周后,木芙蓉叶提取物高剂量组的血清 SOD含量比糖尿病模型组显著提高;给药四周后,木芙蓉叶提
取物高、低剂量组的血清 SOD、GSH-PX和肝脏 GSH含量比糖尿病模型组显著提高,木芙蓉叶提取物低剂量组和二甲双胍组的肝脏 SOD含量比
糖尿病模型组显著提高。结论 木芙蓉叶提取物能提高 2 型糖尿病大鼠的抗氧化能力,这可能是其降糖作用的机制之一。
关键词:木芙蓉提取物;降糖作用;抗氧化
中图分类号:R969 文献标识码:B 文章编号:1006-3765(2014)-12-0927-0028-03
作者简介:王立勉,女(1982. 11 -)。毕业于福建医科大学。职称:药
师。从事药学专业。联系电话:13599398282
Impact of Antioxidant of Hibiscus Leaf Extract on Diabetic Rats
WANG Li-mian(Fujian province Hospital Fuzhou 350001,China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study the effect of antioxidant of Hibiscus leaf extract on diabetes rats of type
2. METHODS Type 2 diabetic rats model was estabilshed by feeding high-fat and high-sugar foods plus injecting
low-dose streptozotocin. Metformin and Hibiscus leaf extract orally was given by gavage for consecutive four
weeks. Administration,test the serum SOD content was tested after two weeks and the content of serum SOD,GSH-PX
and liver SOD,GSH was tested after four weeks. RESULTS Two weeks after administration,serum SOD content in
Hibiscus leaf extract high-dose group was significantly higher than that in diabetic model group;after four weeks of
administration,SOD,GSH-PX and liver GSH content in Hibiscus leaf extract high and low dose group were signifi-
cantly higher than those in diabetic model group,liver SOD content in Hibiscus leaf extract low-dose group and met-
formin group were significantly higher than that in diabetic model group. CONCLUSION Hibiscus leaf extract can
increase the antioxidant capacity of type 2 diabetic rats,which may be one of the mechanisms of its hypoglycemic
effect.
KEY WORDS:Hibiscus leaf extract;Diabetic rats;Antioxidant
木芙蓉叶,为锦葵科植物木芙蓉的叶片,性味:辛,平。凉
血,解毒,消肿,止痛,治痈疽焮肿,缠身蛇丹,烫伤,目赤肿痛,
跌打损伤〔1〕。现代医学研究表明:木芙蓉叶中含有香豆素、
黄酮、多糖、维生素 C等多种成分,具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤
以及降低血糖等药理学作用,临床上具有较广阔的应用前景,
当前临床上也用于糖尿病的治疗〔1 ~ 6〕。
近年来,许多研究发现糖尿病及其并发症的发生与机体
的氧化应激水平有关〔7〕,因此本实验采用高糖高脂饲料联合
小剂量链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)制备 2 型糖尿病大鼠
模型,并观察木芙蓉叶提取物对糖尿病大鼠血清 SOD、GSH-
PX和肝脏 SOD、GSH的影响,以进一步探讨木芙蓉叶提取物
降低血糖的机制,从而为其治疗 2 型糖尿病提供实验依据〔8〕。
1 仪器与材料
1. 1 仪器 SP-721 紫外可见分光光度计(上海);电热恒温
水槽(上海科达实业有限公司);台式低速离心机(上海富康
医疗器械有限公司);微型漩涡混匀器(上海红星医疗器械
厂);电子天平(德国赛多利斯)。
1. 2 实验材料与试剂 木芙蓉叶,购自当地中药饮片厂,经
福建中医药大学药用植物教研室鉴定为锦葵科木芙蓉的叶
片;链脲佐菌素(Sigma公司,Lot#070M1257);戊巴比妥钠(国
药化学试剂有限公司,批号:73018183)考马斯亮兰蛋白测定
试剂盒、总超氧化物歧化酶(SOD)测试盒、谷胱甘肽过氧化物
酶(GSH-PX)测试盒、谷胱甘肽(GSH)测试盒均购自南京建
成生物工程研究所。
高糖高脂饲料:参照文献〔7〕购自上海斯莱克实验动物有
限责任公司,基础料 66. 5%、蔗糖 20%、猪油 10%、胆固醇
2. 5%、胆酸钠 1%。
0. 1mmol·L -1柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液:甲液:2. 1g 柠檬
酸溶于 100mL水,乙液:2. 9g柠檬酸钠溶于 100mL水,甲液比
乙液 57 ∶ 43 混合,0. 22nm 滤膜过滤灭菌后保存于 4℃ 冰
箱〔5,6〕。
·82·
海峡药学 2014 年 第 26 卷 第 12 期
1. 3 动物 SD大鼠,雄性,180 ~ 220g,60 只,上海斯莱克实
验动物有限责任公司。
2 方法
2. 1 木芙蓉叶提取物的制备 木芙蓉叶用清水洗净,晾干,
粉碎后过 100 目筛备用。取粉末加 4 ~ 5 倍水,浸泡过夜,加
水至 8 倍量提取 2h,抽取滤液,再加入 6 倍量水,提取 1h,合
并两次提取液,置于旋转蒸发仪中浓缩,得浓缩液。浓缩至
1g生药·mL -1。
2. 1 2 型糖尿病模型的制备 参照文献〔7,9〕适应性喂养 1 周
后的 SD大鼠 60 只,随机分为正常组(10 只)和造模组(50
只),正常对照组饲喂基础饲料,造模组饲喂高糖高脂饲料,
饲养 5 周后,大鼠腹腔注射 30mg·kg -1 STZ 溶液(临用前用
pH 4. 2、0. 1mmol·L -1的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液新鲜配制),
3d后再注射 1 次。末次注射给药后 3d(预先大鼠禁食不禁水
12h),剪尾采血,制备血清,测定大鼠空腹血糖值,以血糖值超
过 13. 8mmol·L -1为成模标准。
2. 2 实验分组及给药 将造模成功的 40 只大鼠随机分为 4
组,分别为模型对照组、阳性药组(二甲双胍组,给药剂量
50mg·kg -1)和木芙蓉叶提取物高、低剂量组(给药剂量分别
为 2g·kg -1和 1g·kg -1(生药)) ,正常对照组和模型对照组
灌胃给予蒸馏水,阳性药组和木芙蓉叶提取物高、低剂量组灌
胃相应的供试液,灌胃体积 1mL /100g,每天 1 次,连续给药 4
周。
2. 3 血清 SOD 和 GSH-PX 的测定 分别于给药两周、四周
后,大鼠禁食不禁水 12h,剪尾采血,制备血清,按 SOD试剂盒
操作说明测定血清 SOD活性,第四周加测定 GSH-PX活性。
2. 4 肝脏 SOD 和 GSH 的测定 给药 4 周后,取心脏采血后
大鼠的肝脏,用 0. 9%氯化钠溶液冲洗,滤纸拭干,按重量体
积比加生理盐水制备成 10% 的肝匀浆,3000r·min -1离心
10min,取肝匀浆上清再用生理盐水稀释成 1%肝匀浆,按考
马斯亮兰蛋白测定试剂盒说明书测定肝匀浆的蛋白含量。
取制备好的 10%的肝匀浆按 SOD和 GSH测试盒说明书
分别测定其含量。
2. 5 统计学处理 各组实验数据以均数 ±标准差(x ± s)表
示,采用 SPSS 13. 0 进行统计分析。
3 结果
3. 1 木芙蓉叶提取物对糖尿病大鼠血清 SOD活性的影响
木芙蓉叶提取物对糖尿病大鼠血清 SOD 活性的影响(见表
1)。给药 2 周后,二甲双胍组及木芙蓉叶提取物高、低剂量组
大鼠血清的 SOD活力均较模型组高,其中木芙蓉叶提取物高
剂量组与模型组比较,差异有统计学意义(P < 0. 05);给药 4
周后,木芙蓉叶提取物高(P < 0. 05)、低剂量组(P < 0. 01)大
鼠血清的 SOD活力均比模型组显著升高。
3. 2 木芙蓉叶提取物对糖尿病大鼠血清 GSH-PX 活性的影
响 木芙蓉叶提取物对糖尿病大鼠血清 GSH-PX活性的影响
(见表 2),由表 2 可知,给药 4 周后,二甲双胍组及木芙蓉叶
提取物高、低剂量组大鼠血清的 GSH-PX活力均比模型组高,
其中木芙蓉叶提取物高、低剂量组与模型组比较有显著性差
异(P < 0. 01、P < 0. 05)。
表 1 木芙蓉叶提取物对糖尿病大鼠血清 SOD活性的影响 (x ± s)
组别 剂量 动物数
SOD(U·mL -1)
给药 2 周后 给药 4 周后
正常组 - 10 194. 50 ± 21. 85 192. 73 ± 17. 11
模型组 - 10 119. 25 ± 19. 321* 116. 01 ± 13. 23*
阳性药组 5mg·kg - 1 10 137. 18 ± 14. 33# 135. 15 ± 22. 14#
木芙蓉叶
高剂量组 2g·kg
- 1 10 152. 16 ± 20. 62## 161. 46 ± 14. 52##
木芙蓉叶
低剂量组 1g·kg
- 1 10 145. 22 ± 10. 39 147. 32 ± 32. 19##
注:* P <0. 01,与正常组相比;#P <0. 05,##P <0. 01,与模型组相比
表 2 木芙蓉叶提取物对糖尿病大鼠血清 GSH-PX 活性的影响 (x
± s)
组别 剂量 动物数 GSH-PX(U)
正常组 - 10 1763. 37 ± 127. 39
模型组 - 10 1105. 43 ± 217. 25*
阳性药组 5mg·kg -1 10 1462. 16 ± 238. 32##
木芙蓉叶高剂量组 2g·kg -1 10 1608. 13 ± 211. 32##
木芙蓉叶低剂量组 1g·kg -1 10 1533. 87 ± 207. 1#
注:* P < 0. 01,与正常组相比;#P < 0. 05,##P < 0. 01,与模型组相比
3. 3 木芙蓉叶提取物对糖尿病大鼠肝脏 SOD活性及 GSH含
量的影响 木芙蓉叶提取物对糖尿病大鼠肝脏 SOD 活性及
GSH含量的影响(见表 3)。由表 3 可知,给药四周后,二甲双
胍组及木芙蓉叶提取物高、低剂量组大鼠肝脏的 SOD 活力均
比模型组高,其中二甲双胍组、木芙蓉叶提取物低剂量组与模
型组比较有显著性差异(P < 0. 05)。二甲双胍组及木芙蓉叶
提取物高、低剂量组大鼠肝脏的 GSH 含量均比模型组高,其
中木芙蓉叶提取物高、低剂量组与模型组比较有显著性差异
(P < 0. 05,P < 0. 01)。
表 3 木芙蓉叶提取物对糖尿病大鼠肝脏 SOD活性的影响 (x ± s)
组别 剂量 动物数
GSH
(U·mg -1)
SOD
(U·mg -1)
正常组 - 10 2. 37 ± 0. 56 1. 93 ± 0. 13
模型组 - 10 1. 55 ± 0. 64* 1. 45 ± 0. 17*
阳性药组 5mg·kg -1 10 2. 04 ± 0. 71# 1. 79 ± 0. 16#
木芙蓉叶
高剂量组 2g·kg
-1 10 2. 27 ± 0. 61# 1. 81 ± 0. 41#
木芙蓉叶
低剂量组 1g·kg
-1 10 2. 15 ± 0. 34## 1. 52 ± 0. 40##
注:* P < 0. 01,与正常组相比;#P < 0. 05,##P < 0. 01,与模型组相比
4 讨论
研究表明糖尿病及其并发症的发生与机体的氧化应激水
平有关,氧化应激可以阻断胰岛素作用通路,导致胰岛素抵
抗;降低胰岛素基因表达水平;抑制胰岛素分泌;促进 beta 细
胞凋亡等。这使得 2 型糖尿病表现为慢性、复杂性的代谢性
疾病,并伴有范围广泛的并发症。降低机体的氧化应激水平
是防治糖尿病并发症的一个有效途径〔10〕。
SOD对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用,
能清除超氧阴离子自由基而保护细胞免受损伤,是机体主要
的抗氧化酶,其活力的高低反映机体的抗氧化能力〔11,12〕。
·92·
Strait Pharmaceutical Journal Vol 26 No. 12 2014
GSH是谷氨酸、甘氨酸和半胱氨酸组成的一种三肽,是组织
中主要的非蛋白质的巯基化合物,是机体内广泛存在的一种
重要的催化过氧化氢分解的酶,能清除体内脂质过氧化物,阻
断活性氧和自由基对机体的损伤作用从而提高机体抗氧化能
力,起到解毒及保护细胞膜结构和功能完整的作用。其量的
多少是衡量机体抗氧化能力大小的重要因素〔11,12〕。
我们的研究发现在高糖高脂饲料联合小剂量 STZ 诱导
的 2 型糖尿病大鼠模型中,大鼠血清 SOD、GSH-PX 和肝脏
SOD、GSH与正常对照组比较显著降低,证实了糖尿病大鼠自
由基产生率超过清除率,氧化应激增加。木芙蓉叶提取物实
验结果则显示,经治疗后,与糖尿病模型组对比,给药组大鼠
血清 SOD、GSH-PX和肝脏 SOD、GSH 显著升高,表明木芙蓉
叶提取物能提高糖尿病大鼠的抗氧化能力,增强组织清除自
由基的能力。
参考文献
〔1〕罗仕华,符诗聪,张凤华,李孝鹏,周玲珠,杜宁 . 木芙蓉叶有效组
分对大鼠肾缺血再灌注损伤中 TNF-α 的影响〔J〕. 中国中西医结
合杂志,2005,(S1) :78-81.
〔2〕曾晓芳,黄显 . 木芙蓉根提取物的急性毒性及体外抗肿瘤活性的
实验研究〔J〕. 福建中医药,2014,(02) :55-58.
〔3〕符诗聪,史炜镔,姚丽韵 . 木芙蓉有效组分的抗炎实验研究初步
报道〔J〕. 上海第二医科大学学报,2001,(01) :14-16.
〔4〕姚莉韵,王丽平 . 木芙蓉叶提取工艺的研究〔J〕. 中成药,2000,
(12):11-13.
〔5〕林仁辉,陈家绰 . 木芙蓉叶等外敷治疔软组织挫伤、感染〔J〕. 广
西赤脚医生,1976,(Z1) :46.
〔6〕林浩然 . 木芙蓉花叶洗剂治疗滴虫性阴道炎 65 例〔J〕. 福建医药
杂志,1984,(06) :23.
〔7〕曾位森,邵聪文,魏铖,苏亚茹 . 高脂饮食诱导的 2 型糖尿病模型
小鼠的生化及病理分析〔J〕. 南方医科大学学报,2014,(08).
〔8〕吴元洁,郑书国,方朝晖,等 . 糖尿病大鼠血糖波动下 SOD、MDA、
NO变化及丹蛭降糖胶囊的干预作用〔J〕. 中成药,2014,(07) :
1361-1366.
〔9〕黄彦峰,晋玲,何显教,等 . 链脲佐菌素诱导大鼠Ⅰ型糖尿病模型
的效果〔J〕. 现代预防医学 .
〔10〕陈振宇,汤礼军 . 多元醇通路与氧化应激在糖尿病慢性并发症
中的关系〔J〕. 西南军医,2014,(03) :334-336.
〔11〕吴嘉琪 . 糖尿病中氧化应激的增加及与运动的关联〔J〕. 南京体
育学院学报(自然科学版),2014,(02) :52-56.
〔12〕李宁,尹倩,庄艳艳,钟梅 . 氧化应激在妊娠期糖尿病发病机制
中的研究进展〔J〕. 中国妇幼保健,2014,(13) :2134-2136.
GSK3β抑制剂氯化锂对大鼠前列腺增生的影响
楚元奎1,杨 丽2,廖国玲1(1. 宁夏医科大学检验学院 银川 750004;2. 宁夏医科大学实验动物中心 银川
750004)
摘要:目的 探讨 GSK3β 抑制剂氯化锂在大鼠前列腺增生治疗中的作用。方法 通过皮下注射丙酸睾酮的方法复制前列腺增生模型,建模
大鼠随机分成 3 组:氯化锂高剂量治疗组、低剂量治疗组和模型对照组,另设正常对照组。高剂量和低剂量治疗组分别以 20mg /(kg·d)、10mg
(kg·d)的剂量腹腔注射氯化锂,连续给药 30d。称量各组大鼠前列腺组织湿重、体积,计算前列腺指数;酶联免疫法测定血清中睾酮(T)、雌激
素(E2)和性激素结合球蛋白(SHBG)含量。结果 氯化锂治疗组的前列腺湿重、体积和脏器系数较模型对照组显著降低(P < 0. 01);氯化锂治
疗组的 T、E2 和 SHBG水平也较模型对照组降低(P < 0. 05)。结论 GSK3β抑制剂氯化锂对前列腺增生具有一定抑制作用。
关键词:大鼠;前列腺增生;GSK3β抑制剂;氯化锂
中图分类号:R969 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2014)-12-1163-0030-03
作者简介:楚元奎,男(1980 -)。讲师,博士,从事医学检验工作。
通讯作者:杨丽,女(1979. 01 -)。学历:硕士。职称:讲师。E-mail:yanglinxkd@ 163. com
基金项目:2014 年宁夏医科大学校级项目
Effects of GSK3β Inhibitor LiCl on Hyperplasia of Prostate in SD Rats
CHU Yuan-kui1,YANG Li2,LIAO Guo-ling1(1. School of Laboratory Medicine,Ningxia Medical University,
Yinchuan 750004,China;2. Laboratory Animal Center,Ningxia Medical University,Yinchuan 750004,China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To investigate the effect of GSK3β Inhibitor LiCl on hyperplasia of prostate in
rats. METHODS 32 SD male adult rats were equally randomized into normal group,model group and LiCl treat-
ment group. The rat model of prostatic hyperplasia was established by subcutaneous injection of testosterone propio-
·03·
海峡药学 2014 年 第 26 卷 第 12 期