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贵州产菝葜属及肖菝葜属8个品种的鉴别研究



全 文 :法而言 , 抓痧疗法体现了刮痧疗法与推拿疗法的双重效应 , 具有
疏通经络 、活血化瘀 、解除局部肌痉挛和肌紧张 、减轻疼痛 、松解
组织粘连的作用 [ 12] 。抓痧疗法在操作过程中所出的 “痧”, 实际
上是一种血管扩张渐至毛细血管破裂 ,血流外溢 ,皮肤局部形成
瘀血瘀斑的现象 , 此类血凝块不久即能溃散 , 而起自体溶血作用 ,
这样可使局部组织血液循环加快 ,新陈代谢旺盛 , 营养状况改善 ,
同时使机体的防御能力增强 , 从而起到预防和治疗疾病的作用。
自身溶血是一个延缓的良性弱刺激过程 ,其不但可以刺激免疫机
能 , 使其得到调整 ,还可以通过向心性神经作用于大脑皮质 ,调节
大脑的兴奋与抑制过程和内分泌系统的平衡 ,从而起到治疗失眠
症的作用。
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国药鉴别
收稿日期:2010-04-11; 修订日期:2010-07-10
基金项目:国家自然科学基金(No.30960503);
贵州省科学技术基金(No.[ 2008] 2143)
作者简介:韦 欣(1978-),女(壮族),贵州贵阳人 ,现任贵阳医学院讲师 ,
硕士学位 ,主要从事中药内在质量控制与中药新药开发工作.
*通讯作者简介:董立莎(1956-),女(汉族),江苏丰县人 ,现任贵阳中医学
院教授 ,硕士研究生导师 ,主要从事中药质量控制及中药新药研究工作.
贵州产菝葜属及肖菝葜属 8个品种的鉴别研究
韦 欣 1 , 任广聪 2 , 孙庆文2 , 董立莎 2*
(1.贵阳医学院 ,贵州 贵阳 550002;2.贵阳中医学院 ,贵州 贵阳 550002)
摘要:目的 系统研究贵州产菝葜属(SmilaxL.)及肖菝葜属(HeterosmilaxK.)常见 8个品种的药材性状特征。 方法 用
TLC鉴别该类品种的指标性成分落新妇苷 、白藜芦醇及薯蓣皂苷元。 结果 在药材性状特征上建立了检索表 , 为该类品
种的性状特征提供了专属性的鉴别依据。薄层鉴别中菝葜属及肖菝葜属常见 8个品种均含有落新妇苷及白藜芦醇 , 但
仅 3个品种含薯蓣皂苷元 , 即短梗菝葜 、黑叶菝葜及小叶菝葜 , 而药典品种菝葜及土茯苓则未检测出薯蓣皂苷元。结论
该研究方法重复性及专属性较好 ,简单易行 , 可为该类品种的新资源开发利用及品种间鉴别提供一定的参考依据。
关键词:菝葜属及肖菝葜属 8个品种; 性状鉴别; 薄层鉴别; 落新妇苷; 白藜芦醇; 薯蓣皂苷元
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2011.02.105
中图分类号:R284.1  文献标识码:A  文章编号:1008-0805(2011)02-0492-03
PharmacognosyResearchof8 VarietiesfromSmilaxandHeterosmilaxNativeinGuizhou
Province
WEIXin1 , RENGuang-cong2 ,SUNQing-wen2 ,DONGLi-sha2*
(GuiyangColegeofTraditionalChineseMedicine, Guiyang550002, china)
Abstract:ObjectiveTostudymacroscopiccharacteristicof8 varietiesofred, whiteTufulinginGuizhou.MethodsTLCmethod
wasusedtoidentifythekeycompositionresveratrolanddiosgenin.ResultsBasedonthemacroscopiccharacteristic, weestab-
lishedtheidentificationkey, andoferedabasisfortheproprietaryidentificationamongthe8 species.Alofthe8 speciescon-
tainedresveratrol.Onlythreeofthemcontaineddiosgenin, theywereS.scobinincaulis, S.nigrescensandS.microphylla, butwedid
notfounddiosgenininS.chinaandS.glabrawhichincludedinChinesepharmacopiea.ConclusionOurmethodinthisstudyis
simple, accurateandreproducibleandcanprovidesomereferencefordevelopmentandidentificationofnewmedicinalresources.
Keywords:SmilaxandHeterosmilax; Characteridentification; TLC; Astilbin; Resveratrol; Diosgenin
  百合科菝葜属(SmilaxL.)及肖菝葜属(HeterosmilaxK.)中
多数药用植物的根茎及根在贵州省均为苗族民间用药 ,蕴藏量较
大 [ 1, 2] , 在贵州药材市场上将断面红棕色者称红土茯苓 , 而断面
白色者称白土茯苓 [ 3] 。由于该类植物均为野生 , 在形态上变异
较大 , 乃至根茎极为相似 , 再加上每种植物有不同的变种 ,因此在
性状上不易鉴别 ,以至收购药材时真伪难辨 ,如我们在全国药材
市场调查研究中 ,发现现行版《中国药典》收载的土茯苓 、菝葜实
为菝葜属及肖菝葜属多品种来源的根茎及根。由于品种的混乱 ,
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故直接影响了临床用药的安全有效。药理实验表明 ,本类植物中
的落新妇苷有利尿和镇痛作用 [ 4] , 能明显对抗尿酸钠所致大鼠
痛风性关节炎 , 明显增加大鼠尿量;薯蓣皂苷及苷元具有抗血小
板聚集 、降血脂 、抗肿瘤 、祛痰及溶血等作用 [ 5 , 6];白藜芦醇具有
明显的抗炎 、抑菌作用 ,近年来研究还发现白藜芦醇具有多种生
物活性 , 如抗癌 、抗血小板聚集 、保护肝脏等 [ 7] 。目前对该类品
种在鉴别方面的研究未见报道 ,故本研究从 8个品种的基源及性
状鉴定入手 , 并结合薄层色谱鉴别对贵州产菝葜属及肖菝葜属常
见 8个品种的根茎及根进行了系统的鉴别学研究 ,为寻找新的药
用资源 、澄清品种及控制该类药材质量提供了一定的参考依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器 SK8310LHC型恒温超声波提取器(500W, 50/60Hz,
上海科导超声仪器有限公司);紫外分析仪(WD-9403C型 ,北京
市六一仪器厂);薄层照相系统(CAMAGREPROSTAR3);分析
天平(METTLERTOLEDO, AB104-N)。
1.2  试药 落新妇苷对照品(批号 30 -2007), 购于上海中药标
准化研究中心;薯蓣皂苷元对照品(批号 1539-200001)、白藜芦
醇对照品(批号 111535-200502)均购于中国药品生物制品鉴定
所。试剂均为分析纯。硅胶 G板(青岛海洋化工厂分厂 , 20 cm
×20 cm)。
2 方法与结果
2.1 药材基源鉴别 8个品种的药用植物全株均由作者大量采
集于贵州各地 , 并经贵阳中医学院药学系生药教研室董立莎鉴定
为以下品种结果见表 1。
表 1 菝葜属及肖菝葜属中的 8个品种基源鉴定
主产地 品种来源 学名鉴定
贵州平坝 、贵阳 、安顺 小叶菝葜 S.microphyla
贵州贵定 、长顺 、惠水 黑叶菝葜 S.nigrescens
贵州贵阳 、遵义 、余庆 短梗菝葜 S.scobinincaulis
贵州安龙 、兴仁 、贵阳 菝葜 S.china
贵州大方 、毕节 、金沙 托柄菝葜 S.discotis
贵州清镇 、龙里 、晴隆 光叶菝葜 S.glabra
贵州施秉 、雷山 、黎平 柔毛菝葜 S.chingi
贵州兴义 、兴仁 、清镇 短柱肖菝葜 H.yunnanensis
2.2 药材性状鉴别
2.2.1 菝葜(红土茯苓 、金刚藤)根茎为不规则结节状 , 连珠
状 , 或不规则块状 ,长 9 ~ 22 cm, 直径 2 ~ 4 cm。表面灰褐色或黄
棕色 , 外皮脱落处显淡红棕色 ,具多数突起圆锥形须根残基 ,或残
留坚硬弯曲细须根 , 俗称 “铁菱角” , 药材干后表面有较大裂隙。
质坚硬 , 难折断 ,断面呈红棕色 , 在阳光下可见多数类白色点状维
管束及小亮点。切片呈不规则形 ,边缘不整齐 , 粗纤维性 ,常带有
圆锥形钉状须根残基 ,折断时有粉尘飞扬。气微 , 味微涩。
须根坚硬 , 灰褐色至土褐色 , 较细 , 直径约 1 ~ 2 mm, 其表面
有少许细须根。
2.2.2 土茯苓(光叶菝葜)根茎为粗短的圆柱形或不规则条块
状 , 有结节状隆起 ,长约 5 ~ 14 cm, 直径 3.5 ~ 5.5 cm。表面黄褐
色或灰褐色 , 凹凸不平 , 有坚硬的须根残基 , 分枝顶端有圆形芽
痕 , 有时外皮显不规则裂纹 ,并有残留的鳞叶。药材干后 ,表面有
较大的裂缝 , 裂缝长 1 ~ 2 cm, 宽 0.5~ 1 cm。质坚硬 ,难折断 ,断
面淡红棕色 , 粉性 , 可见点状微白色的维管束及多数小亮点(经
水煮后仍然存在)。切片长圆形或不规则形 , 边缘不整齐 , 折断
时有粉尘飞扬。气微 , 味淡 ,涩。
须根较少 , 表面灰褐色至土褐色 , 坚硬 , 长 5 ~ 40 cm, 直径 1
~ 2 mm,较细 ,须根基部有明显的膨大突起 ,须根上带有刺 , 刺与
刺约间隔 1 ~ 2cm。
2.2.3  柔毛菝葜 根茎为不规则圆柱形 , 无分枝 , 长约 10 ~ 16
cm,直径 3 ~ 5.5 cm。表面黄褐色或土灰色 ,凹凸不平 , 有坚硬突
起呈圆锥状的须根残基 , 外皮未见裂纹 , 较光滑。 质地坚硬 , 略
韧 , 断面淡砖红色 ,纤维性 , 粗糙 ,可见点状维管束及多数小亮点。
切片不规则或长圆形 , 边缘不整齐 ,有钉状须根痕 ,折断时有粉尘
飞扬。气微 , 味涩。
须根稀疏 ,较细 , 偶有粗壮 ,长 3 ~ 10cm, 直径 1~ 4mm, 表面
常见栓皮脱落 , 其基部具有明显膨大突起状或刺状须根痕 , 并具
少量小刺。
2.2.4 托柄菝葜 根茎为不规则块状或结节状隆起 , 具较短分
枝 , 长 5 ~ 9cm,直径 1 ~ 4cm。表面黄棕色或砖红色 ,有光泽 , 凹
凸不平 , 其基部为圆锥状突起。质略韧 , 断面类黄色至浅砖红色 ,
可见点状维管束 ,粉性 , 断面的边缘部分有多数小亮点。切片长
圆形或不规则 ,边缘不整齐 , 有的有钉状须根痕 ,折断时有粉尘飞
扬。气微 , 味微涩。
须根灰褐色 ,长 5 ~ 20cm,直径 1 ~ 2 mm,较细 ,上有较多刺
状须根 。
2.2.5 短梗菝葜 根茎较小 , 块状或圆柱形 ,长 2 ~ 5 cm,直径 1
~ 2 cm。表面土褐色至土黄色或灰褐色。根茎顶端有圆形突起 ,
残留的茎基生有密刺。质硬 ,难折断 , 折断时有粉尘飞扬 ,断面类
白色或黄白色 , 粉性。切片为不规则形 , 残留须根较多 ,边缘不整
齐 , 具有极多的须根残基。气微 , 味涩。
须根表面灰褐色 ,长 10 ~ 25cm,直径 1 ~ 2 mm,较细 , 基部无
明显膨大突起 ,但有较多刺状细须根痕 , 外皮有裂纹。
2.2.6 黑叶菝葜 根茎短缩 , 上部茎残基较多 , 表面灰黑色。质
地坚硬 ,断面白色。气微 , 味涩。
须根极多 ,表面灰褐色 , 直径 1 ~ 4 cm, 长 3 ~ 30 cm, 质硬。
2.2.7 小叶菝葜 根茎几乎由密生簇状须根形成短缩的根茎 ,
直径约 8 ~ 10 mm。表面灰褐色或土褐色 , 根茎上部具有较多的
茎残基 。质坚硬 ,干后中间有裂隙;断面黄白色。气微 ,味微涩。
根茎上须根极多 ,表面灰褐色 , 直径约 1 ~ 3 mm, 纤细 , 其上
带有少量刺状细须根痕。
2.2.8 短柱肖菝葜(白土茯苓)根茎为不规则结节状 , 圆柱形 ,
较小 , 长 3 ~ 5 cm, 直径 1 ~ 1.5 cm, 表面灰褐色至灰白色 ,根茎基
部膨大微突起 , 呈圆锥形。药材干后 , 表面出现不同程度的裂缝。
质坚硬 ,难折断 , 断面灰白色或黄白色 , 干后用手摸时略有粉尘 ,
在阳光下断面可清楚地看到白色维管束小点。切片为类圆形 , 不
规则形或多角形 ,边缘不整齐 , 常带有圆锥形的钉状及须根残基。
气微 , 味微甜而涩。
须根较多 ,灰褐色 , 较细 , 直径约 0.3 ~ 1.2 mm, 其上有多数
的细须根。 8个品种药材性状主要鉴别特征见表 2。
2.3 薄层鉴别
2.3.1 对照品的制备 精密称取落新妇苷、白藜芦醇及薯蓣皂苷
元各 5 mg分别于 10ml容量瓶中,用甲醇定容 ,作为对照品溶液(浓
度分别为 0.500 3, 0.500 2, 0.500 4mg·ml-1)。
表 2 红 、白土茯苓类 8个品种药材性状检索表
  1.根茎为圆柱状 ,不规则结节状 ,连珠状 ,或不规则块状 ,须根较少
   2.断面红棕色或黄棕色
    3.分枝顶端有圆形芽痕 ,有残留的鳞叶 土茯苓 S.glabra⋯⋯⋯⋯
    3.分枝顶端无圆形芽痕 ,无残留的鳞叶
     4.根茎为不规则圆柱状 ,无分枝 柔毛菝葜S.chingi⋯⋯⋯⋯
     4.根茎为不规则结节状 ,有分枝
      5.表面灰褐色或黄棕色 ,断面呈红棕色 菝葜 S.china⋯⋯⋯
     5.表面黄棕色或砖红色 ,断面类黄白色至浅砖红色…… ……
      托柄菝葜 S.discotis⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
   2.断面灰白色至黄白色 短柱肖菝葜 H.yunnanensis⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
  1.根茎短缩 ,须根极多
      6.根茎顶端有圆形突起 ,残留的茎基生有密刺………… …
       短梗菝葜 S.scobinincaulis⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
       6.根茎顶端无圆形突起 ,残留的茎基无密刺
        7.表面浅黑色 ,根茎断面白色 黑叶菝葜 S.nigrescens⋯⋯
        7.表面灰褐色 ,根茎的断面黄白色………………………
       ………………………… …………小叶菝葜 S.microphyla
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2.3.2 供试品溶液制备
白藜芦醇样品溶液的制备:分别精密称取 8个品种的根茎及
根(过 24目筛)粗粉各 1 g, 置于 25 ml容量瓶中 , 加甲醇 20 ml,
超声(频率 59 kHz,功率 500 W)提取 20 min, 放冷 , 过滤 , 滤液浓
缩至 1 ml作为供试品(生药浓度为 1g· ml-1)。
薯蓣皂苷元样品溶液的制备:分别精密称取 8个品种的根茎
及根(过 24目筛)粗粉各 5 g, 加乙醇 50 ml,超声处理 30 min(频
率 59 kHz, 功率 500W),滤过 , 滤液加盐酸 5ml, 加热回流水解 2
h,放冷 , 用 40%氢氧化钠溶液调至中性 , 挥干至无醇味 , 残渣加
热水 40 ml使溶解 ,用二氯甲烷振摇提取 2次(40, 30 ml),合并提
取液 , 挥干 ,残渣加甲醇 1 ml使溶解 , 作为供试品溶液(生药浓度
为 5 g· ml-1)。
落新妇苷样品溶液的制备:分别精密称取 8个品种的根茎及
根(过 24目筛)粗粉各 1 g,于 25 ml容量瓶中 ,加甲醇 20ml,超声
(频率 59kHz,功率 500 W)提取 20min, 放冷 ,过滤 , 滤液浓缩至 2
ml作为供试品(生药浓度为 0.5g· ml-1)。
2.3.3 白藜芦醇薄层鉴别 对照品溶液点样量 4 μl, 样品溶液
10 μl, 分别点于同一硅胶 G薄层板上 ,以氯仿 -丙酮 -醋酸 -水
(4∶4∶0.5∶0.2)为展开剂 , 上行展开 15 cm, 取出 ,晾干 , 在 365
nm紫外灯下观察荧光斑点。结果 , 各样品在与对照品相应的位
置出现相同亮蓝色斑点 , 表明贵州产 8个品种中均含有白藜芦
醇。结果见图 1。
1.菝葜 2.土茯苓  3.柔毛菝葜 4.托柄菝葜
5.短梗菝葜 6.短柱肖菝葜  7.黑叶菝葜 8.小叶菝葜 S-白藜芦醇
图 1 白藜芦醇TLC图谱
2.3.4 薯蓣皂苷元薄层鉴别 对照品溶液点样量 7 μl, 样品溶液
20 μl, 分别点于同一硅胶 G薄层板上 , 参照 2005年版《中国药
典》方法 [ 7] ,以环己烷 -醋酸乙酯(4∶1)为展开剂 , 上行展开 15
cm,取出 , 晾干 , 喷以 10%硫酸乙醇溶液 ,在 105℃加热至斑点显
色清晰或在 365 nm下观察。 结果 , 在与对照品色谱相应的位置
上 , 仅有 3个品种显淡紫色斑点 ,即短梗菝葜 , 黑叶菝葜及小叶菝
葜含有薯蓣皂苷元 , 其他 5个品种均未检测出。结果见图 2。
S-薯蓣皂苷元 1.菝葜 2.土茯苓 3.柔毛菝葜
4.托柄菝葜 5.短梗菝葜 6.短柱肖菝葜 7.小叶菝葜 8.黑叶菝葜
图 2 薯蓣皂苷元TLC图谱
2.3.5 落新妇苷薄层鉴别 对照品溶液点样量 10 μl, 样品溶液
20 μl, 分别点于同一硅胶 G薄层板上 ,以甲苯 -醋酸乙酯 -甲酸
(13∶32∶9)为展开剂 , 上行展开 15 cm, 取出 , 晾干 , 在 365 nm
紫外灯下观察荧光斑点。结果 ,各样品在与对照品相应的位置出
现相同黄绿色斑点 ,表明贵州产 8个品种中均含有落新妇苷 。结
果见图 3。
S-落新妇苷  1.菝葜 2.土茯苓 3.柔毛菝葜  4.托柄菝葜
5.短梗菝葜 6.短柱肖菝葜 7.小叶菝葜  8.黑叶菝葜
图 3 落新妇苷 TLC图谱
3 小结
本研究根据对贵州各地大量采集菝葜属及肖菝葜属 8个品
种的根茎及根 , 并综合大样本药材品种的性状特征 ,对药材及饮
片进行了完整详细地性状描述 , 并建立了药材品种间性状检索
表 , 为不同药材品种的性状鉴定提供了参考依据。
据作者大量实地采集及调查研究 ,产于浙江的土茯苓与贵州
产的差异很大 ,浙江产者根茎呈球状 、卵圆状或连珠状生长 ,表面
光滑 , 断面白色 , 而产于贵州者根茎为粗短的圆柱形或不规则条
块状 , 有结节状隆起 , 断面淡红棕色 ,故差异很大。
现行版药典收载的两个品种 , 即菝葜属的菝葜 、土茯苓贵州
产者药材断面均为红棕色至淡红棕色 ,故菝葜在贵州地方标准上
称红土茯苓 , 而肖菝葜属的短柱肖菝葜在贵州地方标准收载中称
白土茯苓 [ 3] , 因药材断面为类白色。 而我们在全国药材品种调
查的结果是 , 产于广东的土茯苓饮片断面为淡红棕色 , 湖南产者
断面为类白色 , 四川产者断面为类白色或淡棕色 , 而全国各地产
的菝葜饮片断面者均为红棕色。这些断面为类白色的市售商品
药材土茯苓是否为《中国药典》收载的光叶菝葜 S.glabra这个品
种 , 有待于进一步的深入研究后并将陆续报道。
菝葜在 2005年版《中国药典》中是以薯蓣皂苷元作为薄层
鉴别及含测指标的 , 而作者参照 《中国药典》方法进行了薄层鉴
别研究 ,为了能较清楚观察到斑点 , 故将样品的点样量增加为 20
μl,结果 , 贵州产 8个品种的根茎及根中仅有 3个品种含有薯蓣
皂苷元 ,即短梗菝葜 , 黑叶菝葜及小叶菝葜 , 而菝葜 、土茯苓等 5
个品种均未检测出。而白藜芦醇及落新妇苷在 8个品种中均含
有。各品种间指标性成分的含量及药效有否关联性 ,有待于更深
一步的研究并陆续报道。
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