全 文 ：第 11 卷 第 22 期 2011 年 8 月
1671—1815(2011)22-5394-03
科 学 技 术 与 工 程
Science Technology and Engineering
Vol. 11 No. 22 Aug. 2011
 2011 Sci. Tech. Engng.
医药卫生
白背叶黄酮化合物 QB3
对人肿瘤细胞增殖的抑制作用
黄丽贞 郑作文* 唐云丽 罗丽萍
(广西中医学院，南宁 530001)
摘 要 为研究白背叶黄酮化合物 QB3(芹菜素-7-O-β-D-(6″-反式-对-香豆酰基)-葡萄糖苷)对人肿瘤细胞增殖的抑制作用，
采用四氮唑盐还原法(MTT)评价 QB3 体外对卵巢癌 Skov3、Cne—2z细胞增殖的影响。结果 QB3 在浓度为 25、50μg /mL时对
卵巢癌 Skov3 细胞有明显的抑制作用(P ＜ 0． 05)，其 IC50为 167． 79 μg /mL;QB3 在浓度为 50 μg /mL时对 Cne—2z细胞有明显
的抑制作用(P ＜ 0． 05)，其 IC50为 126． 63 μg /mL。说明 QB3 对 Skov3、Cne—2z细胞增殖有明显抑制作用。
关键词 白背叶 黄酮化合物 MTT 抗肿瘤
中图法分类号 R285. 5; 文献标志码 B
2011 年 4 月 25 日收到 广西科学基金项目(桂科基 0832007)、
广西中医学院课题(P2009033)资助
第一作者简介:黄丽贞(1982—) ，广西南宁人，助教，硕士学位，研
究方向:中药药效筛选。E-mail:88011457@ qq． com。
* 通信作者简介:郑作文(1957—) ，山东沂源人，教授，硕士学位，研
究方向:中草药抗肿瘤研究。
白背叶为大戟科野桐属植物白背叶(Mallotus
apelta(Lour. )muell. -Arg. )的干燥叶，为广西民间常
用草药，别名白鹤叶、白面戟、白面风、白桃叶。其
味微苦、涩，性平。其叶子具有清热、解毒、祛湿、止
血的功效［1］。本研究对白背叶黄酮类成分进行系
统地提取分离所获得的白背叶黄酮类化合物 QB3
进行抗肿瘤活性筛选的研究，现报道如下。
1 材料与仪器
1． 1 药物
白背叶黄酮化合物 QB3 由广西中医学院中化
教研室提取分离，经鉴定 QB3 为 5，4’-二羟基-7-葡
萄糖(4-羟基-苯丙酰)苷，顺柏(山东罗欣药业有限
公司，09060701)。
1． 2 肿瘤细胞株
本实验所用细胞株均购自南京凯基生物有限
公司。
1． 3 试剂
RPMI—1640 干粉(美国 Gibco公司产品) ;胎牛
血清;四甲基二氮唑蓝(北京拜尔迪生物公司分
装) ;二甲基亚砜(博大泰克公司产品) ;0． 25%胰蛋
白酶(美国 Hyclone Lab公司产品)。
1． 4 仪器
ST—360 酶标仪(上海科华实验系统有限公
司) ;二氧化碳培养箱(美国 ThermoForma 公司) ;
DLF560 型超净工作台(荷兰 clear Air Technick bv
公司) ;微量移液器(法国 Pipetman公司) ;十分之一
电子天平(德国赛多利斯公司)。
2 方法
2． 1 肿瘤细胞培养
卵巢癌 SKOV3、CNE—2Z 细胞均用含 5%胎牛
血清的 RPMI—1640 完全培养液，于 37 ℃ 5% CO2
培养箱培养，取对数生长期细胞用于实验。
2． 2 MTT法测定
将 SKOV3、CNE—2Z 细胞用含 5%胎牛血清的
RPMI—1640 培养液，制成单细胞悬液。将细胞悬
液(1 × 104 /mL)接种到 96 孔板，每孔 200 mL /孔，设
细胞对照组、顺柏阳性对照组(20 μg /mL)、药物组，
于 37 ℃ 5% CO2 培养箱培养 24 h。弃上清液，加入
各药物，QB3 设 5 个浓度，分别为 3． 13、6． 25、12． 5、
25、50 μg /mL，每浓度 3 个复孔，200 mL/孔，继续培养
48 h。每孔加入生理盐水配制的5 mg /mL MTT 10 μL，
继续培养 4 h，弃去上清，加入二甲基亚砜 150 μL，
振荡 10 min，于 490 nm波长处，用酶标仪测 OD值。
计算抑制率，用对数回归方程求出半数抑制浓度
IC50值。
肿瘤细胞生长抑制率按以下公式计算。
肿瘤细胞生长抑制率(%)= (1 － 实验组 OD
平均值 /对照组 OD平均值)× 100%。
3 结果
见表 1 ～表 2，QB3 在浓度为 25、50 μg /mL时对
SKOV3 有明显的抑制作用(P ＜ 0． 05) ，其 IC50为
167． 79 μg /mL。QB3 在浓度为 50 μg /mL 时对
CNE—2Z有明显的抑制作用(P ＜ 0． 05) ，其 IC50为
126． 63 μg /mL。表明 QB3 在体外对 SKOV3、CNE—
2Z细胞有抗肿瘤作用。
表 1 QB3 对 SKOV3 细胞增殖的抑制作用
药物浓度
/(μg·mL －1)
OD值
抑制率
/(%)
IC50
/(μg·mL －1)
— 0． 49 ± 0． 02 —
20 0． 09 ± 0． 03＊＊ 81． 84
50 0． 43 ± 0． 00* 12． 11
25 0． 41 ± 0． 04* 15． 65
12． 5 0． 48 ± 0． 02 1． 43 167． 79
6． 25 0． 48 ± 0． 04 1． 84
3． 13 0． 49 ± 0． 03 － 0． 27
注:与细胞对照组比较，＊＊P ＜ 0． 01，* P ＜ 0． 05，n = 3。
表 2 QB3 对 CNE—2Z细胞增殖的抑制作用
药物浓度
/(μg·mL －1)
OD值
抑制率
/%
IC50
/(μg·mL －1)
— 0． 52 ± 0． 04 —
20 0． 17 ± 0． 02＊＊ 67． 02
50 0． 42 ± 0． 00* 18． 53
25 0． 49 ± 0． 01 5． 36
12． 5 0． 53 ± 0． 02 － 2． 39 126． 63
6． 25 0． 52 ± 0． 03 － 1． 61
3． 13 0． 51 ± 0． 03 1． 03
注:与细胞对照组比较，＊＊P ＜ 0． 01，* P ＜ 0． 05，n = 3。
4 讨论
癌症是人类最主要的死亡原因之一，治疗难度
极大。我国癌症引起的死亡率在所有病因中占
17． 9%，居第 2 位，且发病率呈上升趋势［2］。肿瘤治
疗仍然是医药领域无法攻克的难关，目前并在相当
长的一段时期内，传统细胞毒性药物仍将是肿瘤药
物治疗的主体。细胞毒性药物的主要缺陷是对实
体瘤疗效差，不良反应大，易产生耐药性等。天然
中草药具有毒性低，来源广泛等优点，因此从天然
产物(植物、海洋生物等)中寻找新的有效的抗恶性
肿瘤成分仍是目前的研究趋势。
目前抗肿瘤活性物质筛选多采用 MTT 法、SRB
法、集落形成法、台盼兰染色法及生长曲线法等。
其中 MTT法最为常用，其原理为活细胞线粒体中的
琥珀酸脱氢酶能使外源性的 MTT 还原为难溶性的
蓝紫色结晶物甲臜，并沉积在细胞中，而死细胞则
无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的甲臜，用酶
联免疫检测仪在 490 nm波长处测定其吸光值，可间
接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT 结
晶物形成的量与细胞数成正比，其特点是灵敏度
高、重复性好、操作简便与其他检测细胞活性的方
法有良好的相关性。MTT 比色法长久以来被用于
人类各种肿瘤细胞药敏试验［3—5］，至今此方法仍然
被很多实验室采用作为肿瘤细胞以及其它细胞系
体［6］外药敏检测的手段。
本实验采用 MTT 法观察了白背叶的黄酮类化
593522 期 黄丽贞，等:白背叶黄酮化合物 QB3 对人肿瘤细胞增殖的抑制作用
合物 QB3 对卵巢癌 SKOV3、鼻咽癌 CNE—2Z 细胞
的抑制作用。结果显示，提取物 QB3 对卵巢癌、鼻
咽癌胞株的生长有抑制作用。本实验为进一步将
白背叶开发成一个新的抗肿瘤药物提供了初步的
依据，但其体内抗肿瘤及其机制仍有待进一步研究。
参 考 文 献
1 国家中医药管理局《中华本草》编委会．中华本草 (第 4 卷)． 上
海:上海科学技术出版社，1999:827—828
2 赖春丽，黄婉锋，赖小平，等．抗肿瘤中药新药开发探讨．中药材，
2003;26(9) :677—680
3 Carmichael J，Mitchell J B，DeGraffW G，et al． Chemosensitivity
testing of human lung cancer cell lines using the MTT assay． British
Journal of Cancer，1988;57 (6) :540—547
4 SargentJ M，TaylorC G． Appraisal of the MTT assay as a rapid test of
chemosensitivity in acute myeloid leukaemia． British Journal of Canc-
er，1989;60(2) :206—210
5 唐亚辉，马 葵，韩居然，等． MTT药物敏感试验在指导胃癌及原
发肝癌化疗中的作用．肿瘤防治研究，2001;28 (1) :37—38
6 Rotter B A，Thompson B K，Clarkin S，et al． Rapid colorimetric bio-
assay for screeningof fusarium mycotoxins． Natural Toxins，1993;1
(5) :303—307
The Proliferation Inhibition of Flavonoids Extracted QB3 from
Mallotus apelta on Human Cancers
HUANG Li-zhen，ZHENG Zuo-wen，TANG Yun-li，LUO Li-ping
(Guangxi TCM University，Nanning 530001，P． R． China)
［Abstract］ To investigate the proliferation inhibition of Flavonoids extract QB3 (Apigenin-7-O-β-D-(6″-p-cou-
mayl)-glucoside)from Mallotus apelta on Human tumor proliferation，MTT assay was employed to determine the an-
ti-tumor effect of QB3 in SKOV3 and CNE—2Z tumor cell lines． QB3 at 25 μg /mL and 50 μg /mL inhibited hu-
man ovarian cancer SKOV3 cells significantly (P ＜ 0． 05) ，and 50% Inhibiting Concentration(IC50)at 167． 79
μg /mL on SKOV3 cells． QB3 at 50 μg /mL inhibited human nasopharygeal carcinoma CNE—2Z cells significantly
(P ＜ 0． 05) ，and IC50of QB3 on CNE—2Z cells was 126． 63 μg /mL． conclused that QB3 can effectively inhibit
the proliferation of SKOV3 and CNE—2Z cell lines．
［Key words］ Mallotus apelta flavonoids MTT anti-tumor
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