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菝葜抗小鼠移植性肿瘤的实验研究



全 文 :神因素与中枢兴奋性刺激双重影响对 IBS 有重要意义。在此
基础上加上外周刺激(醋酸刺激)制成的三因素组后 , 腹泻程
度并没有相应增加 ,可能外周刺激与精神因素 、中枢兴奋作用
无叠加效果。
4.2 从肠道敏感性测试的结果显示 ,达到 2 ~ 3 分的气囊扩
张压力阈值各模型组与空白对照组比较均低于空白对照组 ,
有显著差异。表明各模型组大鼠引起肠敏感性增加。在组间
比较方面 ,母分+醋酸组和母分+束缚组比较有统计学意义 ,
母分+束缚组的肠敏感性高于母分+醋酸组。
直肠敏感性增加是 IBS 中腹泻形成的重要原因 ,实验证
明 ,肠敏性增加的结果与 3.3 实验和 3.4 实验的结果基本吻
合 ,各模型组的直肠敏感性均增高 , 母分+束缚组的直肠敏感
性增高明显大于其他组 ,而相对应的是 , 母分+束缚组的点数
高于其他组 ,表明腹泻程度也明显高于其他组 。可以证明 ,直
肠敏感性增高可以是 IBS 腹泻形成的重要原因之一。而母分
+束缚组致腹泻效果最优。而醋酸刺激与其他因素的刺激联
合应用则可能钝化肠敏感性 ,这可能与醋酸刺激反复直接刺
激肠壁引起肠壁感觉饱和有关。
4.3 由实验可以看出 , 单一因素剌激产生的模型在模拟人
IBS 长期腹泻与腹痛的复杂症状方面较为不足 ,目前 , 肠易激
综合征的模型研究以多因素联合刺激产生 IBS 为主要方向 ,
但究竟是否越多因素联合刺激越接近人的肠易激综合征特点
呢? 本实验同时建立单因素 、两因素 、三因素模型大鼠 ,同时
进行对比评价 , 三因素模型的评价指标并没有全面超越两因
素的。而且在实验过程中 , 三因素的动物模型制作步骤较多 ,
对实验的稳定性和重复性影响较大 ,对实验者的要求较高 , 需
时较长。而在本次实验中 , 两因素组相对单因素和三因素组
的模型效果较理想 , 模型的制作也相对较容易。
参考文献
〔1〕唐洪梅 ,李得堂 ,黄樱华 ,等.腹泻型肠易激综合征大鼠模型的建
立及敏感性评估的实验研究〔J〕.中国药理学通报 , 2009 , 25(5):
693-695.
〔2〕 Emeran A.Mayer , M.D..I rrit able Bow el Syndrome〔 J〕.The new
England journal of medicine , 2008 , 358(16):1692-1699.
〔3〕ED Al-Chaer , M Kawasaki , PJ Pasricha.A New Model of Chronic
Visceral Hypersensiti vity in Adult Rats Induced by Colon Irritation
Du ring Postnatal Development〔 J〕.Gast roenterology , 2000 , (119):
1276-1285.
菝 葜 抗 小 鼠 移 植 性 肿 瘤 的 实 验 研 究
王红英1 ,黄燕芬2(1.浙江省兰溪市人民医院 兰溪 321100;2.浙江中医药大学 杭州 310053)
摘要:目的 研究菝葜乙酸乙酯提取物体内抗移植性肿瘤的作用及其对小鼠的免疫调节作用 ,为菝葜的临床应用提供理论依据。方法 菝葜
乙酸乙酯提取物灌饲接种过 H22的荷瘤小鼠 ,并通过测定其抑瘤率 、胸腺指数 、脾指数及碳廓清指数(K 值)和吞噬指数(a值)来进一步探讨其抗
瘤活性和对机体的免疫调节作用。结果 菝葜乙酸乙酯提取物具有抗移植性肿瘤 H22的作用 ,抑瘤率达 43.3%;同时对机体也有明显的提高
免疫力作用。结论 菝葜具有抗移植肿瘤的作用 ,并可提高荷瘤小鼠的机体免疫力。
关键词:菝葜乙酸乙酯提取物;抗肿瘤;免疫促进
中图分类号:R282.71;R969 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2012)-09-0023-03
作者简介:王红英 ,女(1973.12-)。毕业于浙江中医药大学。职称:副主任中药师。从事临床中药学专业。联系电话:13566905708
Study on ant i-tumor effects of Ethyl acetate extract of Smilax china L.
WANGHong-ying1 ,HUANGYan-fen(1.The people′s hospital of Lanxi city ,Lanxi 321100 ,China;2.Zhejiang tra-
ditional Chinese medicine University , Hangzhou 310053 ,China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To observe the anti-tumor and immunological regulation activity of ethy l acetate ex-
tract of Smilax china L., and provide basic theory for clinical application.METHODS H22 tumor bearing mice
o rally were given Ethy l acetate ext ract of Smilax china L.and the anti-tumor activi ty and immunological regula-
tion activity w ere investigated by determined its tumor inhibiting rate , thymus index , spleen index , carbon particle
index(K value)and phagocy tic index (a value)of the mice.RESULTS Ethyl acetate ext ract of Smilax china
L.can significantly inhibit H22 tumo r cell g row s , the inhibiting rate w as 43.3%, and with g reat immunological en-
·23·
Strait Pharmaceutical Journal Vol 24 No.9 2012
hancement activity as well.CONCLUSION Ethyl acetate ex tract of Smilax china L.has anti-tumo r activity and
can enhance H22 tumor bearing mice′s immunological.
KEY WORDS:Ethyl acetate ex tract of Smilax china L.;Anti-tumo r;immunoenhancement
  菝葜 ,是百合科植物菝葜 Smilax china L.的干燥根茎 ,
其叶也可入药。具有消肿止痛 、祛风利湿 、活血化瘀及抗肿瘤
等作用等 ,临床单用或与其他药物配伍用于上述各种疾病的
治疗 ,但对菝葜的作用机理研究甚少〔1〕。文献报导菝葜乙酸
乙酯提取物具有抗肿瘤作用〔2 , 3〕。本文通过菝葜乙酸乙酯提
取物对 H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及对机体的免疫调节作用
两方面进行了研究 ,希望能够为其临床进一步应用提供理论
依据。
1 实验材料
1.1 实验动物及瘤株 昆明小鼠 , 6~ 8 周龄 , 体重 20±2g ,
由浙江中医药大学实验动物中心提供。H22瘤株由浙江中医
药大学实验动物中心提供。动物许可证号:SYXK(沪)2008-
0115 , SYXK(浙)2008-0115。
1.2 药物 菝葜购自浙江省中医院。
2 实验方法
2.1 菝葜乙酸乙酯提取物的制备〔3〕 称取菝葜根茎粉末(过
10 目筛)500g ,放入 2000m L乙酸乙酯中 , 充分浸泡 ,然后进行
加热回流提取 ,得到乙酸乙酯回流提取液 , 再回收浓缩提取液
中的乙酸乙酯即得菝葜的乙酸乙酯提取物。将该提取物用生
理盐水(加 0.1%PVP)溶解 , 配成实验所需各浓度。
2.2 动物模型建立 取 H22腹水 , 呈乳白色牛奶状为宜;用
无菌 D-Hanks 液稀释成 1.5×107 个/mL 瘤细胞浓度的稀释
液 ,每鼠右前肢腋部皮下注射 0.1mL 前述稀释液。
2.3 小鼠分组 取昆明小鼠60只 , 体重 20±2g , 随机分成模
型组 、给药低剂量组 、中剂量组 、高剂量组 , 每组 15 只。
2.4 给药方式和剂量 ①模型组:已经荷瘤 ,但不给药 , 用生
理盐水灌胃 , 每只每天 0.3mL;②给药组:已经荷瘤 , 乙酸乙
酯提取物低剂量组(每只每天 0.2g灌胃),乙酸乙酯提取物中
剂量组(每只每天 0.4g 灌胃),乙酸乙酯提取物高剂量组(每
只每天 0.6g灌胃)。造模后 8h 开始给药 ,连续给药 14d。
2.5 小鼠免疫调节实验
2.5.1 碳廓清实验:于实验第十八天每鼠尾静脉注射墨汁
0.2mL/10g , 然后于 1min(t1)、10min(t10), 分别取眼眶血
20μL 置盛有 2mL 0.1%碳酸钠试管内 , 于 680nm 波长处比
色 , 读取光密度(OD1 、OD10)。按公式计算:廓清指数(K 值)
=(logOD1-logOD10)/(t10-t1)。
2.5.2 胸腺指数 、脾指数及吞噬指数测定:碳廓清实验完成
后立即颈椎脱臼法处死小鼠 , 称取体重 , 解剖胸腺 、脾脏 、肝
脏 , 并分别称取其重量。按下列公式计算:胸腺指数=胸腺重
(mg)/体重(g);脾指数=脾重(mg)/体重(g);吞噬指数(a 值)
=〔3K×体重/(肝重+脾重)〕
2.6 小鼠抑瘤率实验 解剖剥离上述小鼠肿瘤 , 称取瘤重 ,
按照下式计算抑瘤率:
抑瘤率(%)=〔(模型组平均瘤重-给药组平均瘤重)/模
型组平均瘤重〕×100%
3 实验结果
3.1 菝葜乙酸乙酯提取物对 H22荷瘤小鼠免疫调节作用 
从表 1 中可以看出 , 与模型组相比较 , 给药组对 H22荷瘤小鼠
的胸腺指数和脾指数有提高 , 但胸腺指数没有显著性差异;
中 、高剂量组碳廓清指数 K 值和吞噬指数 a值显著高于模型
组 , 有显著性差异(P <0.01)。以上结果证实乙酸乙酯提取
物具有免疫促进作用。
此外 , 从我们实验过程中所记录的体重变化来看 , 给药组
的体重也显著高于模型组;且给药组小鼠毛色及进食等活动
情况明显优于模型组 , 这提示我们 ,菝葜乙酸乙酯提取物具有
改善生活质量的作用。
表 1 菝葜乙酸乙酯提取物对 H22荷瘤小鼠免疫调节作用 (x±s)
组别/各指数 胸腺指数(mg·g -1) 脾指数(mg·g-1) 碳廓清指数 K 吞噬指数 a
模型组 0.87±0.23 8.77±0.96 0.045±0.011 5.24±0.32
低剂量组 0.91±0.35 8.69±1.01 0.051±0.013 6.32±0.44
中剂量组 0.94±0.31 8.92±0.98 0.064±0.012■ 7.45±0.47■
高剂量组 0.98±0.34 9.59±1.12■ 0.078±0.014* 8.92±0.34*
注:*表示与模型组相比较 P <0.01 , ■表示与模型组相比较 P<0.05
表 2 菝葜乙酸乙酯提取物对实体瘤 H22的抑制作用 (x±s)
组别 平均瘤重(g) 抑瘤率(%)
模型组 1.34±0.24
低剂量组 1.17±0.35 12.7
中剂量组 0.87±0.31 35.1*
高剂量组 0.76±0.24 43.3*
注:*表示与模型组相比较 P <0.01
3.2 菝葜乙酸乙酯提取物对实体瘤 H22的抑制作用  与模
型组比较 , 菝葜乙酸乙酯提取物中 、高剂量组瘤重明显小于模
型组 , 具有显著性差异(P <0.01),高剂量抑瘤率达 43.3%,
表明菝葜乙酸乙酯提取物确实具有抑制肿瘤生长的作用(见
表 2)。
4 讨论
中医药理论认为 , 肿瘤的形成与机体的气滞血瘀因素密
切相关 , 瘀血是癌瘤的病因病机之一。因此 , 活血化瘀法是抗
肿瘤治疗的重要方法之一 , 可诱导肿瘤细胞凋亡 , 并降低血液
·24·
海峡药学 2012年 第 24卷 第 9期
粘稠度 , 减少癌栓形成 , 增强化学药物 、免疫活性细胞对肿瘤
细胞的杀伤作用。菝葜就是这样一味常用活血化瘀药〔4〕。
菝葜始载于《名医别录》 ,《本草纲目》上又名铁菱角 , 金刚
藤 ,马加勒 , 筋骨柱子 ,红灯果。性甘 、酸 、平。可祛风利湿 ,解
毒消肿。民间多用于治疗肿瘤 、风湿关节痛 、跌打损伤 、胃肠
炎 、乳糜尿 、白带等等 ,其叶外用治疗疔疮 、烫伤。由于菝葜独
特的临床疗效 ,近年来对菝葜的化学成分 、药理学 、药效学研
究和临床应用十分活跃 ,以菝葜的提取物 、活性部位为主要组
分的新药也不断出现。显示其具有很好的开发前景及利用价
值〔5〕。
寻找有效无毒的抗肿瘤药物依然是目前药物研究的热
点。很多西药产品已经展现出了很强的抗癌活性 , 但与此同
时 ,也给患者带来了很多其他方面毒副作用 , 这也正是现在一
些西药无法解决的问题。菝葜抗肿瘤作用在临床上应用已有
多年历史 , 但其具体抗肿瘤机理研究不多 , 目前也知之不详。
本实验研究也表明 ,菝葜乙酸乙酯提取物具有抗肿瘤活性作
用 ,高剂量组抑瘤率达 43.3%。 同时 , 菝葜乙酸乙酯提取物
还具有提高免疫力作用 , 从而间接杀伤肿瘤--即中医理论之
“扶正固本”达“祛邪” , 这也是该药的抗肿瘤作用机理之一。
我们将进一步对菝葜乙酸乙酯提取物的活性成分进行追
踪分离 , 鉴定其结构 ,并系统地研究其对肿瘤细胞以及机体免
疫功能的影响 , 进一步阐述其抗肿瘤作用的机制 , 为将其开发
为抗癌新药奠定基础。
参考文献
〔1〕王光忠 ,李秋怡 ,干国平 ,刘焱文.17种国产菝葜属植物中白藜芦
醇含量比较〔J〕.时珍国医国药 ,2007 , 18(7):1679-1680.
〔2〕王涛 ,王鹏.菝葜乙酸乙酯提取物抗癌活性的实验研究〔J〕.肿瘤
基础与临床 , 2007 , 20(3):234-236.
〔3〕王涛 ,杨华山.菝葜乙酸乙酯提取物抗癌机制研究〔J〕.肿瘤基础
与临床 , 2007 , 20(2):129-131.
〔4〕吕永宁 ,陈东生 ,等.菝葜活血化瘀药理作用〔J〕.中国医院药学
杂志 , 2002 , 22(9):538-540.
〔5〕李忌 ,巨勇.天然甾体皂甙化合物的抗肿瘤活性〔J〕.天然产物研
究与开发 , 1999 , 11(1):14-17.
·中药与天然药物·
药用植物葛的研究进展及综合开发利用
陈 平 ,蒋世翠 ,雷 燕 ,曾凡玉(重庆太极集团涪陵制药厂有限公司总工办 重庆 408000)
摘要:目的 综述了葛的种源及资源分布 、有效成分、现代药理研究和综合开发利用。方法 查阅近 10年来有关葛的文献 ,进行分析 、总结。
结果 葛根中所含的多种生物活性成分 , 对心脑血管疾病 、高血压 、糖尿病等有较好的治疗作用 ,并有雌激素样作用 ,抗肿瘤 、抗氧化 、解热作
用。葛花具有解酒 、保护肝脏 、降血糖作用。葛的其它部分如淀粉 、渣 、藤 、叶也可利用。结论 我国葛资源丰富 ,应进一步研究和开发利用。
关键词:葛;葛根;化学成分;药理作用;综合开发利用
中图分类号:R282.7 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2012)-09-0025-03
作者简介:陈 平 ,女(1973.05-),毕业于成都中医药大学。 职称:
主管药师。从事制药工程研究。联系电话:13272979507
  葛为豆科植物 , 始载于《神农本草经》 。《名医别录》载:
“葛根无毒 , 疗伤寒 , 中风头痛 , 解肌发表出汗 , 开腠理 , 疗金
疮 ,止胁风痛。生根汁:大寒 ,疗消渴 , 伤寒壮热。叶主金疮止
血。花主消渴” 。现代研究表明 , 葛根对对冠心病 、心绞痛脑
动脉硬化及脑梗塞症有较好的治疗效果。根和花均有降血
糖 、解酒 、保护肝脏的作用。除了药用 ,葛粉 、葛渣 、葛藤 、葛叶
也可进行综合开发利用。这样既不浪费资源 ,也对资源是一
种保护。现综述如下。
1 种源及资源分布
葛属植物全世界约 20 种 , 我国共有 11 种 , 其中野葛分布
最广 ,全国大部分省均有分布 , 产量最高 ,资源最多 , 是中药材
葛根葛花的主要来源。其余品种峨眉葛 、云南葛 、越南葛 、三
裂叶葛等均为区域性分布 , 它们的根只偶有药用 , 一般不作药
用。各个品种之间化学成分及含量存在较大差异 , 总黄酮含
量以野葛最高 , 可达 12%, 粉葛次之 3.16%, 峨眉葛 1.7%,
越南葛 1.65%,三裂叶葛0.58%, 云南葛0.5%。野葛和粉葛
以葛根素为主;峨眉葛以葛根素和大豆苷为主;越南葛 、三裂
叶葛 、云南葛以大豆苷为主。曾明等通过 rDNA-ITS 序列分
析 , 野葛 、粉葛 、峨眉葛属于近缘种〔1〕。
2 化学成分
2.1 葛根的化学成分
2.1.1 黄酮类:葛根素 、黄豆苷 、黄豆苷元 、大豆素 、大豆黄
素 、4 , 6″-二乙酰基葛根素 、芒柄花素-7-葡萄糖苷 、5 , 7 , 4′-三羟
基异黄酮 、葛根素木糖苷 、4′-甲氧基葛根素 、7-羟基-4′-甲氧基
异黄酮 、染料木素 、芒柄花素 、金雀异黄酮苷 、染料木苷等。
2.1.2 其它:淀粉 、多糖 、尿囊素 、胡萝卜苷 、氨基酸 、β-谷甾
醇 、葛香豆雌酚 、羽扇豆醇 、羽扇豆酮 、邻苯二甲酸二异丁酯 、
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 、槐香豆素 、香豆雌酚 、尿囊素 、8-
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 24 No.9 2012