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不同移栽基质对莲瓣兰试管苗影响的研究



全 文 :不同移栽基质对莲瓣兰试管苗影响的研究
李海峰 1 ,赵志莲1, 2 ,刘光明1  (1.大理学院药学院,云南大理 671000;2.云南省大理农业学校 ,云南大理 671003)
摘要 [目的 ]研究不同移栽基质配比对莲瓣兰试管苗移栽成活率的影响 ,为莲瓣兰试管苗移栽提供理论依据。 [方法] 以莲瓣兰组织
培养生根试管苗为试验材料 ,采用正交试验设计研究不同移栽基质的种类和配比对莲瓣兰试管苗移栽的影响。 [结果 ] 影响莲瓣兰试
管苗移栽基质效果的各因素作用大小为栗树叶 >红仙土 >碎树皮 >珍珠岩 , 以栗树叶∶红仙土为 4∶1配比的移栽基质成活率最高 , 根生
长情况最好。 [结论] 栗树叶∶红仙土为 4∶1配比的移栽基质可以作为莲瓣兰试管苗移栽基质。
关键词 莲瓣兰;试管苗;移栽基质;正交试验设计
中图分类号 S682.31  文献标识码 A  文章编号 0517-6611(2009)21-09950-02
StudyonEffectsofDiferentTransplantationMediumonTest-tubePlantletofCymbidiumtorliseplum
LIHai-fengetal (ColegeofPharmacy, DaliUniversity, Dali, Yunnan671000)
Abstract [ Objective] Theaimwastoresearchtheefectsofdiferenttransplantationmediumratiosontransplantingsurvivalrateoftest-tube
plantletofCymbidiumtorliseplum.[ Method] TakingrootingplantletofCymbidiumtorliseplumastestmaterial, theefectofdiferenttransplan-
tationmediumtypesandratiosontransplantingoftest-tubeplantletofCymbidiumtorliseplumwasresearchedbyusingorthogonaltestdesign.
[ Result] TheeffectontransplantationmediumofCymbidiumtorliseplumplantletischestnutleaves>Hongxiansoil>shreddedbark>perlite,
thehighestsurvivalrateoftransplantationmediumproportionischestnutleaves∶Hongxiansoil(4∶1), thegrowthconditionofrootisbest.
[ Conclusion] Theproportionofchestnutleaves∶Hongxiansoil(4∶1)canbeusedfortransplantationmediumofCymbidiumtorliseplum
plantlet.
Keywords  Cymbidiumtorliseplum;Plantlet;Transplantationmedium;Orthogonaltestdesign
基金项目 云南省大理州科技局 2008年资助项目。
作者简介 李海峰(1971-),男 ,白族 ,云南大理人 ,副教授 , 从事植物
组织培养及药用植物次生代谢产物研究。
收稿日期  2009-04-07
  莲瓣兰(Cymbidiumtorliseplum)别名小雪兰 ,是兰科(Or-
chidaceae)主要分布在云南滇西北三江并流区的温带性地生
兰 [ 1] ,具有很高的观赏价值和经济价值。但由于全球 “兰花
热 ”和经济利益的驱使 ,从 20世纪 80年代至今 ,野生莲瓣兰
种质资源遭到了毁灭性破坏 ,野生种质资源已经濒临灭绝 。
研究莲瓣兰植物组织培养技术 ,将对莲瓣兰的快速繁殖 、品
种复壮 、加快优良品种的培育 、挽救珍稀濒危品种等方面起
重要作用;还能从根本上解决莲瓣兰依靠传统分株繁殖过程
中引起的繁殖率低 、易受病毒感染造成的品种退化等问题;
对拯救珍稀濒危莲瓣兰野生植物种质资源具有特别重要的
意义 。笔者经过多年研究建立了莲瓣兰组织培养快速繁殖
体系 ,但研究过程中发现 ,按照常规试管苗移栽方法进行移
栽 ,莲瓣兰试管苗移栽成活率极低。为此 ,笔者利用正交试
验设计对莲瓣兰试管苗移栽基质的种类和配比进行研究 ,为
莲瓣兰试管苗移栽提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料 供试材料为莲瓣兰 “苍江大雪素 ”(Cym-
bidiumtorliseplum“cangjiangdaxuesu”)芽诱导分化出的组
织培养生根试管苗 ,苗龄 60d。试验于 2008年 4月在大理学
院药学院药物研究所温室中进行。
1.2 移栽基质 将莲瓣兰试管苗移栽到栗树叶 、碎树皮 、
珍珠岩和红仙土 4种不同配比的生根移栽基质上 ,每个因素
取 3个水平。因素水平设计见表 1,采用 L9 (3)4 [ 2]正交试验
设计 ,考察不同基质水平对莲瓣兰试管苗移栽成活率的影
响 ,以筛选出最佳移栽基质种类和配比。
1.3 移栽方法 将苗龄为 60 d的莲瓣兰组织培养生根试
管苗从培养室移到温室中 ,放置在光照强度 3 000 ~ 5 000lx
的条件下进行炼苗 7 d,打开瓶盖加少量自来水继续炼苗 3 d
后 ,再用镊子小心取出试管苗 ,自来水洗净根部粘带的培养
基 ,在阴凉处晾干水滴准备移栽。移栽时选择苗高 5 ~ 6 cm、
根长 2~ 3 cm、根数 2 ~ 3条 、叶数 3 ~ 4片且生长均匀一致的
试管苗 。移栽前再用适宜浓度的莲瓣兰共生菌悬浮液浸根
8 ~15 min,然后移栽到 AK9-空气整根育苗盆 ,每处理 100
株 , 3次重复。
表 1 正交试验 L9(3)4因素水平
 Table1  FactorsandlevelsofL9(3)4orthogonalexperiment 份
水平Level
因素 Factors
A栗树叶Chestnutleaves
B碎树皮Shreddedbark
C珍珠岩Perlite
D红仙土Hongxiansoil
1 1 0 0 0
2 2 1 0.5 1
3 4 2 1.0 2
1.4 移栽后管理 将移栽好的试管苗转移到模拟野生莲
瓣兰生长的生态环境的温室阴棚内 ,每天给予 8 ~ 10 h的散
射光照 ,光照强度 10 000 ~ 15 000 lx,每天早晚喷水浇灌 2
次 ,保持栽培环境湿度在 80% ~ 90%。移栽 60 d后统计试
管苗移栽成活率及生根情况 。
2 结果与分析
2.1 正交试验结果分析 由表 2可知 ,移栽基质 A(栗树
叶)和因子 D(红仙土)对莲瓣兰试管苗移栽成活率影响较
大 ,从 K值大小分析各因子对莲瓣兰试管苗移栽成活率影响
的主次顺序是:因子 A﹥因子 D﹥因子 B﹥因子 C,结果表
明栗树叶对莲瓣兰试管苗生根有重要影响 ,红仙土的影响比
碎树皮大 ,珍珠岩影响最小。
2.2 方差分析  为了进一步反映各因子之间的差异 ,以便
寻求最佳水平 ,对表 2的结果进行方差分析可知:因子 A(栗树
叶)和因子 D(红仙土)作用极显著 ,因子 B(碎树皮)和因子 C
(珍珠岩)作用不显著。 4种移栽基质对莲瓣兰试管苗移栽成
活率作用大小依次是:栗树叶﹥红仙土﹥碎树皮﹥珍珠岩。
责任编辑 陈秀晨 责任校对 况玲玲安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2009, 37(21):9950-9951
表 2 移栽基质配方正交试验因素水平及生根情况
Table2 Thefactorsandlevelsoftheorthogonalexperimentfortheformulaoftransplantingmediumandtherootingsituations
试验号
TestNo.
因子水平Factorsandlevels
A B C D
生根数 //株
Rootingnumber
无根数 //株
Numberwithoutroot
成活率//%
Survivalrate
平均根数 //条
Averagerootnumber
平均根长//cm
Averagerootlength
1 1 0 0 0 26 274 8.7 1.6 2.8
2 1 1 0.5 1 92 208 30.7 2.3 3.2
3 1 2 1.0 2 71 229 23.7 2.1 3.1
4 2 0 0.5 2 244 56 81.3 3.1 7.8
5 2 1 1.0 0 146 154 48.7 2.4 3.5
6 2 2 0 1 243 57 81.0 3.1 7.2
7 4 0 1.0 1 247 53 82.3 3.8 8.1
8 4 1 0 2 245 54 81.7 3.2 7.4
9 4 2 0.5 0 71 229 23.7 2.2 2.8
K1 21.03 57.43 57.13 27.03
K2 70.33 53.70 45.23 64.67
K3 62.57 42.80 51.57 62.23
R 49.30 14.63 11.90 37.63
2.3 不同因素配比 最佳水平的选择 由表 2可知 ,莲瓣兰
试管苗移栽基质的最佳配比是:A2B1C1 D2(栗树叶∶碎树皮∶珍
珠岩∶红仙土 =4∶0∶0∶1)。用栗树叶∶红仙土为 4∶1的移栽基
质进行试验 ,得出莲瓣兰试管苗移栽成活率达 85.28%,生根
情况明显优于 A2B1C2 D2 (栗树叶∶碎树皮∶珍珠岩∶红仙土 =
4∶0∶1∶1),由此证明了试验所得结论的正确性。
3 结论与讨论
  影响试管苗移栽成活率的主要因素有基质透气性 、保湿
性 、酸碱度和养分等因子 [ 3] ,通过正交试验分别对不同的影
响因子进行试验 ,筛选出莲瓣兰试管苗移栽的最佳基质为栗
树叶∶红仙土为 4∶1,在此条件下莲瓣兰移栽成活率达
85.28%,平均根数 4.3条 ,平均根长 8.2 cm。这个结果与莲
瓣兰产地利用栗树叶作为主要栽培基质的实践结果相吻合。
栗树叶适宜莲瓣兰肉根共生活性菌的生长与繁殖;红仙土对
莲瓣兰试管苗生根影响比碎树皮大 ,碎树皮是大花惠兰 、蝴
蝶兰和卡特兰等热带性附生兰 [ 4]的主要移栽基质 ,但碎树皮
不利于莲瓣兰试管苗生根 ,红壤是莲瓣兰原产地的主要土壤
类型 ,红壤也可能是适宜莲瓣兰肉根共生活性菌生长的主要
土壤类型;珍珠岩不利于莲瓣兰试管苗生根 ,主要原因是珍
珠岩保水性太强 ,湿度过高易造成莲瓣兰肉根共生活性菌死
亡 ,从而导致试管苗肉根得不到营养物质而腐烂。因此 ,莲
瓣兰试管苗移栽除受基质透气性 、保湿性 、酸碱度和养分等
因子影响外 ,基质是否有利于莲瓣兰肉根共生活性菌的生长
与繁殖也是重要的影响因子。
  莲瓣兰试管苗的移栽是莲瓣兰组织培养的难点 ,移栽成
活率的高低关系到莲瓣兰组织培养大量增殖的成败 。该试
验只对莲瓣兰试管苗移栽基质进行优选研究 ,初步筛选出移
栽基质 ,而对试管苗生根培养基成分 、过渡培养时间 、光照强
度 、温度 、湿度 、莲瓣兰肉根共生真菌等影响因子的研究还有
待于进一步试验。
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策上加大对自主知识产权的重视与保护;建立自主知识产权
风险投资体系;发挥政府的舆论引导作用;建立健全专为保
护自主知识产权的各种配套服务体系 ,如专业代理所 、专业
律师所 、专业交易所等。
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995137卷 21期                李海峰等 不同移栽基质对莲瓣兰试管苗影响的研究