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凤仙透骨草总黄酮的抑菌活性研究



全 文 :凤仙透骨草总黄酮的抑菌活性研究
卞晓霞1,罗跃娥1,王文洁1,顾媛媛2*
(1.天津医学高等专科学校,天津 300222;
2.黑龙江中医药大学中医药研究院,黑龙江 哈尔滨 150040)
摘 要:目的:分别测定了凤仙透骨草总黄酮提取物对犬小孢子菌和白色念珠菌的抑菌活性。方法:以
达克宁为对照,采用牛津杯法测定抑菌圈直径和最低抑菌浓度。结果:总黄酮提取物对犬小孢子菌和白
色念珠菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为 0. 7813mg /ml、1. 563mg /ml,最低杀菌浓度(MBC)分别为
0. 7813mg /ml、3. 125mg /ml。结论:凤仙透骨草总黄酮提取物对两种菌株均有一定的抑菌活性,其中对
白色念珠菌的活性更为显著。
关键词:凤仙透骨草;总黄酮;抑菌活性
中图分类号:R285 文献标识码:A 文章编号:1002 - 2406(2015)02 - 0012 - 02
Antibacterial Activity of Flavonoids from Impatiens Balsamina L.
BIAN Xiao - xia1,LUO Yue - e1,WANG Wen - jie1,GU Yuan - yuan2*
(1. Tianjin Medical College,Tianjin 300222,China;2. Institute of Traditional Chinese
Medicine,Heilongjiang Universty of Chinese Medicine,Harbin 150040,China)
Abstract:Objective:To study the antibacterial activity of flavonoids from Impatiens balsamina L. for Microspo-
rum canis and Candida albicans. Methods:Take dakening for the comparison,and use oxford plate to deter-
mine the diameter of inhibition zone and the minimal inhibitory concentration. Results:The MIC of total fla-
vonoids to the Microsporum canis and Candida albicans was 0. 7813mg /ml and 1. 563mg /ml,respectively,
and MBC was 0. 7813mg /ml and 3. 125mg /ml,respectively. Conclusion:The total flavonoids from Impatiens
balsamina L. have a certain effect on the two kinds of fungals,but the effect on Candida albicans is more notable.
Key words:Impatiens balsamina L.;Total flavonoids;Antibacterial activity
基金项目:中国中医科学院自主选题项目(No. 2011xycz - 11)
作者简介:卞晓霞(1980 -),女,讲师,主要研究方向:药品质量及天然
药物提取分离。
通讯作者:顾媛媛* (1982 -),女,博士,助理研究员,主要研究方向:中
药复方药效物质基础研究。
收稿日期:2014 - 03 - 19
修回日期:2014 - 04 - 10
凤仙透骨草为凤仙花的干燥茎叶,别名透骨草、凤
仙花梗、指甲草、凤仙草、凤仙花、指甲花等。凤仙透骨
草入药用于风湿痹痛、跌打肿痛、痈肿、鹅掌风、蛇虫咬
伤等[1]。具有祛风除湿、活血、消肿止痛之功效。中
国南北各地均有栽培。黄酮类化合物为凤仙花中主要
的化合物之一[2],黄酮类化合物具有多种功效,如抗
氧化[3],清除自由基,调节血脂,抗癌,抑制真菌活
性[4]等广泛的作用。
1 材料与设备
药材采摘于黑龙江省兰西县郊区,经黑龙江中医
药大学中药资源与开发教研室王振月教授鉴定为凤仙
花科凤仙花属植物凤仙透骨草。犬小孢子菌(Micros-
porum canis),白色念珠菌(Candida albicans),系本院
微生物研究室保存。体积分数为 70%的乙醇。培养
皿,超净工作台,DHP -9162 型电热恒温培养箱(上海
一恒科技有限公司);立式压力蒸汽灭菌器(上海博迅
实业有限公司医疗设备厂)。
2 实验方法
2. 1 培养基配制
1)固体培养基:将葡萄糖 40g,蛋白胨 10g,琼脂
20g以蒸馏水混匀加热,趁热过滤,定容至 1000ml,冷
却即得固体培养基。2)液体培养基:将葡萄糖 8g,蛋
白胨 2g投入到蒸馏水中,加热混匀,定容到 200ml,冷
却即得液体培养基。
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中 医 药 信 息
Information on Traditional Chinese Medicine
2015 年 3 月第 32 卷第 2 期
Vol. 32,No. 2,Mar. 2015
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2. 2 菌悬液的制备
在无菌条件下,用接种环分别挑取一环犬小孢子
菌,白色念珠菌接入研钵中,以少量生理盐水进行研
磨,直至均匀,得到供试菌菌悬液。
2. 3 菌株的活化
在无菌条件下,取 3 ~ 4 滴菌悬液滴入培养皿中,
以涂布棒均匀,放入电热恒温培养箱中,28℃培养
1 周。
2. 4 牛津杯法测定总黄酮的抑菌作用
取活化好的菌株,接种到新铺好的培养基中,以涂
布棒涂匀,将灭菌的牛津杯等距离放入培养皿中,每个
培养皿放置三个重复,将凤仙透骨草总黄酮提取液滴
入牛津杯中,另取两个培养皿,其中一个放入达克宁做
对照,另一个放入空白的生理盐水做对照,于 28℃培
养 1 周后,移去牛津杯,测量抑菌圈直径。
2. 5 最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)的
测定
将凤仙透骨草总黄酮提取液稀释到浓度分别为
100mg /ml、50mg /ml、25mg /ml、12. 5mg /ml、6. 25mg /ml、
3. 125mg /ml、1. 563mg /ml、0. 7813mg /ml、0. 3906mg /ml、
0. 1953mg /ml,备用。挑取少量菌种,以液体培养基研
磨混匀,用移液枪移入 96 孔板,再将配置好的凤仙透
骨草总黄酮提取液浓度从大到小分别移入 96 孔板中,
放入电热恒温培养箱中,28℃培养 1 周,观察真菌生长
情况,以无菌落生长的最小浓度为最低抑菌浓度。将
无菌生长的液体培养基取出一环在培养皿中划线,培
养并观察是否有菌落生长,以无菌生长的最小浓度即
为最低杀菌浓度。
3 结果与分析
3. 1 抑菌圈的测定
凤仙透骨草总黄酮提取液抑菌实验 结果见
表 1。
表 1 凤仙透骨草总黄酮提取液抑菌实验
供试菌 抑菌圈直径(mm)
犬小孢子菌 11
白色念珠菌 14
达克宁对照组 15
生理盐水对照组 -
注:“ -”表示没有抑菌效果或抑菌圈直径小于 8mm。
结果表明,凤仙透骨草总黄酮提取液对犬小孢子
菌和白色念珠菌均有抑制作用,且抑菌效果白色念珠
菌 >犬小孢子菌。
3. 2 凤仙透骨草总黄酮提取液最低抑菌浓度(MIC)
和最低杀菌浓度(MBC)的测定
最低抑菌浓度 MIC的测定如表 2 所示,最低杀菌
浓度如表 3 所示。
表 2 最低抑菌浓度(MIC)的测定
实验号 总黄酮浓度(mg /ml) 白色念珠菌 犬小孢子菌
1 100 - -
2 50 - -
3 25 - -
4 12. 5 - -
5 6. 25 - -
6 3. 125 - -
7 1. 563 - -
8 0. 7813 - +
9 0. 3906 + +
10 0. 1953 + +
注:“ +”表示有菌生长,“ -”表示无菌生长。
由表 2 可知,白色念珠菌的最低抑菌浓度为
0. 7813mg /ml,犬 小 孢 子 菌 的 最 低 抑 菌 浓 度 为
1. 563mg /ml。
表 3 最低杀菌浓度(MBC)的测定
实验号 总黄酮浓度(mg /ml) 白色念珠菌 犬小孢子菌
1 100 - -
2 50 - -
3 25 - -
4 12. 5 - -
5 6. 25 - -
6 3. 125 - -
7 1. 563 - +
8 0. 7813 - +
9 0. 3906 + +
10 0. 1953 + +
注:“ +”表示有菌生长,“ -”表示无菌生长。
由表 3 可知,白色念珠菌的最小杀菌浓度为
0. 7813mg /ml,犬 小 孢 子 菌 的 最 小 杀 菌 浓 度 为
3. 125mg /ml。
4 结论
综上所述,以牛津杯法测定凤仙透骨草总黄酮提
取物对白色念珠菌和犬小孢子菌的抑制作用取得良好
的结果,总黄酮提取物对两种供试菌的生长均有一定
的抑制效果,其中,对白色念珠菌的抑制效果大于犬小
孢子菌。对于真菌的良好抑菌效果,有待于研究总黄
酮提取液对细菌及酵母菌的抑制效果,系统的进行比
较,为以后的药用价值提供基础。
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参考文献:
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739 - 742.
五味子多糖对胰岛素抵抗大鼠脂代谢的影响
井中旭1,滕林1,周海纯1,隋姝婷2,韩雪燕3*
(1.黑龙江中医药大学附属第二医院,黑龙江 哈尔滨 150001;2.黑龙江中医药大学,黑龙江 哈尔滨 150040;
3.黑龙江中医药大学附属第一医院,黑龙江 哈尔滨 150040)
摘 要:目的:通过观测五味子多糖对胰岛素抵抗大鼠血清甘油三酯、总胆固醇及游离脂肪酸水平的影
响,从而说明五味子多糖调节胰岛素抵抗大鼠脂代谢的作用。方法:应用比色法检测胰岛素抵抗大鼠血
清甘油三酯、总胆固醇及游离脂肪酸含量的变化,从而探讨五味子多糖调节胰岛素抵抗大鼠脂代谢的作
用。结果:与模型组比较,五味子多糖组大鼠血清血清甘油三酯、总胆固醇及游离脂肪酸水平明显降低,
差异有统计学意义(P < 0. 05)。结论:五味子多糖明显升高胰岛素抵抗大鼠血清甘油三酯、总胆固醇及
游离脂肪酸水平,说明五味子多糖可能通过调节胰岛素抵抗大鼠脂代谢,从而发挥其改善胰岛素抵抗的
作用。
关键词:胰岛素抵抗;五味子多糖;脂代谢
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1002 - 2406(2015)02 - 0014 - 02
作者简介:井中旭(1983 -),男,助理研究员,主要研究方向:新药研究
与开发。
通讯作者:韩雪燕* (1962 -),女,副主任护师,主要从事护理教育
工作。
收稿日期:2014 - 09 - 02
修回日期:2014 - 10 - 01
胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)是指机体靶器
官或组织对胰岛素生物效应的敏感性降低或丧失而产
生的一系列病理状态,存在于多种疾病之中,严重影响
人们的日常生活及身体健康,因此治疗胰岛素抵抗成
为国内外医疗界研究的热点。中医学认为,其隶属于
“消渴”范畴,病机为“本虚标实”,而气阴两虚为主要
证型,治以益气养阴。
目前,改善胰岛素抵抗的主要药物有二甲双胍、阿
卡波糖、噻唑烷二酮类(Thiazolidine Dione style,TSDs)
药物及血管紧张抑制剂等,虽然临床应用广泛,但长期
服用均有不同的毒副作用。因此,寻找一种安全有效
的新药成为急需解决的问题。
五味子多糖其味酸、甘、温,具有益气生津之功
效[1],本实验前期研究结果表明五味子多糖具有改善
胰岛素抵抗的作用[2 - 4]。本实验通过观察五味子多糖
对胰岛素抵抗大鼠血清甘油三酯、总胆固醇及游离脂
肪酸水平的影响,从而说明五味子多糖调节胰岛素抵
抗大鼠脂代谢的作用,进而探讨五味子干预大鼠胰岛
素抵抗的作用机制。
1 实验材料
1. 1 动物
普通级 Wistar大鼠 40 只,雌雄各半,鼠龄 2 ~ 3 个
月,体质量(180 ± 20)g,由黑龙江中医药大学实验动
物中心提供。动物许可证号:SYXK黑 2011001。
1. 2 仪器 721 分光光度计(上海光学仪器厂)。
1. 3 试剂 甘油三酯试剂盒(中生北控生物科技股
份有限公司);游离脂肪酸试剂盒(南京建成生物工程
研究所);总胆固醇试剂盒(中生北控生物科技股份有
限公司)。
2 实验方法
2. 1 造模与分组
参考本课题组前期实验[2]。
2. 2 指标检测
血清甘油三酯、总胆固醇及游离脂肪酸的含量均
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2015 年 3 月第 32 卷第 2 期
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