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刺芫荽水提液中总酚酸含量的测定



全 文 :广 东 化 工 2015年 第 5期
· 136 · www.gdchem.com 第 42卷总第 295期
刺芫荽水提液中总酚酸含量的测定
翟锐锐,付煜荣,艾朝晖,陈丽珍,周丹
(海南医学院,海南 海口 571199)
[摘 要]目的:测定刺芫荽水提液中总酚酸(TPA)的含量。方法:总酚酸的含量测定采用可见分光光度法,以没食子酸为对照品,以 0.6 %
FeCl3~0.9 % K3[Fe(CN)6](1∶0.9)混合液为显色剂,在 720 nm波长处进行测定。结果:分光光度法测定总酚酸在所试浓度范围内(0.224~1.120 μg/mL)
线性关系良好,r=0.9996。总酚酸的平均回收率为 97.3 %,RSD为 1.7 %。结论:本法简单快捷,重现性好,可作为刺芫荽总酚酸的质控方法。
[关键词]刺芫荽;总酚酸;分光光度法
[中图分类号 O65 [文献标识码]A [文章编号]1007-1865(2015)05-0136-01
Determination of Total Phenolic Acid in Eryngium foetidum Linn
Zhai Ruirui, Fu Yurong, Ai Zhaohui, Chen Lizhen, Zhou Dan
( Hainan Medical College, Haikou 571199, China)
Abstract: Objective: To determine total phenolic acid in Eryngium foetidum Linn. Methods: Total phenolic acid was analyzed by spectrophotometry at 720 nm.
Gallic acid as a reference, the color-developing agent was the mixture solution of 0.6 % FeCl3~0.9 % K3[Fe(CN)6](1∶ 0.9). Results: Calibration graphs were
constructed in the range of 0.224~1.120 µg/mL for to tal phenolic acid, r=0.9996. The averager ecovery was 97.3 % for total phenolic acid. The RSD of the method
was 1.7 %. Conclusion: The method was proved to be fast, feasible, simple, and can be used for quality control for gallic acid and total phenolic acid in Eryngium
foetidum Linn
Keywords: eryngium foetidum Linn;total phenolic Acid;spectrophotometry
刺芫荽又称洋芫荽、野芫荽、假芫荽、大叶芫荽等。为伞形
科刺芹属多年生草本植物。主要分布于我国云南、广东、广西。
具有芳香健胃,行气止痛,驱风解表等功能。用于治疗感冒寒咳,
哮喘,胃气痛,产后出血,跌打损伤,肠炎腹泻,消化不良,胸
痛、麻疹内陷,气管炎,急性传染性肝炎及蛇咬伤等症[1,2]。该植
物中含有没食子酸成分,据文献报道 [3],没食子酸具有抗菌、抗
病毒和抗肿瘤作用,因此测定刺芫荽中总酚酸含量对其质量品质
的评价以及进行深人研究药物作用机理具有重要的意义。
1 仪器与材料
1.1 仪器
722型分光光度计(上海精密科学仪器有限公司),1/10万电子
分析天平(上海精密科学仪器有限公司),电热恒温干燥箱(长沙),
粉碎机
1.2 材料
刺芫荽有海南医学院退休教师韩民元老师在海口府城地区种
植,经海南医学院中药学教研室曾念开老师鉴定。新鲜全草经去
离子水漂洗(洗去泥沙与污物),于干燥箱中 50℃干燥,粉碎,置
干燥器中备用。
1.3 试剂
没食子酸对照品购自中国药品生物制品检定所,十二烷基磺
酸钠(SDS),无水乙醇,三氯化铁,铁氰化钾,浓盐酸均为分析纯。
实验用水为二次蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 分析方法
取适量待测样品置于 25 mL比色管,加无水乙醇至 5 mL,加
0.3 %十二烷基磺酸钠 2 mL及 0.6 % FeCl3~0.9 % K3[Fe(CN)6](1∶
0.9)混合溶液 1 mL,混匀,在暗处放置 5 min,加 0.1 mol·mL-1 HCl
至刻度,混匀,在暗处放置 20 min。用 722分光光度计,以显色
剂为空白,在 720 nm波长处测定吸光度 A[3]。
2.2 对照品溶液的制备及标准曲线的绘制
精密称取干燥至恒重的没食子酸标准品 1.12 mg,用无水乙醇
溶解,定容至 50.00 mL配成 22.4 μg/mL没食子酸溶液储备液。分
别取取对照品溶液 0.25 mL,0.50 mL,0.75 mL,1.00 mL,1.25 mL,
1.50 mL置于 25 mL比色管中,按“2.1”项下显色并测定吸光度。
记录吸光度 A,以 A为纵坐标,以含量 C为横坐标,作图,得没
食子酸标准曲线。经统计学处理,得回归方程为 :
A=0.6897C+0.0121,r=0.9996(C:μg·mL-1)。结果表明没食子酸含
量在 0.224~1.12 μg·mL-1范围内,呈现良好线性关系。
2.3 供试液的制备
精密称定刺芫荽粉末 0.2 g于 30 mL圆底烧瓶中,加入 15 mL
蒸馏水浸泡过夜,小火微沸提取 2次(40 min,30 min)。吸取上清
液,合并两次提取液,定容至 50.00 mL,摇匀备用。
2.4 含量分析
取各提取液 0.50 mL,按“2.1”项下显色并测定,并根据标
准曲线计算总酚酸含量,结果见表 1。
表 1 样品测定结果(n=5)
Tab.1 The determination results
种类 含量/(mg·g-1) x ±s RSD/%
刺芫荽
6.03
6.10±0.11 1.8
6.25
6.03
6.17
6.01
2.5 精密度试验
精密称定 0.2 g刺芫荽粉末,按“2.3供试液的制备”项下进
行提取,同“2.1分析方法”项下进行显色和测定,RSD为 0.17 %,
(n=6),实验结果表明该方法精密度良好。
2.6 稳定性试验
精密称定 0.2 g刺芫荽粉末,按“2.3供试液的制备”项下进
行提取,同“2.1分析方法”项下进行显色和测定,每隔 5 min测
定 1次,共测定 60 min,RSD为 1.14 %,结果表明样品显色后 60
min内稳定。
2.7 重现性试验
取 0.2 g同一批样品 5份,精密称定,按“2.3供试液的制备”
项下进行提取,同“2.1分析方法”项下进行显色和测定,记录吸
光度 A,经数据处理,计算得样品含量,RSD为 1.8 %,( n=5)。
2.8 回收率实验
取已知总酚酸含量的刺芫荽粉末 6份,精密称定,分别加入
高、中、低量的没食子酸对照品,按“2.3供试液的制备”项下进
行提取制得供试液后,按“2.1分析方法”项下进行显色和测定,
计算没食子酸的回收率,平均回收率为 97.3 %,RSD 为 1.7
%(n=6),结果见表 2。
(下转第 135页)
[收稿日期] 2015-01-05
[基金项目] 海南医学院培育基金,基金编号:HY2014-021
[作者简介] 翟锐锐(1983-),女,河南洛阳人,硕士,主要研究方向为药用植物质量标准。
2015年 第 5期 广 东 化 工
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2.6 测得野生橡子中单宁酸含量
称取 8份摘取浙江临安地区的新鲜野生橡籽,按照 1.3.1节的
方法对野生橡进行前处理和提取单宁酸,接着利用本实验方法测
定提取液中单宁酸的含量,利用(1)中的关系式计算得出橡籽中单
宁酸的含量,实验结果如表 3。由表 3中得知,测得橡籽中单宁
酸的平均含量为 8.86 %,且 RSD为 1.13 %,小于 5 %,说明测量
的数据结果可信度非常高,同时也表明了临安地区野生橡籽中单
宁酸含量比较均匀。
表 3 野生橡籽中单宁酸含量的测定
Tab.3 detemination of annic acid content in wild acorn
实验编号 均值/% RSD
1 2 3 4 5 6 7 8
橡籽中单宁酸
质量分数/%
8.89 8.92 9.01 8.67 8.85 8.79 8.87 8.91 8.86 1.13
3 结论
(1)用 EDTA络合滴定法测定溶液中单宁酸的含量,具有简单
快速、稳定性强、准确度和精密度都非常高,能够满足橡籽食品
生产企业对测定单宁酸方法的需求。
(2)用 EDTA络合滴定法测定 100 mL已知标准质量浓度 10 %
的单宁酸溶液的实验结果表明,测定的溶液的 pH应控制≤4.0,
1.0000 mol/L醋酸锌添加量至少为 6 mL,在滴定终点时防止指示
剂延迟或者提前颜色的突变。
(3)分析方法的加标回收率为 96.85 %,RSD为 1.05 %,准确
度和精确度试验的 RSD分别为 1.05 %、0.46 %,表明了分析方法
重复性好,数据结果可信性度非常高。
(4)通过利用EDTA络合滴定法测得浙江临安地区野生橡子的
单宁酸平均含量为 8.86 %,且 RSD为 1.13 %,也表明了此地区
橡籽中的单宁酸含量比较均匀。
参考文献
[1]白坤,赵智星.橡子资源的开发和食品加工技术[J].现代科技,2005,
5:51-52.
[2]黄利群,陈四发,刘艳萍.橡子研究概况.氨基酸和生物资源[J].1998,
20(1):51-55.
[3]张志健,王勇.我囯橡子资源开发利用现状与对策[J].氨基酸和生物资
源,2009,31(3):10-14.
[4]陈宗元,刘秀湘,王国兴.橡子仁的综合利用[J].林产化工通讯,1997,
(3):33-34.
[5]魏练平,毛非鸿,蒋立科.橡子营养成分及其加工利用的初步研究[J].
安徽农学通报,2007.
[6]何瑞国,汪康民,王玉莲.野生经济植物资源橡子仁可利用价值的研究
[J].应用生态学报,2004,11(2):196-198.
[7]王书园,俞凌云,朱云.单宁的分析研究现状[J].开发与研究,2008,
25(5):16-19.
(本文文献格式:马森强,向少蓉.EDTA 络合滴定法测定橡籽中
单宁酸的含量[J].广东化工,2015,42(5):133-135)
(上接第 136页)
3 讨论
(1)本文运用分光光度法测定刺芫荽总酚酸含量为 6.10 mg/g,
该方法简单,重现性好,可作为刺芫荽的质量控制及定量分析,
为以后进一步研究刺芫荽的药用价值提供依据。
(2)显色剂 0.6 % FeCl3~0.9 % K3[Fe(CN)6](1∶0.9)混合液不稳
定,要临用前配制,否则将会影响实验结果的准确性。
表 2 回收率测定结果(n=6)
Tab.2 The recovery test results
序号 样品重/mg 样品含量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率(%) x RSD/%
1 101.7 0.62 0.74 1.34 97.3
97.3 1.7
2 100.0 0.61 0.73 1.32 97.3
3 100.5 0.61 0.61 1.22 100.0
4 101.0 0.62 0.62 1.21 95.2
5 100.4 0.61 0.49 1.09 98.0
6 101.8 0.62 0.50 1.10 96.0
参考文献
[1]全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编[M].下册.第一版.北京:
人民卫生出版,1992:1631.
[2]叶碧波,陈再智,陈小娟,等.刺芫荽抗菌作用的实验研究[J].中国中
医药科技,2000,7(4):224.
[3]付煜荣,陈桂敏.景天三七总酚酸提取条件及含量分析研究[J].河北北
方学院学报,2005,21(6):25.
(本文文献格式:翟锐锐,付煜荣,艾朝晖,等.刺芫荽水提液中
总酚酸含量的测定[J].广东化工,2015,42(5):136)