全 文 ：药 物 研 究
The medicine study
作者简介:丁丽娜 (1981) ，女，汉族，硕士学位，主要从事天然药物化学成分及质量研究。
通讯作者:曾富佳 (1986 －) ，女，汉族，硕士学位，主要从事天然药物生物活性研究。
短柄南蛇藤不同部位的总黄酮含量测定
丁丽娜1 刘 亮1 陈东林1 高玉琼2 刘建华2 曾富佳1
1． 遵义医药高等专科学校，贵州 遵义 563002;2． 贵州省生物基地，贵州 贵阳 550002
【摘 要】 目的:建立短柄南蛇藤总黄酮含量测定的方法，对短柄南蛇藤各部位总黄酮含量进行对比研究。方法:以芦丁为对照品，
超声波提取和三氯化铝法显色，采用紫外分光光度法在 417nm处测定短柄南蛇藤不同部位的总黄酮含量。结果:芦丁的线性范围为 2. 40 ～
25. 16μg /mL，回归方程 A =0. 0263C + 0. 0384，r = 0. 9996 (n = 6) ;平均加样回收率为 101. 2%，RSD = 2. 22%。不同部位总黄酮含量由高
至低依次为:种子 ＞叶 ＞根皮 ＞果壳 ＞假种皮 ＞茎。结论:该文首次测定短柄南蛇藤总黄酮含量，并对不同部位总黄酮含量进行对比研究。
【关键词】 短柄南蛇藤;总黄酮;含量测定;紫外分光光度法
【中图分类号】R927. 2 【文献标识码】A 【文章编号】1007 － 8517 (2012)15 － 0056 － 02
短柄南蛇藤 (Celastrus rosthornianus Loes)为卫矛科南
蛇藤属植物，分布于我国大部分地区，其根、茎叶、果实
等均可入药，根及茎叶可治疗治风湿疼痛，跌打损伤，疝
气痛，疮疡肿毒，带状疱疹，湿疹，毒蛇咬伤;果实可宁
心安神，主治失眠多梦［1］。该植物主要有倍半萜、三萜及
其衍生物、生物碱、黄酮类化合物等，黄酮化合物主要存
在于南蛇藤属植物的叶、翅中，是抗炎、抗氧化活性成
分［2 － 6］。目前关于短柄南蛇藤总黄酮含量测定未见报道。
根据文献资料，短柄南蛇藤分不同的部位入药，其不同部
位的功效、剂量、毒性都有一定的差别。本文采用紫外分
光光度法，以芦丁为对照品对短柄南蛇藤中总黄酮的含量
测定进行了方法学的考察，并对不同部位的总黄酮含量进
行对比研究，为短柄南蛇藤的进一步开发利用提供参考数
据，充分发挥该植物的药用潜力。
1 仪器和试药
SYFM －8Ⅱ型微粉碎机 (济南松岳机器有限责任公
司) ;202 － 00 台式电热恒温干燥箱 (中国天津泰斯特仪器
有限公司) ;AL － 204 型电子天平 (上海梅特勒 －托得多仪
器有限公司) ;KQ － 500DE 型医用超声波清洗机 (昆山超
声仪器有限公司) ;TU － 1810 紫外可见分光光度计 (北京
普析通用仪器有限责任公司)。
短柄南蛇藤 (采自贵州镇远地区，经贵阳中医学院孙
庆文老师鉴定为卫矛科南蛇藤属植物短柄南蛇藤 Celastrus
rosthornianus Loes)。样品按不同部位分离，得到根皮、茎、
叶、果壳、假种皮、种子六个部位，自然晾干，粉碎过 80
目筛，得到短柄南蛇藤不同部位的粉末，干燥器内保存备
用。芦丁对照品 (中国药品生物制品检定所，100080 －
200306) ，实验中所使用的试剂均为国产分析纯试剂，重蒸
水为本实验室自制。
2 方法与结果
2. 1 供试品溶液的制备
分别精密称取短柄南蛇藤不同部位的干燥粉末 2g，置
于锥形瓶中，加入 30mL60%乙醇溶液，浸润后，超声提取
60分钟，过滤，滤液置 100mL容量瓶中，用 60%的乙醇定
容，摇匀，得供试品溶液，备用。
2. 2 对照品溶液的制备
精密称取在 105℃干燥至恒重的芦丁对照品 0. 0150g于
50mL容量瓶中，用 30%乙醇溶解定容至刻度，摇匀，作为
对照品溶液 (每 1mL含芦丁 0. 3mg)。
2. 3 检测波长的选择
分别精密量取供试品溶液、对照品溶液各 5mL 分别置
于 25mL容量瓶中，加入 1ml 0. 5mol /L 的三氯化铝溶液，
摇匀，放置 15min，用 PH = 5. 8 的 NaAc － HAc 缓冲溶液定
容，摇匀，超声处理 5min。在 200 ～ 600nm波长范围内扫描
吸收曲线 (以不加黄酮样品的试剂空白做参比) ，芦丁标准
溶液、供试品溶液显色后都在 417nm 处有最大吸收，故以
417nm波长为测定波长。
2. 4 标准曲线的绘制［7］
分别精密量取 0. 3mg /mL 芦丁对照品溶液 0. 2mL、
0. 5mL、1mL、1. 5mL、2mL、2. 5mL于 25mL 容量瓶中，分
别加入 1mL0. 5mol /L的 AlCl3 溶液，摇匀，放置 15min，用
PH = 5. 8 的 NaAc － HAc 缓冲溶液定容，摇匀，超声振荡
5min后以 PH = 5. 8 的 NaAc － HAc 缓冲溶液为参比，于
417nm处测定吸光度。结果如图 1，芦丁回归方程为 A =
0. 0263C + 0. 0384，r = 0. 9996 (其中 C为芦丁浓度 μg /mL ;
A为吸光度) ，在 2. 40 ～ 25. 16μg /mL浓度范围内呈线性。
图 1 三氯化铝显色后芦丁的标准曲线
2. 5 稳定性试验
精密吸取供试品溶液 5mL，按“2. 4”项下操作测定吸
光度，每隔 5 分钟测一次，共 6 次，RSD 为 1. 61%，在
30min内样品溶液的稳定性较好，时间延长，样品吸收度下
降较多，故选择测定时间在 30min以内。
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2. 6 精密度试验
精密量取样品液 5mL6 份于 25mL容量瓶中，按“2. 4”
项下操作测定吸光度，总黄酮含量 RSD为 1. 21%，表明该
法的精密度较好。
2. 7 重现性试验
精密称取同批果壳粉末 2. 0g，平行 6 份，按照“2. 1”
项下制备供试品溶液，按“2. 4”项下操作测定吸光度，总
黄酮含量 RSD为 2. 35%，证明该方法的重现性较好。
2. 8 加标回收率试验
精密称取短柄南蛇藤果壳粉末 2. 0g，平行 9 份，按
“2. 1”项下处理，精密量取 5mL 的样品溶液，分别加入新
配置不同量的芦丁标准品 (0. 3mg /mL) (每个加标量级别 3
个平行样) ，摇匀，按“2. 4”项下操作测定吸光度，总黄
酮含量平均回收率为 101. 2%，RSD 为 2. 22%，测得结果
均在 95% ～ 105% 之间，说明总黄酮的提取和检测方法
可行。
表 1 加标回收率试验结果
试验号
样品总黄酮
含量 (ug /mL)
加标量
(ug /mL)
测得量
(ug /mL)
回收率
/ (%)
平均回收
率 (%)
RSD
/ (%)
1 11. 70 6 18. 64 105. 0
2 11. 88 6 18. 56 103. 8
3 11. 52 6 18. 08 103. 2
4 11. 69 12 25. 46 103. 5
5 11. 99 12 23. 42 97. 62
6 11. 57 12 24. 50 103. 9
7 11. 83 18 29. 10 97. 55
8 11. 73 18 28. 65 96. 36
9 11. 90 18 28. 76 96. 19
101. 2 2. 22
2. 9 样品的含量测定
按“2. 4”项下对“2. 1”项下制备的各部位供试品溶
液进行测定，计算总黄酮含量，结果见表 2。不同部位总黄
酮含量由高至低依次为:种子 ＞ 叶 ＞ 根皮 ＞ 果壳 ＞ 种皮
＞茎。
表 2 不同部位总黄酮含量测定结果 (mg /g，X =∑Xi /n，n = 3)
叶
(mg /g)
茎
(mg /g)
根皮
(mg /g)
果壳
(mg /g)
种皮
(mg /g)
种子
(mg /g)
8. 76 1. 67 5. 18 3. 74 3. 62 10. 79
3 小结
本实验以芦丁为对照品，采用超声波提取和三氯化铝
法显色，对短柄南蛇藤中总黄酮的含量测定进行了方法学
考察，实验过程中严格控制时间，显色后 30min 内测定。
本法操作简单，精密度高，重复性和回收率效果较好，测
得的总黄酮含量也较为合理，为短柄南蛇藤的质量控制提
供了新的有效手段。实验结果显示，短柄南蛇藤六个不同
部位所含的总黄酮不同，种子中的总黄酮含量最高，其次
是叶、根皮、果壳、种皮，茎中含量较少，为该药材的深
度开发和利用提供了参考依据。
参考文献
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科学技术出版社，1999，5:175 ～ 176．
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酮 ［J］． 分析实验室，2006，25 (12) :91 － 94．
(收稿日期:2012. 05. 18
檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾
)
(上接第 51 页)
表 1 盐酸小檗碱加样回收率试验结果
序号
称重
(g)
原有量
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
加样回
收率 (%)
平均值
(%)
RSD
(%)
1 1. 0002 2. 631 3. 045 5. 631 98. 5
2 1. 0005 2. 631 3. 045 5. 635 98. 6
3 0. 9998 2. 629 3. 045 5. 608 97. 8
4 1. 0003 2. 631 3. 045 5. 606 97. 7
5 0. 9996 2. 628 3. 045 5. 645 99. 1
6 1. 0008 2. 632 3. 045 5. 558 96. 1
97. 97 1. 08
2. 4. 8 样品的测定
精密称取三批妇炎散，按供试品的制备方法制备，按
上述的色谱条件，测定的含量，结果见表 2。
表 2 栀龙散中栀子苷含量
批号 盐酸小檗碱 (mg·g －1) 平均值 (mg·g －1)RSD (%)
20110913 2. 65
20110918 2. 71
20110924 2. 61
2. 66 1. 89
3 讨论
本文制剂妇炎散主要用于治疗盆腔炎的治疗，由于处
方中药味较多，其中分别对黄檗、丹参、大黄、姜黄、白
芷和泽兰等药材进行了薄层鉴别研究，但因干扰较大，未
能列入本文的正文中，含量测定选用了黄檗中有效成分盐
酸小檗碱为指标成分，分离效果好，且能很好的反映本方
的均一性和稳定性。
(收稿日期:2012. 05. 23)
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