全 文 ：酸性染料比色法测定虎耳草素片
中马来酸氯苯那敏的含量
银雪花　阳利龙
湖南省儿童医院药剂科 (长沙市　410007)
郭丙炎
湘潭市药品检验所 (长沙市　411000)
摘　要　目的:为了进一步控制虎耳草素片的质量 , 为今后制定质量标准提供
参考 。方法:利用酸性染料比色法测定虎耳草素片中马来酸氯苯那敏的含量。测得
平均回收率为 100.1%, RSD为 1.1%(n=6)。测定方法简便 、 快速 、 准确 , 可做
为该药的质量控制方法。
关键词　酸性染料比色法　虎耳草素片　马来酸氯苯那敏
　　虎耳草素片主要成份为虎耳草素
(125mg)及马来酸氯苯那敏 (2mg), 该药
具有镇咳祛痰作用 , 用于治疗慢性支气管。
在部颁标准中有收载但无马来酸氯苯那敏含
量测定方法 , 由此 , 我们利用溴麝香草酚蓝
溶液与马来酸氯苯那敏生成黄色络合物 , 以
苯提取比色 , 建立酸性染料比色法测定虎耳
草素片中马来酸氯苯那敏的含量。
的实验中 , 为了良好的灵敏度与准确度 , 我
们除了注意取量要准 , 器材必须干净 , 控制
反应温度 , 以及减少 “慢反应” 的影响外 ,
还要注意选择组分含量适当的试剂盒 , 因为
BCG浓度对试剂空白和白蛋白测定准确度均
有明显影响 , 而 Brij-35或其它表面活性剂
的浓度可影响试剂的灵敏度或稳定性。白峰
等[ 2] 的实验结果表明 , 当 BCG 浓度为
0.158g/L 时 , 空白吸光值达 0.44 已不适于
测定 , 而 BCG浓度低于 0.09g/L时不准确度
大于 5.28%;所以他们建议 BCG 的浓度以
0.105g/L 为宜。根据白峰等[ 2] 的实验结果
及几种推荐方法的试剂配方 , 当琥珀酸浓度
在 5.60—8.90g/L , PH 在 4.20±0.05 、 BCG
浓度在 0.052—0.105g/L 内时 , Brij-35 的
浓度最好是 BCG浓度的 11倍 , 这样可确保
得到与 DoumasBCG 法相似的准确度 , 不同
单位的实验室 , 应根据本身的实际情况 , 选
择适合自己的试剂盒 , 力求良好的准确度。
参考文献
[ 1] 叶应妩 , 王毓三主编.全国临床检验操作规
程.南京:东南大学出版社 1991 , 147—148
[ 2] 白峰 , 赵海舰 , 徐建平.溴甲酚绿浓度对血清
白蛋白测定的影响.中华医学检验杂志 1994 ,
17:268
[ 3] 叶应妩 , 王毓三主编.全国临床检验操作规
程.第二版.南京:东南大学出版社 1997 ,
157—158
[ 4] 陈人骏 , 邹国祺 , 邱曙卿等.常用医学检验.
江西:江西省高校出版社 1993 , 3-70-3-72
32
湖南医学高等专科学校学报　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　2000年第 2卷第 3期
1　仪器和试剂
7541紫外分光光度计　7530紫外分光
光度计 (上海分析仪器厂)　PHS—25型酸
度计 (上海雷磁仪器厂)
马来酸氯苯那敏对照品 　批号 0047—
9603　中国药品生物检定所提供
溴麝香草酚蓝溶液 PH 为 7.9 (精密称
取溴麝香草酚蓝65mg , 置250ml量瓶中 , 精
密加入 0.1mol/L 柠檬酸溶液 6.75ml , 用
0.2mol/L 磷酸氢二钠溶液加至刻度 , 摇匀 ,
即得 。)
其余试剂均为分析纯 。
2　实验条件的选择
2.1　吸收光谱的测定　精密称取 105℃干燥
至恒重的马来酸氯苯那敏 20mg , 置200ml量
瓶中 , 用 0.1mol/L 盐酸溶液溶解后加至刻
度 , 摇匀 , 得对照品溶液 , 再精密量取对照
品溶液 30ml , 置 100ml量瓶中 , 加 0.1mol/L
盐酸溶液稀释至刻度 , 摇匀 , 再精密量取上
述溶液 1.5ml , 置具塞离心管中 , 精密加入
溴麝香草酚蓝溶液 1.5ml , 精密加入苯 5ml ,
振摇 5min , 离心 (2000r·min-1)5min , 吸
取上层苯液 , 以 0.1mol/L 盐酸溶液 , 按同
法操作所提的苯液为空白 , 照分光光度法
(中国药典二部 1995版附录 IVB), 在 300—
500nm波长范围内扫描 , 结果在 406±1nm
的波长处有最大吸收。同法分别测定虎耳草
素片和虎耳草素原料的苯提取液的吸收光
谱 , 结果虎耳草素片溴麝香草酚蓝络合物苯
萃取后的吸收光谱与标准溶液相同 , 虎耳草
素原料在 300—500nm 波长范围内几乎无吸
收 , 对测定结果无干扰。见图 。
马来酸氯苯那敏溴麝香草酚蓝络合物的吸收光谱
1　马来酸氯苯那敏对照品　2　虎耳草素片　3　虎耳草素原料
2.2　溴麝香草酚蓝溶液的 PH 值 　取溴麝
香草酚蓝分别加 PH7.6 、 PH7.8 、 PH7.9 、
PH8.0的缓冲液配成 0.026%的溶液。精密
量取上述溶液各 1.5ml , 分别加马来酸氯苯
33
湖南医学高等专科学校学报　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　2000年第 2卷第 3期
那敏对照品稀释液 1.5ml , 按吸收光谱的测
定项下操作。结果表明溴麝香草酚蓝溶液
PH7.9时吸收值最大。(见表 1)
表1　溴麝香草酚蓝溶液 PH 与吸收值的关
系
溴麝香草酚
蓝溶液 PH 7.6 7.8 7.9 8.0
吸收值 0.154 0.448 0.501 0.450
2.3　溴麝香草酚蓝溶液的用量　精密量取
PH7.9溴麝香草酚蓝溶液 1.1 、 1.3 、 1.5 、
1.7 、 1.9ml , 分别加入马来酸氯苯那敏对照
品稀释液 1.5ml , 按吸收光谱的测定项下操
作 , 结果表明溴麝香草酚蓝溶液用量以
1.5ml为宜 。(见表 2)
表2　溴麝香草酚蓝溶液的用量与吸收值的
关系
溴麝香草酚蓝溶液的用量 1.1 1.3 1.5 1.7 1.9
吸收值 0.399 0.490 0.501 0.456 0.416
2.4　呈色物的稳定性　取吸收光谱的测定
项下的苯提取液在 0.5 、 1 、 1.5 、 2h测定吸
收度 , 结果几乎无变化。
3　测定方法与结果
3.1　标准曲线的制绘　精密量取上述对照
品溶液 10 、 20 、 30 、 40 、 50ml分别置 100ml
量瓶中 , 加0.1mol/L 盐酸溶液稀释至刻度 ,
摇匀 , 精密量取上述溶液 1.5ml , 照吸收光
谱的测定项下的方法 , 自 “置具塞离心管
中” 起 , 在406nm波长处测定吸收度。数据
处理得回归方程 A=0.003056+0.04776C , r
=0.9996 , 表明马来酸氯苯那敏浓度在 3—
16ug/ml范围内呈良好的线性关系 。
3.2　样品测定　取样品 10片 , 精密称定 ,
研细 , 精密称取适量 (约相当于马来酸氯苯
那敏 4mg)置 200ml量瓶中 , 加 0.1mol/L盐
酸溶液至刻度 , 充分振摇后 , 超声处理 30
分钟 , 滤过 , 弃去初滤液 , 精密吸取续滤液
1.5ml , 照吸收光谱测定项下的方法 , 自
“置具塞离心管中” 起在 406nm 波长处测定
吸收度。根据回归方程计算样品的含量 。结
果见表 3。
表 3　样品含量测定结果
样品批号 马来酸氯苯那敏含量(相当于标示量%±RSD n=3)
990801 100.2±0.4
991021 107.2±0.6
000121 102.3±0.5
000305 103.0±0.3
3.3　回收率试验　模拟虎耳草素片剂处方 ,
称取辅料和虎耳草素并精密称定的处方量的
马来酸氯苯那敏对照品 , 依上法测出马来酸
氯苯那敏的量 , 计算 6 次平均回收率为
100.1±1.1%。
4　讨论
4.1　本文报道酸性染料比色法测定虎耳草
素片中马来酸氯苯那敏的含量 , 方法简便 ,
快速 、 准确 , 平均回收 100.1%、 RSD 为
1.1%(n=6), 可满足含量测定要求 。鉴于
在部颁标准中马来酸氯苯那敏含量未作规
定 , 再从上述 4 批样品的含量测定结果来
看 , 含量差异较大 , 为进一步完善其质量标
准 , 有利于全面控制药品质量 , 建议部颁标
准再版时予以增补 。
4.2　本方法选用溴麝香草酚蓝为最佳 , 配
成浓度为 0.026%柠檬酸—磷酸氢二钠的溶
液 (PH7.9)与马来酸氯苯那敏形成的黄色
络合物显色完全且最稳定 。
参考文献
[ 1] 卫生部药品标准.化学药品及制剂 [ M] , 第
一册.北京:人民卫生出版社 1989 , 89
[ 2] 中国药典 (二部)[ S] 1995 年版.北京:化学
工业出版社 , 广东科技出版社 1995
34
湖南医学高等专科学校学报　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　2000年第 2卷第 3期