全 文 ：表 用于胃泌素受体试验的 8个药理样品及试验结果
序号
61 40
夕 07 .… 5 67 3 89 肠 4
供试样品
姜黄素 (c二~ n )姜黄挥发油
姜黄甲醇提取物
姜黄乙酸乙醋部分
姜黄乙醚提取物
郁金甲醇提取物
郁金乙酸 乙醋部分
郁金乙醚提取物
每 g相当于原生药量。
A R
19 、 53 . 69 生药
19 、 2 5.29 生药
19 、7 4 .39 生药
19 二 1 4 .49 生药
19 、9 2 .19 生药
19 、3 2 . 59 生药
药材及来源
上海试剂三厂 , 批号 921 130
抑制百分率 ( % )
姜黄 ( C . 白刀召在 ) , 四 J
姜黄 ( C . 肠刀乡乙 ) , 四 J
姜黄 ( C . ot 矛醒, ) , 四 J
姜黄 ( c . 扔味, z ) , 四 )
双流
双流
双流
双流
四川双流
四川双流
二 13 . 3 9 生药
黄丝郁金 ( C .
黄丝郁金 ( C .
黄丝郁金 ( C .
勿矛褚闷 ) ,
勿刀却2 ) ,
肠砌翔 ) , 四川双流
活性判断
中等活性
微弱活性
中等活性
显著活性
中等活性
中等活性
中等活性
微弱活性
7
月
0
3 结果与分析
本实验发现 : 姜黄块根及根茎的提取部分的不
同组分均有一定的 ’勺一 Gas tir n 受体特异结合活性 (见
表 ) ,提示姜 黄可能含有 胃泌素受 体激动剂或 拮抗
剂 。 其抑制活性强度有如下大致规律 : 乙酸 乙醋部
分 > 甲醇部分 > 乙醚部分 > 挥发油部分 ;块根 > 根
茎 。 姜黄块根的乙酸乙醋部分显示显著抑制活性 ,
姜黄素则显示具有中等的抑制活性 , 提示姜黄素可
能是姜黄 胃泌素受体抑制活性 的物质基础之一 ,也
提示姜黄素可能不是姜黄胃泌素受体抑制活性的唯
一或主要成分 。
从已有文献分析 ,姜黄可能具有与国外业已发
现的胃泌素受体活性成分完全不同的结构特征 。 进
一步从中筛选分离出可能存在的 胃泌素受体拮体
剂 ,对胃泌素的分子生物学 、 消化性溃疡 、 胃泌素或
胃泌素受体过度表达相关的消化系肿瘤等特征的研
究与防治 ,对探讨芳香健 胃药理的分子机理以及开
发新的胃泌素受体作用特异性药物 ,均具有重要意
义 。 而分离其中可能存在的胃泌素受体激动剂对萎
缩性胃炎和脾虚证等无疑具有广泛的应用前景 。
参 考 文 献
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隅田利彦 , 他 . R eC e p .o r iB ind ng 丛say 法含用 ` “ 忆药用植
物中内 活性成分刃研究 (第二报 ) . 药学杂志 , 19 8 , 8
( 5 )
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一 0 8 一 3 1收稿 )
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白背叶根在肝纤维化动物模型中抗氧化作用的实验研究
第一军医大学中医系 (广州 51 0 51 5) 赵进军 吕志平 王晓东关 张绪富
摘要 目的 :通过大鼠肝纤维化动物模型 , 研究白背叶根防治肝纤维化的作用 以及白背叶根抗氧化能力的研
究 。 方法 :采用 40 % C C甄花生油溶液制备大鼠肝纤维化模型 ,观察白背叶根对肝纤维化大 鼠血清和肝组织中多种
指标的影响 。 观察的指标包括 :丙氨酸转氨酶 ( AL r ) 、 天门氨酸转氨酶 ( A盯 ) 、 M DA 、 NO 和肝组织中经脯氨酸的含量
以及肝组织损伤程度 (病理切片观察 ) 。 结果 : 白背叶根能显著降低大鼠血清中多项指标的水平 , 并能减轻肝脏胶
原纤维增生程度 。 结论 : 白背叶根具有较好的抗肝纤维化作用和抗氧化能力 。 抗氧化作用 可能是白背叶根阻断肝
纤维化形成的机理之一 。
中药材第 25 卷第 3 期 2X() 2 年 3 月 1 85
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 2002. 03. 017
关键词 白背叶根 肝纤维化 中药治疗 抗氧化
各种病因引起的慢性肝病 , 各种损伤因素所致 戊巴比妥钠麻醉 ,打开腹腔 , 腹主动脉采血 ;取肝左
的肝脏损伤 , 都可能发生肝细胞坏死 、 炎症并继发纤 叶肝脏 ,中性 10 % 福尔马林固定制作光镜标本
维化的病理特征 。 在过去的几十年里 ,肝纤维化 、肝 , . 5 指标测定 ( l) 光镜标本 : 石蜡包埋 , 常规切
硬化能否发生逆转 , 一直是 医学界争议的问题 。 自 片 , H E 染色 ,按 19 5 年全国病毒性肝炎防治方案病
从 Rog ik flg 提出人典型发展的肝硬化完全可 以 发生 理诊断标准〔’ 〕进行肝纤维化程度分级 ; ( 2 )血清指
逆转后 , 肝纤维化的研究成了消化病学中的一个热 标 : ALT 、 AST 、 M DA 、 NO 均严格按照试剂盒说明进行
点课题 ,但 目前还缺乏有效的药物完全阻断或逆转 操作 ; ( 3) 肝组织内轻脯氨酸测定 :肝组织经前处理 ,
这 一过程 。 白背叶 aM肠 t。 卿l at (肠ur . ) M ue n 一 A gr 即脱水 、 脱脂 、 水解后 , 按试剂盒说 明书操作进行
是南方地区常见的一种草药 , 具有清热解毒 、 祛湿的 前处理简言之为 : 取 0 . 4 一 0 . 5 9 新鲜肝组织 ,按 l : 9
作用 ,笔者经临床验证发现它可以较好地治疗急性 重量体积比加人无水乙醇 , 用 巧 而 匀浆器进行匀
病毒性肝炎 ,并在以前的实验中发现白背叶根具有 浆 ,取匀浆漩 涡混 匀 1 m in , 静置 Z m in , 重复两 次 ,
较好的抗肝纤维化作用 ,但尚不清楚其作用机理 。 35 0 甲m 离心 or m in ,弃上清 。 在沉淀中加人 2 耐
1 材料与方法 丙酮 ,漩涡混匀 l m in , 静置 Z m i n , 35 0 甲m 离心 5
1
.
, 实验动物 雄性普通级 Wist ar 大 鼠印 只 ,体 m in ,弃上清 。 在沉淀 中加人 2 耐 乙醚 , 漩涡混匀 1
重 20 1 士 10 9 , 第一军医大学实验动物中心提供 。 m in ,静置 5 m in , 弃上层乙醚 , 残留少量乙 醚 自然挥
,
.
2肝纤维化模型 第一次后腿皮下注射 O4 % 四氯 千 ,然后研成粉末 。 取 20 m g 干粉加 6 m ol I/ 」 Hcl 3
化碳花生油溶液 0 . 5 11 11/ 10 9 , 以后改为 0 . 3 而 l/ o 间 置磨 口试管中加盖 ,沸水水解 s ho
;
,每周两次 , 共 6 周 。 前两周给动物饲 以高脂饮食 1 . 6 统计方法 上述各项指标均用统计软件 s玲s
( 7 9
.
5% 五米粉 + 20 % 猪油 + 0 . 5% 胆固醇 ) , 后 4 周 8 . 0 进行单因素变量方差分析和 SNK 两两比较 。
饲以单纯玉米面 (混以 0 . 5 % 胆固醇 ) 。 2 结果
1
.
3 主要试剂 C C肠为分析纯 。 ALT 、 A ST 、 M D A 、 2 . 1 动物观察 实验结束时 , 高 、 中剂量 白背叶根
NO
、
HyP 试剂盒均购于南京建成生物工程公 司 。 马 组各有 2 只和 1 只大 鼠死亡 。 模型组大 鼠皮毛干
洛替酷 , 锦州九 泰药业 有 限责任公 司产 品 , 批 号 涩 ,胡须下垂 ,喜睡少动 ; 阳性药组和白背叶根组大
(现2 01 ,制成混悬剂 。 白背叶根购于第 一军医 大学 鼠皮毛光洁 , 与正常组鼠相似 。
南方医院中药房 , 经水煎后 , 75 ℃水浴浓缩成三种浓 2 . 2 血清中 ALT 、 A s T 、 M DA 和 NO 的变化 C C肠
度 ,各含生药 0 . 27 群间 、 0 . 54 梦耐 和 1 . 08 岁间 。 损伤均可显 著升高 血清 中各 项指 标的水 平 ( P <
,
.
4 动物 分组及药物处理 动物 随机均分为 6 0 . 0 1 )。 在中药治疗组中 , 高 、 中 、 低剂量组均可显著
组 : 正常组 、 模型组 、 阳性药组 (马洛替醋组 )和高 、 降低血清中 A LT 和 M DA 水平 ( P < 0 . 01 ) , 高剂量自
中 、 低中药治疗组 。 实验第 6 周开始中药治疗组灌 背叶根组还可以显著降低 AST 的水平 。 中 、 高剂量
胃给 卜相应浓度药物 , 每 日 1 次 , 每次 2 耐 ; 阳性药 组可显著降低血清中 NO 的水平 ( ( P < 0 . 0 1 ) 。 (见
对照组按 60 1 1岁k g 给予马洛替醋 ; 正常组和模型组 表 l)
给 予等量生理盐水 ,共给药 30 d , 末次给药 24 h 后 , 2 . 3 肝 组织 内H YP 含量的变化 高 、 中剂量 白背
表 1 白背叶根对血清中 A L I…、 A S T 、 加n从 、 N 《 ) 及肝组织中轻脯氨酸含 t 的影响
组 别 n A I J ( u / L ) A盯( u / L ) M n A ( nz ol/ d ) NO (四 o F L ) Hy p (m g 只)
正常组 10 5 9 . 94 士 9 . 50 1 08 . 35 士 25 . 86 4 . 27 土 0 . 93 32 . 88 土 2 . 49 0 . 52 士 0 . 12
模型组 xo 肠 1 . 45 士 194 , 4 8△△ 叫9 . 2 6 士 17 8 . 4 1△△ 9 . 15 士 2 . 0 8△ 。 83 . 7 2 士 4 . 32 △△ 1 . 37 士 0 . 14 。 `
马洛替酚组 10 14 9 . 8 1 士 45 . 47 “ 188 . 的 士 3 6 . 12 “ 4 . 40 士 0 . 84 ` ’ 4 . 4 3 土 9 . 93 ` ’ 0 . 7 7 士 0 . 2 2
低齐{j量白背叶根组 10 35 5 . 35 士 1 10 . 52 “ 34 3 . 62 士 17 2 . 以 6 . 88 士 0 . 67 粉 ’ 7 6 . 9 1 士 4 . 56 1 . 13 士 0 . 19
件, 齐1』吊白背叶根组 9 302 . 15 士 7 0 . 24 ` ’ 2% . 8 1士 105 . 52 5 . 69 士 1 . 46 “ 63 . 4 7 士 6 . 35 ` ’ 1 .以 士 0 . 2( )
高齐lj量 r l背叶根组 8 2 15 . 47 士 4 2 . 2 8 ` ’ 2 30 . 6 2 士 5 9 . 8 7 ` 4 . 9 3 士 0 . 59 ’ ` 57 . 94 士 14 . 18 “ ` 0 . 96 土 0 . 16 ’
与模污,组相 比 , P < 0 . 05 , P < 0 . 01 ;与正常组 比较 , △ △ P < 0 01
叶根组可以 显著降低肝组织内 H YP 的含量 ,但低剂 2 . 4 肝组织病理学观察
量自背叶根组与模型组相比无显著差异 。 (见表 1) 2 . 4 . 1 肝纤维化程度分级 : O级 : 正常肝脏 、 未见肝
中药材第 25 卷第 3 期 2X( )2 年 3 月
纤维化 ;工级 : 包括汇管 区 、 汇管区周围纤维化和限
局窦周纤维化或小叶内纤维瘫痕 , 二者均不影响小
叶结构的完整性 ; n级 : 可见纤维间隔即桥接纤维化
( b ir dig gn if bor is )
, 虽有纤 维间隔形成 , 但小叶结构
大部分仍保留 。 1 级 : 大量纤维间隔 , 分隔并破坏肝
小叶 ,致小叶结构紊乱 ,但 尚无肝硬化 ; W级 :早期肝
硬化 ,肝实质广泛破坏 , 弥漫性纤维增生 , 被分隔的
肝细胞团呈不同程度的再生及假小叶形成 。
2
.
4
.
2 光镜下形态学变化 : 正常组没有肝细胞变
性 、 坏死 ; 模型组可见肝小叶内有较广泛的肝细胞点
状坏死 ,伴明显的淋 巴细胞浸润 , 肝细胞再生明显 ,
有严重的脂质空泡存在 , 部分肝小叶内可见到桥接
样坏死 , 肝小叶破坏 ; 阳性药对照组仅可见到部分范
围内的肝细胞点状坏死 , 淋巴细胞浸润不明显 ,小范
围内有少量脂质空泡的存在 ,破坏的肝小叶几乎恢
复正常 ; 白背叶根组肝小叶中有较少的点状坏死和
淋巴细胞浸润 , 高 、 中剂量组坏死和浸润改善更明
显 。 本实验中 , 中药治疗组仅有高剂量与模型组间
有显著性差异 ( P < 0 . 05 ) 。 (见表 2)
表 2 各组大鼠肝纤维化程度观察结果
纤维化程度 (级 )组别 n—0 1 1 m w正常组 10 10 0 0 0 0模型组 10 0 1 3 5 1△△阳性药组 10 3 4 2 1 0 ’低剂 量白背叶根组 10 1 4 3 2 0中剂量白背叶根组 9 2 4 2 0 1高剂量 白背叶根组 8 2 5 0 1 0 `与模 型组 比较 , ` P < 0 . 05 , ’ ` P < 仓 01 ; 与正 常组 比较 , △△ P <0 . 0 1
3 讨论
肝纤维化是继发于肝脏炎症或损伤后修复过程
的炎 症 反 应 , 以 细 胞 外 基 质 ( e xt acr el ul ar anI itr x ,
E CM )在肝内过量沉积为病理特征 ,最终可以导致肝
硬化和肝衰的病变过程 。 肝纤维化的产生是多种类
型细胞 、氧化压力 、 细胞因子和化学因子第一系列复
杂作用的结果圈 。
白背叶根味微苦 、 涩 ,性平 。 具有清热解毒 、 收
涩消疲的作用 , 《福建药物志 》上记载 : “ 清热平肝 。
治肝炎… … ” , 白背叶鲜根 30 一 60 9 可以 治疗急慢
性肝炎 。 笔者经临床验证也发现它可 以较好地治疗
急性肝炎 。
机体在受到损伤时 , 通过酶系统和非酶系统均
可产生氧 自由基 。 后者能攻击生物膜中的多不饱和
脂肪酸引起脂质过氧化作用 , 并由此形成脂质过氧
化物 , 导致组织细胞受损伤 。 通过检测 M I〕A 可以间
接反映出组织细胞受脂质过氧化物损伤的程度 。 本
实验中发现白背叶根可以较好地降低 MDA 水平 , 这
说明白背叶根具有较好的抗氧化作用 。 这可能是白
背叶根抗肝纤维化的机理之一 。 NO 是 目前科学研
究中的热点之一 , 它在多种疾病的病理过程 中都起
作用 。 在本实验中 , 白背叶根也具有降低血清中 NO
的作用 ,但 白背叶根治疗肝纤维化的作用机理 尚需
进一步研究 。
注 : 本文为全军医药卫生科研基金课题资助项 目
` 广州花城制药厂 ( 51 05 55)
参 考 文 献
病毒性肝炎病理组织学诊断标准 . 中华病理学杂志 ,
1塑入5, 25 : 12 一 124
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( 2 0汉) 一 0 8 一 3 1 收稿 )
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K e y ” 油 从“ 及北us 哪汉纽t。 ; b v e r if b r o s is ; T r a d i t ional C拓nes m e id e al eatr met nt : A n t i一* da t io n护白〕护 , 〕挤 , 护孙护 , 无产日刁`产盗,护 , 少护 , 〕 `产日 ,护多护日,护 , 石尹」〕护日, ;尹日,护丑护玉 ;乒日, 淤卫护扫护日三`尹豆,挤互, 石产日三`产妇 护 , 沪 ” 护日 ,护立,护王 ,护妙 尹`豆 ;护三乡护习三护 9 , ;尹日 ,护王,护〕三屯尹2 ,沪 , j 孟尹日日`尹三〕护 , 护宝, 之产, 〕挤 9〕
本 刊 通 知
从 2以刃 年 or 月 l 日起本刊对来稿收取处理费 (每篇 l议1〕字以下 or 元 , l《I X)字以上 30 元 ) , 请作者在邮寄稿件的同时将
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中药材第 25 卷第 3 期 2嘴X )2 年 3 月 · 187 ·