全 文 ：云 南 中 医 中 药 杂 志 !#年第 !$卷第 %期
&’()*+!萃取滇丹参中总丹参酮成分工艺研究
卫 强，梁晓原
,云南中医学院，云南 昆明 $#!-
摘 要：目的：探讨从滇丹参中提取总丹参酮成分的工艺。
方法：采用超临界二氧化碳（&’() *+!）萃取法，并与传统醇
提相比较。结果：&’()*+!萃取的最佳工艺为压力.#/01，夹带
剂为2#3乙醇，萃取温度4#5，萃取时间46，夹带剂加入量
!#78，*+!流量为!#9! 。结论：用&’()*+!萃取滇丹参中总丹
参酮其提取率高于传统醇提，具有应用价值。
关键词：滇丹参；&’()*+! 正交试验；乙醇提取；提取工艺
中图分类号：:!;% 文献标识码：<
文章编号：.=)!4%2（!#）%)4)4
滇丹参为唇形科植物滇丹参 &18>?1 @ABB1BCBD?D *EFE
GH?I6J 的干燥根及根茎，又名紫丹参、红青菜、小红参、山槟榔
等，主产于四川、贵州、云南等省，在云南有广泛分布，是云南
习用药材之一。临床上用于月经不调、闭经、痛经、产后腹痛、
跌打损伤、关节疼痛、疝痛、腰痛、痈疮肿毒等。药理研究表明K
滇丹参具有抑制血小板聚集、扩张冠脉、对抗心肌缺血、改善
微循环以及抗菌、抗炎、抗脂质过氧化作用。
现今药厂采用乙醇热回流提取，然后浓缩成浸膏，由于提
取能力差和长时间加热提取或浓缩，有效成分损失严重，而用
&’()*+!萃取进行工艺改革，收率比旧工艺大大提高，生产周
期短，总丹参酮含量高，且可直接投料用于制剂。笔者对滇丹
参进行&’()*+!萃取研究，以期能对云南丹参的&’()*+!萃取
产业化发展有一定的参考价值。
#$ 材料与仪器
.E. 仪器 F取有限公司生产），<(L).!型电子天平 （日本岛津），MN)
!%#紫外分光光度计（日本岛津）
.E! 样品 药材滇丹参，购自昆明菊花村药材市场，经本院
中药学院药用植物教研室钱子刚副教授鉴定为唇形科滇丹参
&18>?1 @ABB1BCBD?D *EFEGH?I6J的根。对照品丹参酮!<（批号
..=$$)!4.%）由中国药品生物制品检定所提供。
.E4 试剂与原料 *+!气体（昆明氧气厂生产），所用试剂均
为分析纯。
%$ 实验方法与结果
反应（O PE#）及体重下降（灌服给药!6后再进行催促戒断
观察O PE#）；灌服给药后.、!6观察克毒宁胶囊大、中、小剂
量（!; 7I! QI、.% 7I! QI、= 7I! QI）均能减轻小鼠注
射纳洛酮后跳跃反应。其中灌服给药后!6克毒宁胶囊大、中、
小剂量均能明显减轻小鼠注射纳洛酮后跳跃反应，甚至
4#7I! QI也能抑制催促戒断后的跳跃反应，且与吗啡模型组
相比有显著性差异（O PE#RE.），对造模形成的小鼠体重
下降无明显的抑制作用（与吗啡模型组相比O SE#）。
表. 克毒宁胶囊对吗啡依赖性小鼠催促戒断的治疗作用
（灌服药物.6后观察）
分组及给药 动物数 催促戒断后体 催促戒断后跳 催促戒断后跳
,7I! QI& （只） 重下降（I）, !TD - 跃动物数（只） 跃次数（次）
阴性对照组 .# E4TE## T
吗啡模型组 ..U E;%TE#;! ..!!! %E.T.$E;.!!!
苯氨咪唑啉 .! E;2TE4% .! !4E!#T.#E2=
E!7I! QI
克毒宁胶囊 .! E;#TE$. 2 .;E%#T!%E!=
!;7I! QI
克毒宁胶囊 .! E#$TE#; .. !E!#T!.E%%
.%7I! QI
克毒宁胶囊 .! E;2TE!$ .. !4E44T!%E44
= 7I! QI
注：和阴性对照组比!：O PE#，!!：O PE.，!!!KO PE.，和吗
啡模型组比KO PE#VKO PE.VKO PE.。
U ：有一只动物意外丢失。
表! 克毒宁胶囊对吗啡依赖性小鼠催促戒断的治疗作用
（灌服药物!6后观察）
分组及给药 动物数 催促戒断后体 催促戒断后跳 跳跃反 催促戒断后跳
,7I! QI- （只） 重下降（I）, !TD - 跃动物数（只）应率（3- 跃次数（次）
阴性对照组 . E%;TE%% T
吗啡模型组 .% E24TE%.! .% .!!! .%E=T.4E$#!!!
苯氨咪唑啉 .$ E#2TE4= $ 4=E# .E;.T4E$=
E!7I! QI
克毒宁胶囊 .# E=$TE4= % !$E= !E$T#E2
!;7I! QI
克毒宁胶囊 .$ E$$TE4. # 4.E4 !E4;T$E$2
.%7I! QI
克毒宁胶囊 .$ E$$TE%! $ 4=E# !E2.T4E=#
= 7I! QI
克毒宁胶囊 . E=;TE! # # %E.T#E=
4#7I! QI
注：和阴性对照组比!：O PE#，!!：O PE.，!!!KO PE.，和吗
啡模型组比KO PE#VKO PE.VKO PE.。
’$ 小结
中药制剂克毒宁胶囊对小鼠注射纳洛酮后催促戒断所致
的跳跃反应克毒宁胶囊各剂量组（!;7I! QI、.%7I! QI、
=7I! QI、4#7I! QI）均有一定的抑制作用，尤其是灌服给药
后!再进行催促戒断作用更明显，与苯氨咪唑啉组相比大、
中、小剂量组无显著性差异（O SE#），提示克毒宁胶囊大、
中、小剂量组对抗吗啡依赖小鼠催促戒断所致的跳跃反应与
苯氨咪唑啉相当，说明克毒宁胶囊各剂量组有较强的对抗吗
啡依赖小鼠的催促戒断跳跃反应；对于小鼠注射纳洛酮后催
促戒断所致体重下降无明显抑制作用，统计学检验与模型组
相比无明显差异（O SE#）。结果提示克毒宁胶囊对吗啡依赖
性小鼠催促戒断有一定的治疗作用。此实验为临床上应用克
毒宁胶囊治疗阿片类戒断症状提供了科学依据。
（收稿日期：!#)%)!。）
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4
DOI:10.16254/j.cnki.53-1120/r.2005.04.035
!#年第 !$卷第 %期 云 南 中 医 中 药 杂 志
!&’ 对照品溶液的制备 精密称取$(减压干燥至恒重的丹参
酮!)对照品#&$*+置#*,棕色容量瓶中，用氯仿溶解并稀释至
刻度，摇匀，得到浓度为&’’!*+! *,的丹参酮!)对照品溶液。
!&! 样品溶液的制备及含量测定 -.!钢瓶 冷冻系统
高压泵 萃取釜 解析釜/ 解析釜// 0循环1
夹带剂泵
2345-.!萃取按照以上工艺流程进行。醇提按 《中国药
典》（!版）的复方丹参片的生产工艺 6’7，并参考导师对工艺
的研究6!7，精密称取%+滇丹参粗粉#份，加入$倍量8#9乙醇，回
流提取’&#:;抽滤;各补足体积至!<*,;移至棕色瓶中;密闭避光
保存。
含量测定：醇提液或2345-.!萃取液挥去乙醇后，用蒸馏
水溶解，并用等量氯仿萃取=>%次，合并，取适量萃取液定容后
照?@。
!&=标准曲线的绘制 精密吸取丹参酮!)对照品溶液&’;&!;
&%;&$;&A*,;置于’*,容量瓶中;用氯仿稀释至刻度;使浓度分
别为 ’&’!;!&!%;%&%<;$&A!;A&<%B+! *,; 以氯仿作空白 ; 于波长
!AC*处测定吸收度; 绘制标准曲线; 回归方程为)D&’’=’-5
&’#!!;ED&888A; 结果表明丹参酮!)对照品溶液在’&’!>
A&<%B+! *,范围内呈线性关系。
!&% 2345-.!萃取滇丹参中总丹参酮
!&%&’试验因素与水平 根据预试验，不加入夹带剂其萃取液
中总丹参酮含量微量，故需加入夹带剂。根据国内邹节明 6=7、李
迎春6%7对丹参的工艺研究，设计药材加入量!#+，萃取时间!:，
夹带剂量为!*,并按如下因素水平进行实验。因素水平表见
表’，结果见表!、表=。
表’ 滇丹参超临界-.!萃取因素水平表
因素
)0萃取温度，(1 F（萃取压力，GHI） -（夹带剂种类） J（-.!流量，K! ）
# =# !# 8#9乙醇 !#
! %# ! 乙酸乙酯 !
= ## ’# 丙酮 ’#
表! K8（=%）正交试验设计表及试验数据
试验号 ) F - J 总丹参酮提取率（9）
’ ’ ’ ’ ’ &!=<%
! ’ ! ! ! &’$#’
= ’ = = = &’8%’
% ! ’ ! = &’#A$
# ! ! = ’ &’##
$ ! = ’ ! &!!8$
A = ’ = ! &’%#$
< = ! ’ = &!!==
8 = = ! ’ &’88
A$ &#%’$ &$8’= !%
! &#%!! &#%=% &#!’A &#%=
# &#$A8 &$!!A &%8%A &#A#
L’ &’88! &’<# &!=% &’8A#
L! &’L= &’<8= &!A$ &’$%8 &’8’A
M &’<# &!A’ &$## &’A%
表= 方差分析表
因素 偏差平方和 自由度 3值 显著性
) &’ ! &% N O&’
F &’ ! &% N O&’
- &< ! =&! N P&’
J & ! & N O&’
误差 &’ <
3&’0!;<1D=&’’
由极差M可知各因素对总丹参酮提取率的影响次序为-O
FO)OJ；提取率较好的条件是)’F=-’J’;即萃取温度=#(;压力
’#GHI，夹带剂选择8#9乙醇，-.!流量!#K! :。按上面的较佳
工艺条件重复#次进行验证，结果平均提取率为&!’8%9，
M2JD!&8#9。
!&%&! 夹带剂打入次数的选择 按照优选条件，考虑到夹带剂
在循环中的利用率，我们将!*,夹带剂设计了分’次打入（开
始萃取时即打入!*,）和!次打入（第’次打入’*,，间隔’:
再打入’*,）。见表%。
表% 夹带剂打入次数的选择
夹带剂打入次数 总丹参酮（*+） 提取率
’次 A$’&A &!#=89
!次 $$’&< &!!$9
!&%&=夹带剂加入量的选择 因为夹带剂加入量太大容易冲破
萃取釜滤板，故设计最大量为=#*,。其结果见表#。
表# 夹带剂加入量的选择
夹带剂加入量（*,） 总丹参酮（*+） 提取率（9）
’# $’#&$ &!#!
! #A<&% &!=#8
!# A$’&A &!#=8
= $=#&’ &!’’A
=# AA&A &’8!<
!&%&%夹带剂乙醇浓度对提取率的影响 为了验证乙醇的最佳
浓度，又考虑萃取脂溶性成分的需要，我们设计最低浓度为
<#9乙醇。其结果见表$。
表$ 夹带剂乙醇浓度对提取率的影响
乙醇浓度 总丹参酮（*+） 提取率（9）
无水乙醇 $A%&% &!!%<
8#9乙醇 A$’&A &!#=8
<#9乙醇 $<%& &!!<
!&%&#萃取时间对萃取率的影响 考虑机器运行磨损程度和成
本的因素，我们设计了最大萃取时间为=:。其结果见表A。
表A 萃取时间对提取率的影响
萃取时间（:） 总丹参酮（*+） 提取率（9）
’ ’A8&% A8
! A$’&A &!#=8
= A<%&# &!$’#
!&%&$ 最佳工艺验证试验 按上述较佳工艺，即萃取温度=#(;
压力’#GHI，夹带剂选择8#9乙醇，-.!流量!#K! :，夹带剂加入
量为!#*,，夹带剂一次性打入，萃取时间为=:进行#批验证试
验，其平均提取率为&!=#<9，M2JD’&A’9。
!&# 药典法对滇丹参的提取 按!&!工艺提取#份同批药材并
水平
=’
云 南 中 医 中 药 杂 志 !#年第 !$卷第 %期
调坤汤性激素样作用的实验研究
徐树槐，高宗丽，左志雄
&大理学院临床医学院，云南 大理 $’()
摘 要：目的：探讨调坤汤对雌二醇 &*!)、孕酮 &+)等性激素
调节的机理。方法：用同龄,-雌性大白鼠.只，随机分为空白
对照组、高剂量给药组、低剂量给药组，每组(只，空白对照组
不用任何药物，高剂量给药组每天给调坤汤煎液./0含原生药
12，低剂量给药组每天给调坤汤煎液稀释液./0含原生药$2，共
给药(天 &约!个生理周期)，用药结束后采血样测性激素。结
果：经检验，高剂量给药组、低剂量给药组的*!和+与空白对照
组比较差异有显著性&+ 34#、+ 34()。结论：调坤汤有升高
血清*!和+的作用。
关键词：雌二醇；孕酮；实验；调坤汤
中图分类号：5!6#4# 文献标识码：7
文章编号：(’8!.%1（!#）%8.!8(
! 材料
(4( 实验动物 同龄健康雌性,-大白鼠.只，体重&!#9(#)2，
饲以常规大白鼠饲料。&动物及饲料提供单位：云南省昆明医学
院实验动物中心)
(4!实验药品
(4!4( 调坤汤煎液 当归.2，丹参.2，熟地(#2，补骨脂!2，仙
灵脾.2，仙茅!2，赤芍(#2，川芎(#2，菟丝子!2，女贞子(#2，
旱连草(2，生黄芪.2，香附(2，枸杞子!2，紫河车(2，甘草
(2等，加冷水(#/0浸泡!/:;，武火煎沸后改用文火煎
%/:;，共煎!次，再将!次煎液混合后浓缩成(/0，使每毫升
药液含原生药.2。将部分药液进一步稀释成每毫升药液含原生
药!2的调坤汤煎液稀释液。&药物提供单位：本院中药房)
(4!4! 试剂 性激素防免药盒：中国医学科学院核医学技术中
心、协和医药科技有限公司提供。批号：<(1#!$
# 实验方法
!4( 动物分组及给药
!4(4( 动物分组 动物先常规喂养(周，然后随机分为.组，空
白对照组、高剂量给药组、低剂量给药组，每组(只。
!4(4! 给药 空白对照组不用任何药物，常规饲养。高剂量给
药组及低剂量给药组每日上午1时给药，高剂量给药组每次给
调坤汤煎液./0&相当于含原生药12)，低剂量给药组每次给调
坤汤煎液稀释液./0&相当于含原生药$2)，每日给药(次，共(
天&约!个生理周期)，饲养同空白对照组。
!4! 观察指标及方法 最后(次给药!%=后，采用开胸直接心脏
取血法取血，测定血清雌二醇&*!)、孕酮&+)等性激素水平，皆采
用放射免疫法测定。
!4. 统计学方法 均采用组间> 检验。
$ 结果
.4( 调坤汤对雌性大鼠*!的影响作用 经药物治疗，低浓度给药
组和高浓度给药组大鼠血清*!升高或明显升高&+ 34#、+ 34()。
.4! 对雌性大鼠+的性激素样作用 经药物治疗低浓度给药组
和高浓度给药组大鼠血清+明显升高&+ 34()。
.4. 低浓度给药组和高浓度给药组大鼠!组比较*!和+差异无显
著性 见表(。
表( 各组血清*! +测定结果
; *!&?2% /0) +&;2% /0)
空白对照组 ( .!4#9!%4% %!4619%!4!
高剂量给药组 ( ’(4!9%.4!6 ’64(69!64’’
低剂量给药组 ( #646.9!’4’. $64$%9.46’
% 讨论
卵巢是女性重要的内分泌器官，从青春期开始卵巢可分
泌*!、+等激素，维持女性正常生理功能。%岁以后卵巢功能逐
渐衰退，体内卵巢激素水平下降，主要是雌激素水平下降，从
而导致闭经、围绝经期综合征等症状出现，并出现一些远期并
发症，心血管疾病发病率明显上升、骨质疏松等。调坤汤对*!、+
的升高作用，可证明本方对卵巢功能具有调节的作用，可刺激
颗粒细胞分泌*!、+，而这种中草药引发性激素样的作用与激素
替代疗法使用的化学药物有本质的区别。可避免雌激素制剂
引起的副作用。方中当归、熟地、补骨脂、仙灵脾、仙茅、菟丝
子、女贞子、旱莲草、黄芪、枸杞、紫河车均为补肾填精之品，能
促进卵巢发育、增强卵巢功能，类似内分泌激素作用，提高激
素含量。丹参、川芎、香附、赤芍，活血化瘀增强细胞代谢作用，
改善血液流变性。因此，调坤汤的性激素样作用可治疗闭经、
更年期综合征、不孕、卵巢功能早衰者，属肾虚者疗效较佳。
（收稿日期：!#8#8(。）
进行含量测定，其平均提取率为4!(%%@A5,-B!4!(@。
$ 小结与讨论
,C*8DE!萃取滇丹参与常规相比有明显的优势，提取率增
加了4!(%@，且工艺稳定。笔者在考察其降解过程时亦发现，
在减压（’#F）条件下，,C*8DE!萃取液其降解较常规提取液
缓慢。
在提取物的杂质含量上相比较，常规醇提液在用氯仿与
水萃取后其水溶性成分杂质较多，水溶性成分颜色较深，提示
其提取出较多水溶性色素及其它成分；而,C*8 DE!萃取所需
溶剂量仅为常规提取的(% $左右，萃取液较澄清，无需过滤可
以测定含量及直接投料用于生产。
参考文献：
&!’ 中国药典委员会4中国药典（一部）GHI4北京：化学工业出版社，
!4#(6J#(14
G!I 侯安国，梁晓原，李树帜，等4正交实验优选复方丹参片1#@醇提工
艺研究GKI4云南中医学院学报（增刊），!，!.4
G.I 邹节明，梁芳琳，吴广雄，等4DE!超临界流体技术应用于中药有效
成分萃取的实验研究GKI4中国中药杂志，!.，!6（#）：%(.J%(’4
G%I 李迎春，曾健青，刘莉玫，等4丹参中.种丹参酮的超临界二氧化碳
萃取及液相色谱分析GKI4色谱，!!，!（(）：%J%!4
（收稿日期：!#8!8!6。）
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.!
云 南 中 医 中 药 杂 志 !#年第 !$卷第 %期
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V6016J7 O6K:M:76)
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