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(2007 -10-28收稿)
菝葜抗炎活性物质筛选研究
晏绿金 ,文 莉 ,干国平 ,刘焱文＊
(湖北中医学院中药资源与中药复方省部共建教育部重点实验室 ,湖北武汉 430061)
摘要 目的:研究菝葜对蛋清足肿胀大鼠的治疗作用及对棉球肉芽肿的抑制作用。方法:灌胃给予大鼠菝葜
各提取部位 7 d后 ,运用蛋清足肿胀模型和棉球肉芽肿模型 ,观察菝葜各提取部位对足跖肿胀及肉芽组织增生的影
响。结果:菝葜乙酸乙酯和正丁醇部位显著抑制大鼠的足跖肿胀 , 并对大鼠的肉芽组织增生具有显著对抗作用 ,其
作用强度显著优于金刚藤胶囊。结论:菝葜乙酸乙酯和正丁醇部位为菝葜的主要有效部位。
关键词 菝葜;足肿胀;肉芽肿;筛选
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2008)07-1054-03
作者简介:晏绿金 ,男 ,博士 , Tel:0715-4810218, E-mail:ylj furen@163.com。＊通讯作者:刘焱文 ,男 ,教授 ,博士生导师;Tel:027-88920834, E-mail:ywliu@public.wh.hb.cn。
菝葜 ,又名金刚藤 ,为百合科植物菝葜 Smilax
chinaL.的干燥根茎 ,在我国主要分布于长江以南
地区 ,资源丰富 ,该中药收载于 2005年版中国药典 ,
具有祛风利湿 、解毒散瘀之功效〔1〕 ,其中药制剂 “金
刚藤胶囊”为湖北福人药业的主导产品 ,临床用于
治疗妇科炎症疾患 ,疗效显著 〔2, 3〕。但该中药制剂
为传统生产工艺制备 ,其抗炎物质尚不清楚 ,为了阐
释菝葜抗炎药效物质基础 ,为金刚藤胶囊的临床应
用提供科学依据 ,本实验采用大鼠蛋清足肿胀和棉
球肉芽肿模型对菝葜药材不同溶剂提取物进行了药
效学筛选研究。
1 材料与方法
1.1 动物 SPF级 Wistar大鼠 , 280只 , 120 ～ 170
g,雌雄各半 ,由湖北省疾病控制动物实验中心提供 ,
动物许可证号:SCXK(鄂)2003-2005。
1.2 药品与试剂 所有供试品由本实验室自制:
菝葜经 95%乙醇回流提取得到供试品醇提物;乙醇
提取物用水溶解 ,滤出不溶物后的水溶液加蛋清得
到沉淀 ,沉淀用丙酮溶解 ,回收丙酮得到供试品鞣质
部位;沉淀鞣质后的上清液 ,用乙酸乙酯萃取 5次 ,
合并乙酸乙酯萃取液 ,减压回收乙酸乙酯得到供试
品乙酸乙酯部位;乙酸乙酯萃取后的水液 ,用正丁醇
萃取 5次 ,合并正丁醇萃取液 ,减压回收正丁醇得到
供试品正丁醇部位。临用前各部位分别配成
240%、120%、60%浓度 。
1.3 方法
1.3.1 菝葜各提取部位对蛋清诱发的大鼠足肿胀
的影响〔5〕:将大鼠 ,随机分为 14组:(1)正常组(灌
胃给予等体积生理盐水);(2)(3)(4)总醇提物高 、
中 、低剂量组(灌胃给予总醇提物 24、12、6 g生药 /
kg;(5)(6)(7)鞣质高 、中 、低剂量组(分别灌胃给
予鞣质 24、12、6 g生药 /kg);(8)(9)(10)正丁醇高
剂量组 、中 、低剂量组(分别灌胃给予正丁醇 24、12、
6 g生药 /kg);(11)(12)(13)乙酸乙酯高 、中 、低剂
量组(分别灌胃给予乙酸乙酯 24、12、6 g生药 /kg);
(14)阳性对照组(灌胃给予金刚藤胶囊 24 g生药 /
kg)。灌胃体积 10 ml/kg,连续给药 1周 ,末次灌胃
给药 1 h后 ,在右后足跖皮下注射 50%蛋清溶液
·1054· JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 7期 2008年 7月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2008.07.039
0.05 ml致炎。致炎前及致炎后 1、2、3 h分别测足
体积 ,各组与阴性 、阳性对照组比较 ,求 t值 。结果
见表 1。
足肿胀率 =(致炎前足体积 -致炎后鼠足体积)/致炎
前足体积 ×100%
1.3.2 菝葜各提取部位对大鼠棉球肉芽肿的影
响 〔5〕:大鼠分组给药同上 。将大鼠腹腔注射戊巴比
妥钠 35 mg/kg浅麻醉后 ,于腹部消毒后切开 1 cm
左右长的小口 ,将已消毒(先称重再高压消毒)的棉
球(每个重约 20 mg)置入皮下 ,随即缝合皮肤 ,并用
青链霉素液 0.2 ml消毒 。于手术当日开始给大鼠
分别灌服 , 1 d给药 1次 ,连续给药 7 d,于第 7 d给
药 1 h后 ,打开原切口 ,将棉球连同周围结缔组织一
并取出 ,剔除脂肪组织 ,烘干称重 ,将称重量减去原
棉球的量即为肉芽肿重量。各组与阴性对照组比
较 ,求 t值。结果见表 2。
1.4 统计学处理 实验数据用 x±s表示 ,数据采
用 SPSS11.5统计软件处理 ,以 student-t检验方法
比较组间差异。
2 结果
2.1 对蛋清诱发的大鼠足肿胀的影响 由表 1可
见 ,总醇提物部位 24、12、6 g生药 /kg剂量 ,未见明
显抗炎作用;鞣质部位 24、12、6 g生药 /kg剂量 ,未
见明显活性;正丁醇部位 6 g生药 /kg剂量 ,有极显
著抗炎活性(P<0.01),且显著优于阳性对照组(P
<0.05);乙酸乙酯部位 24、12g生药 /kg剂量 ,有极
显著抗炎活性(P<0.01),且显著优于金刚藤对照
组(P<0.05, P<0.01);阳性对照组在金刚藤胶囊
24 g生药 /kg剂量未见明显抗炎活性 。
2.2 对大鼠棉球肉芽肿的影响 由表 2可见 ,总
醇提物部位 24、12 g生药 /kg剂量 ,具明显抗肉芽组
织增生作用(P<0.05);鞣质部位 24、12、6 g生药 /
kg剂量 ,未见明显活性;正丁醇部位 24、12、6 g生
药 /kg剂量 ,均有显著抗肉芽组织增生活性 (P<
0.05, P<0.01), 且显著优于金刚藤对照组 (P<
0.05, P<0.01);乙酸乙酯部位 24、12 g生药 /kg剂
量 ,有极显著抗肉芽组织增生活性(P<0.01),且极
显著优于金刚藤对照组(P<0.01);阳性对照组灌
胃给予金刚藤胶囊 24 g生药 /kg后有显著抗肉芽组
织增生活性(P<0.05)。
表 1 菝葜各提取部位对蛋清诱发的大鼠足肿胀的影响( x±s, n=10)
组别 剂量(g生药 /kg)
给药后足肿胀率(%)
1 h 2 h 3h
阴性对照组 - 61.5±16.2 50.5±20.5 39.0±16.5
总醇提物部位
高剂量组 24 51.7±24.4 55.0±18.3 42.8±26.5
中剂量组 12 47.9±17.9 44.2±12.7 43.6±14.8
低剂量组 6 62.2±19.7 46.9±13.2 44.4±21.2
鞣质部位
高剂量组 24 61.4±18.3 68.3±21.9 35.0±15.4
中剂量组 12 57.5±19.7 54.4±21.9 38.5±17.6
低剂量组 6 69.5±23.7 59.4±26.7 28.9±18.4
正丁醇部位
高剂量组 24 52.5±11.2 44.0±18.3 38.0±12.3
中剂量组 12 62.5±16.6 48.5±11.8 37.0±15.5
低剂量组 6 39.0±16.9＊＊■ 36.7±20.3＊ 44.4±18.5
乙酸乙酯部位
高剂量组 24 38.5±12.7＊＊■ 46.0±14.0 42.0±14.0
中剂量组 12 31.1±13.1＊＊■ 56.1±23.9 46.7±21.1
低剂量组 6 40.0±25.1 46.1±25.4 45.0±18.1
阳性对照组 24 58.0±16.6 41.9±20.6 36.9±12.7
注:与阴性对照组比较 , ＊P<0.05, ＊＊ P<0.01;与阳性对照组比较 , ■P<0.05, ■■P<0.01。表 2同
·1055·JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 7期 2008年 7月
表 2 菝葜各提取部位对大鼠棉
球肉芽肿的影响( x±s, n=10)
组别 剂量(g生药 /kg) 肿重量(mg)
阴性对照组 - 37.1±6.73
总醇提部位
高剂量组 24 28.4±6.46＊
中剂量组 12 27.5±12.5＊
低剂量组 6 29.2±9.20
鞣质部位
高剂量组 24 34.0±5.72
中剂量组 12 33.0±5.72
低剂量组 6 34.6±5.51
正丁醇部位
高剂量组 24 26.7±5.97＊■
中剂量组 12 25.8±4.11＊＊■■
低剂量组 6 25.8±2.62＊＊■■
乙酸乙酯部位
高剂量组 24 24.1±4.50＊＊■■
中剂量组 12 22.4±6.61＊＊■■
低剂量组 6 30.8±6.81
阳性对照组 24 31.7±3.56＊
3 结论
采用溶剂法和蛋清沉淀法 ,将菝葜药材提取分
离为四个供试品部位。本实验结果表明 ,菝葜的乙
酸乙酯部位和正丁醇部位具有显著对抗致炎物质引
起的水肿作用 ,对棉球引起的肉芽组织增生有明显
的抑制作用;在同等剂量下(以生药材量计),其抗
炎效果优于原制剂金刚藤胶囊 ,这可能与剔除菝葜
粗提物的杂质干扰 ,使菝葜抗炎有效物质充分发挥
药效作用有关 。
菝葜的乙酸乙酯部位可能为黄酮类化合物 ,其
正丁醇部位可能为皂苷类化合物。因此 ,本研究为
阐释菝葜抗炎物质基础提供了一定依据 ,为探讨其
抗炎作用奠定了一定的基础 。
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(2008 -03-10收稿)
山合欢皮镇静安神活性成分的研究
文 莉1 ,朱 红 2 ,干国平 2 ,刘焱文2＊
(1.湖北中医学院药理教研室 ,湖北武汉 430061;2.湖北省中药资源与中药化学省级重点实验室 ,湖北武
汉 430061)
摘要 目的:研究山合欢皮中不同化学成分对小鼠的镇静安神作用 , 筛选出山合欢皮中的活性成分。方法:用
戊巴比妥钠阈下剂量与山合欢皮中不同化学成分合用 ,探讨山合欢皮中化学成分的镇静安神作用。结果:正丁醇
中组分 2、3、4使小白鼠入睡个数显著增加 ,与阴性对照组比较 , 其中组分 2和 4的 P值 <0.001, 组分 3的 P值 <
0.01;(-)-丁香树脂酚-4-O-β -D-葡萄糖苷具有显著的镇静安神作用(P<0.001)。结论:(-)-丁香树脂酚-4-
O-β -D-葡萄糖苷为山合欢皮中镇静安神活性成分之一。
关键词 山合欢皮;化合物;镇静安神
中图分类号 R285.5 文献标识码:A 文献编号:1001-4454(2008)07-1056-03
山合欢皮为豆科植物山合欢 Albiziakalkora
(Roxb.)Prain的树皮 ,其药用历史不长 ,但使用地
区较广 。据文献记载 〔1〕 ,我国北京 、山西 、河北 、河
南 、江苏 、江西 、湖南 、四川等地区混作合欢皮药用。
合欢皮具有镇静 、免疫增强以及抗生育的作用。合
欢皮的生长年限较长 ,而市场需求量较大 ,导致合欢
·1056· JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 7期 2008年 7月