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HPLC法测定麦冬中沿阶草酮甲的含量



全 文 :中国执业药师·
麦冬(Ophiopogonis Radix)为百合科沿阶草属植物麦
冬的块根,广泛使用的常用中药,具有养阴、清心的功效,
是一味滋清兼备的补益良药 [1]。麦冬的化学成分有甾体皂
苷、高异黄酮、多糖、氨基酸、挥发油等 [2]。民间诸多抗癌复
方中都含有麦冬,临床上麦冬复方也被广泛用于治疗肺癌
以及辅助放化疗,并取得很好的疗效 [3-4]。为有效控制其质
量,作者采用高效液相色谱法测定其中沿阶草酮甲的含
量,现报道如下:
1 药品与仪器
Waters 高效液相色谱仪(Waters 1525 二元泵,Waters
2487 紫外检测器);Breeze 液相色谱工作站 (Waters 公
司);KQ-50 型超声波清洗器(昆山市超声波仪器厂);供试
药材购于重庆市桐君阁中药材市场,由重庆理工大学傅善
权副主任技师鉴定为百合科沿阶草属植物麦冬(Ophio-
pogon aponicus (L.f)KerGawl)的块根;沿阶草酮甲对照品
(实验室自制,批号 101008,纯度为 99.5%);试剂甲醇为
基金项目:国家科技重大专项课题(2010ZX09401-306-2-23);重庆市科委产业化项目(CSTC,2008AB5116)
作者简介:侯浣波,女,主管药师。研究方向:临床药学。
周慧,女,讲师。研究方向:微生物与生化药学。通讯作者 E-mail:zhouhui@cqut.edu.cn
HPLC法测定麦冬中沿阶草酮甲的含量
侯浣波 1 周慧 2,3 余萍 4 曾品涛 2,3 郑一敏 2,3
(1四川省第五人民医院,四川 成都 610031;2重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆 400050;
3重庆市现代中药制药工程技术研究中心,400054;4重庆医疗器械质量检验中心,401121)
【摘要 】 目的 :建立测定麦冬中沿阶草酮甲的高效液相色谱法。方法 :色谱柱:Hypersil C18 柱(150 mm ×
4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(75 ∶25);流速 1.0 mL/min;检测波长 298 nm。结果 :沿阶草酮甲进样量
在 0.918 ~ 5.508 μg 范围内与峰面积线性关系良好,回归方程 Y = 3 645 282X - 420 010(r = 0.999 76),
平均回收率为 99.80%,RSD = 1.74%(n = 6)。结论 :所建立的高效液相色谱法简便、快速、重复性好,可用
于麦冬中沿阶草酮甲的质量控制。
【关键词 】 高效液相色谱;麦冬;沿阶草酮甲;含量测定
Determination of the Content of Ophiopogonanone A in Ophiopogonis Radix by HPLC
Hou Huanbo1,Zhou Hui2,3,Yu Ping4,Zeng Pintao2,3,Zheng Yimin2,3(1 The Fifth Hospital of Sichuan Province,
Sichuan Chengdu 610031,China;2 College of Pharmaceutical and Biological Engineering of Chongqing University
of Technology,Chongqing 400050;3 Chongqing Modern Chinese Medicine Pharmacy Engineering Research
Center,400054;4 Medical Device Quality Inspection Center of Chongqing,401121)
ABSTRACT Objective: To establish HPLC method for the content determination of ophiopogonanone A in Radix
Ophiopogonis.Methods: The analysis was carried out on Hypersil C18 column (150 mm × 4.6 mm,5 μm).The
mobile phase was MeOH-water (75∶25) with flow-rate of 1.0 mL/min.The eluate was detected at 298 nm in room
temperature.Results: The method was simple and had a good linear relationship.The linear range of
ophiopogonanone A was 0.918 ~ 5.508 μg (r = 0.999 76).The recovery was 99.80% (RSD = 1.74%).Conclusion:
The method was simple and suitable for the content determination of ophiopogonanone A in Radix Ophiopogonis.
KEY WORDS HPLC;Radix Ophiopogonis;Ophiopogonanone A;Content Determination
质量控制
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Aug. 2011,Vol.8 No.8
色谱纯,水为三蒸水过滤,其他试剂均为 AR。
2 方法和结果
2.1 色谱条件
参考文献 [5-7]选定色谱条件:Hypersil Cl8 柱 (150 mm ×
4.6 mm × 5 μm);流动相:甲醇-水(75∶25);检测波长:298
nm;柱温:室温。在此条件下沿阶草酮甲的理论塔板数不
低于 3 000。
2.2 对照品及供试品溶液的制备
精密称取沿阶草酮甲对照品适量,用甲醇,制成 0.306mg/mL
的溶液,滤过,即得对照品溶液。取麦冬粉末(40 目)5 g,精
密称定置 100 mL具塞锥形瓶中,加入甲醇 40 mL,超声提
取 30 min,过滤;滤渣再加 20 mL 甲醇,超声提取 10 min,
过滤;滤渣再加 20 mL 甲醇,超声提取 30 min,过滤,合并
三次滤液;滤液减压浓缩至干,残渣加甲醇适量溶解,超
声,转移至 2 mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,经 0.45 μm
滤膜过滤,即得供试品溶液。
2.3 方法学考察
2.3.1 线性关系考察 在上述色谱条件下,分别精密吸
取“2.2”项对照品溶液 3,6,9,12,15,18 μL进样,以峰面积
对质量进行回归,沿阶草酮甲的回归方程为 Y = 3 645 282 X -
420 010( r = 0.999 76),线性范围为 0.918 ~ 5.508μg。
2.3.2 精密度试验 取“2.2”项下对照品溶液,进样 10 μL,
连续进样 6 次,测得沿阶草酮甲峰面积的 RSD 为 0.43%,
表明仪器进样精密度良好。
2.3.3 稳定性试验 取“2.2”项下制备供试品溶液,分别
制备后在 0,2,8,12,24 h 进样 10 μL,测定沿阶草酮甲峰
面积的 RSD 为 0.75%,表明供试品溶液在 24 h 内稳定。
2.3.4 重复性试验 取同一批麦冬样品,按“2.2”项下的
操作平行制备 6 份供试品溶液,分别进样 10 μL,就算沿
阶草酮甲含量,其 RSD 为 1.30%,表明该方法的重复性
良好。
2.3.5 加样回收试验 精密称取 5 份已知含量的同一批
麦冬药材粉末,加入适量沿阶草酮甲对照品溶液,按“2.2”
项下供试液的制备方法进行制备,将供试液定容至 5 mL,
经 0.45 μm 滤膜过滤,进样 10 μL, 按上述色谱条件测定,
计算平均回收率为 99.80%,RSD 为 1.74%。
2.3.6 样品的含量测定 取样品按“2.2”项下方法制备
的供试品溶液,进样 10 μL(3 次平行),测定峰面积,由外
标两点法计算得沿阶草酮甲的含量分别为 0.09275‰,0.08728‰
和 0.093 86‰ (表 1),对照品及供试品色谱图见图 1。
3 讨论
供试品溶液的制备,比较了加热回流提取与超声提
取,其测定结果无明显差异,但加热回流提取的杂质比超
声提取多,且超声提取较简便,故选择超声提取。还比较
了超声提取时间(30,45,60 min),测定结果分别 0.090 30‰,
0.090 69‰和 0.091 03‰,差异不明显,故选择 30 min。文
中所建的高效液相色谱法重复性良好,回收率高,且方法
简便,快速,易于操作,可作为麦冬中沿阶草酮甲的含量
测定方法。
参考文献:
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个黄酮类成分[J].药学实践杂志,2009,27(4):284-285,288.
(收稿日期:2011-05-16)
批次 含量(‰) 平均含量(‰)
1009151 0.092 75
1009152 0.087 28
1009153 0.093 86
0.091 30
表 1 麦冬中沿阶草酮甲的含量测定结果
图 1 沿阶草酮甲对照品 (A)与样品图谱 (B)
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