全 文 ：上海中医药杂志 2012 年第 46 卷第 4 期 SH． J． TCM Apr．，2012;Vol． 46 No． 4
大孔吸附树脂纯化东北铁线莲总黄酮的工艺研究
王晓林，钟方丽，刘延超，薛健飞
吉林化工学院化学与制药工程学院(吉林 吉林 132022)
【摘要】 目的 筛选适合纯化东北铁线莲总黄酮的大孔吸附树脂工艺。方法 采用静态吸附 /解吸与动态吸附 /解吸相结合的方
法，以解吸率为主要指标考察各因素对东北铁线莲总黄酮大孔吸附树脂纯化工艺的影响。结果 6 种树脂中 D-10l型大孔吸附树脂
最适合纯化东北铁线莲总黄酮，其最佳工艺为:上样药液东北铁线莲总黄酮浓度相当于原生药 0． 2 g /ml，吸附速率为 2 BV /h，解吸液
乙醇浓度为 95%，解吸速率为 2 BV /h，最佳上柱药液 pH值为 4，洗脱剂用量为 8 倍柱体积。经大孔吸附树脂分离纯化后，东北铁线
莲总黄酮的纯度由8． 39%提高到 24． 66%。结论 D-10l型大孔吸附树脂对东北铁线莲总黄酮具有较好的纯化效果。
【关键词】 东北铁线莲;大孔树脂;总黄酮;纯化
【中图分类号】 R284． 4 【文献标志码】 A 【文章编号】 1007-1334(2012)04-0080-06
Purification technology of total flavonoids in Clematis florida Thunb． with macroporous resin
method
WANG Xiao-lin，ZHONG Fang-li，LIU Yan-chao，XUE Jian-fei
School of Chemistry and Pharmaceutical Engineering，Jilin Institute of Chemical Technology
Abstract: Objective To establish the optimum purification conditions of total flavonoids in Clematis florida Thunb． with macroporous resin method． Methods
The technological conditions of purification were examined by the static adsorption and desorption experiments as well as dynamic adsorption and desorption tests，
and took desorption rate as the main indicator． Results Total flavonoids in Clematis florida Thunb． could be well purified with D-101 macroporous resin． On the
condition that the concentration of total flavonoids was equal to the 0． 2 g /ml raw material，the adsorption rate was 2 BV /h，concentration of ethanol was 95%，de-
sorption rate was 2 BV /h，and the pH value was 4，the content of eluant was 8 times of the raw material． After purified with macroporous resin method，the purity
of Clematis florida Thunb． was improved from 8． 39% to 24． 66% ． Conclusion The results showed that total flavonoids in Clematis florida Thunb． can be well
purified with D-101 macroporous resin．
Keywords: Clematis florida Thunb．;macroporous resin;total flavonoids;purification
［基金项目］吉林化工学院重点计划项目
［作者简介］王晓林，男，硕士，副教授，主要从事天然产物有效
成分的提取及纯化工艺研究。
［通讯作者］钟方丽，教授，硕士生导师
E-mail:fanglizhong@ sina． com
东北铁线莲(Clematis manshurica Rupr．)是毛茛
科铁线莲属多年生蔓生草本植物，其干燥根及根茎入
药，别名威灵仙，广泛分布于东北三省［1］。张海丰
等［2-4］对东北铁线莲的化学成分进行了研究，结果表
明，东北铁线莲主要含有黄酮、皂苷、挥发油、木脂素
及香豆素类等化学成分。东北铁线莲能祛风除湿、通
络止痛，主要用于风湿痹痛、肢体麻木、筋脉挛急、屈
伸不利等症［5］。药理研究表明东北铁线莲具有抗肿
瘤、抗菌、抗炎、镇痛、抗利尿、抗疟、降血糖、降血压、
利胆等作用［6-7］。
大孔吸附树脂是一种多孔性的高分子材料，具有
多孔性和较大的比表面积，主要通过物理作用从溶液
中有选择地吸附有机物质，从而达到分离纯化的目的。
D-101 型大孔树脂为非极性树脂，适用范围比较广泛，
已成功应用于桑叶、山楂、槐角、滁菊花等黄酮类成分
的分离纯化［8］，而有关东北铁线莲总黄酮纯化工艺的
研究尚未见报道，因此本实验针对 6 种不同型号的大
孔树脂进行了纯化东北铁线莲总黄酮的筛选，并对 D-
101 型大孔树脂纯化东北铁线莲总黄酮的工艺条件进
行了优化，以期为开发和利用东北铁线莲总黄酮提供
依据。
1 材料
1． 1 药物与试剂 东北铁线莲:购于安徽省亳州市华
申药业有限公司，经吉林化工学院药学系鉴定为毛茛
科铁线莲属植物东北铁线莲(Clematis manshurica Ru-
pr．)的根。
实验试剂:甲醇、乙醇、三氯化铝、盐酸、醋酸、醋酸
钠，天津大茂化学试剂厂生产;芦丁，中国药品生物制
品检定所生产;水为重蒸馏水。
大孔吸附树脂:LSA-21 型、LSA-10 型、AB-8 型、
LX-36 型、D-101 型、LSA-33 型，购自西安蓝晓科技有限
·08·
上海中医药杂志 2012年第 46卷第 4期 SH． J． TCM Apr．，2012;Vol． 46 No． 4
公司。
1． 2 仪器 752N 型紫外可见分光光度计，上海精密
科学仪器有限公司生产;R-52AA 旋转蒸发仪，上海亚
荣生化仪器厂生产;SHZ-D 型循环水真空泵，河南省巩
义市英峪仪器一厂生产;CS101-AB 型电热鼓风干燥
箱，中国重庆实验设备厂生产;JY2002 型电子天平，上
海精密科学仪器有限公司生产。
2 方法
2． 1 预处理 东北铁线莲提取液的准备:取干燥的东
北铁线莲适量，粉碎，称取 50 g，加 10 倍量 70%乙醇加
热回流提取 2 次，每次 2 h，过滤，合并滤液，减压浓缩
至适量，转移至 250 ml 容量瓶中，蒸馏水定容至刻度，
摇匀，待用。
大孔吸附树脂的预处理:取大孔吸附树脂 LX-36、
LSA-33、LSA-10、D-101、AB-8、LSA-21 各 50 g 加入柱
内，先以 95%乙醇连续洗涤数次(约 2 h) ，至流出液加
水(1∶ 5)不混浊为止，后用蒸馏水洗至无醇味，然后用
5%HCl浸泡 4 h后以 4 ～ 6 BV /h的流速洗涤 2 h，再用
蒸馏水洗至中性，最后用 2% NaOH 溶液浸泡 6 h 后以
4 ～ 6 BV /h 洗涤 2 h，再用蒸馏水洗至中性，抽滤至干，
置于密闭容器中，备用［9］。
2． 2 总黄酮含量的测定
2． 2． 1 对照品溶液的制备 精密称取在 120 ℃下干
燥至恒重的芦丁对照品 0． 020 g［10］，加无水乙醇溶解并
定容至 100 ml 容量瓶中，摇匀，即得浓度为 0． 20 g /L
的对照品溶液。
2． 2． 2 供试品溶液的制备 称取 25 g 东北铁线莲药
粉，置 1 000 ml圆底烧瓶中，加入 70%乙醇，加热回流
提取 2 次，每次 2 h，过滤，合并 2 次提取液，减压浓缩，
然后转移至 250 ml 容量瓶，以蒸馏水定容至刻度，摇
匀，即得供试品溶液。
2． 2． 3 检测波长的选择 吸取芦丁对照品溶液和供
试品溶液各 2 ml 于 50 ml 容量瓶中，各加入三氯化铝
溶液(0． 1 mol /L)1． 0 ml，摇匀，各加入醋酸 /醋酸钠缓
冲溶液(pH = 5． 2)1． 0 ml，40 ℃恒温水浴中显色 10
min后，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，以相应试剂为空
白，在 200 ～ 600 nm范围内进行波长扫描，结果对照品
溶液在 414 ～ 422 nm 范围内出现最大吸收，供试品溶
液在414 nm有最大吸收，由此确定检测波长为 414 nm。
2． 2． 4 标准曲线的制备 精密吸取芦丁对照品溶液
1． 0、2． 0、3． 0、4． 0、5． 0、6． 0 ml，分别置于 25 ml 的容量
瓶中，各加入三氯化铝溶液(0． 1 mol /L)1． 0 ml，摇匀，
各加入醋酸 /醋酸钠缓冲溶液(pH = 5． 2)1． 0 ml，40 ℃
恒温水浴中显色 15 min 后［11］，加蒸馏水稀释至刻度，
摇匀，以相应的试剂为空白，于 414 nm 处测定吸光度
A。进行线性回归，得回归方程:A = 28． 561C － 0． 024 5
(C:g /L) ，r = 0． 999 6，结果表明芦丁在 8． 0 ～
48． 0 mg /L范围内呈良好的线性关系。
2． 2． 5 精密度试验 吸取标准曲线制备项下浓度为
0． 024 g /L的芦丁对照品溶液 1． 0 ml，按“2． 2． 4”项下
方法连续测定 6 次吸光度，记录数据，结果 RSD 为
0． 67 %。
2． 2． 6 稳定性试验 吸取供试品溶液 1． 0 ml，按
“2． 2． 4”项下方法，分别于配制后 0、10、20、40、60、80、
100、120 min 测定吸光度，RSD 为 1． 08%，结果表明供
试品溶液随放置时间的延长，吸光度值略有上升趋势，
但在试验条件下 120 min 内供试品溶液的浓度仅上升
2． 55%，可满足测定要求。
2． 2． 7 重复性试验 取同一批东北铁线莲药粉 5 份，
按“2． 2． 2”项下的制备方法制备供试品溶液，按
“2． 2． 4”项下方法测定吸光度，结果 RSD为 0． 54%。
2． 2． 8 加样回收率试验 称取已知含量(7． 89 mg /g)
的东北铁线莲药粉约 1． 25 g ，共 5 份，精密称定，分别
精密加入芦丁对照品适量，置 100 ml圆底烧瓶中，加入
70%乙醇，加热回流提取 2 次，每次 2 h，过滤，合并 2 次
提取液，减压浓缩，然后转移至 25 ml容量瓶中，以蒸馏
水定容至刻度，摇匀，即得供试品溶液，吸取上述供试
品溶液 1． 0 ml，置于 50 ml的容量瓶中，按“2． 2． 4”项下
方法测定吸光度，结果平均回收率为 99． 81%，RSD 为
1． 43%(表 1)。
表 1 回收率实验结果
取样量(g) 样品含量(mg) 对照品加入量(mg) 测得总量(mg) 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%)
1． 26 9． 94 10． 02 20． 15 101． 90
1． 27 10． 02 10． 12 20． 11 100． 70
1． 26 9． 94 9． 92 19． 76 98． 99 99． 81 1． 43
1． 25 9． 86 9． 87 19． 59 98． 58
1． 25 9． 86 9． 88 19． 63 98． 89
2． 3 样品含量测定 取样品液、吸附后液及解吸液各
适量，置于容量瓶中，照“2． 2． 4”项下的方法，依法于
414 nm处测定吸光度，以相应的试剂为空白。从标准
曲线上读出供试品溶液中芦丁的量，计算，即得。供试
品中总黄酮的量以芦丁计算。
·18·
上海中医药杂志 2012 年第 46 卷第 4 期 SH． J． TCM Apr．，2012;Vol． 46 No． 4
3 结果与讨论
3． 1 树脂静态吸附及解吸的考察 取处理后树脂 LX-
36、LSA-33、LSA-10、D-101、AB-8、LSA-21 各 1 g ，加入
到 100 ml 具塞三角瓶中，加入 40 ml 总黄酮浓度为
1． 1861 g /L的东北铁线莲提取液，每 10 min 振摇 1 次
约 30 s，共 2 h，静止 48 h，滤过。分别吸取各树脂吸附
后的药液 1． 0 ml，在 414 nm处测定吸光度 A，计算各树
脂对东北铁线莲总黄酮的吸附率，将静态吸附的树脂
抽滤至干，室温条件下，加入 100 ml 75%乙醇解吸，每
10 min振摇 1 次 30 s，持续 2 h，静置 48 h，过滤。［12］分
别取各解吸液 0． 5 ml，于 414 nm处测定吸光度 A，计算
各种树脂对东北铁线莲总黄酮的解吸率，6 种不同型号
的树脂在相同条件下，经过 48 h的静态吸附及解吸，分
别计算出其对东北铁线莲总黄酮的静态吸附率和解吸
率(表 2)。
表 2 6 种大孔树脂对东北铁线莲总黄酮的吸附率与解吸率
树脂种类 吸附后药液 C1(g /L) 吸附率(%) 解吸液 C2(g /L) 解吸率(%)
LX-36
LSA-33
LSA-10
D-101
AB-8
LSA-21
0． 195 9
0． 199 4
0． 210 3
0． 206 4
0． 222 5
0． 208 9
83． 48
83． 19
82． 27
82． 60
81． 24
82． 88
0． 142 5
0． 146 0
0． 197 8
0． 207 6
0． 176 1
0． 183 8
35． 98
36． 99
50． 68
52． 98
45． 69
47． 02
从表 2 可以看出，6 种树脂的静态吸附率相差不
大，但解吸率差别显著，LX-36、LSA-33 的解吸率均低于
45%，其余 D-101、AB-8、LSA-10 和 LSA-21 四种树脂的
解吸率均高于 45%，所以选择 D-101、AB-8、LSA-10 和
LSA-214 种树脂进行进一步研究。各指标的计算公式
如下［13］:吸附率% =［(C0 － C1)/ C0］× 100%;解吸
率% ={ (V2C2)/［V1 ×(C0 － C1) ］}× 100% ;纯度%
=(m2 / m1)× 100%
式中:C0 －起始样品液中总黄酮浓度，g /L;C1 －吸
附 48 h后溶液中总黄酮浓度，g /L;C2 －解吸液中总黄
酮浓度，g /L;V1 － 样品液体积，ml;V2 － 解吸液体积，
ml;m1 －解吸液干燥后固体的称样量，mg;m2 －解吸液
中总黄酮的测定量，mg。
3． 2 动态吸附及动态解吸的考察 取处理后树脂 D-
101、AB-8、LSA-10、LSA-21 各 3 g，湿法上柱，分别加入
30 ml总黄酮浓度为 1． 351 1 g /L的东北铁线莲总黄酮
提取液，以 2 BV /h 的流速进行动态吸附，收集吸附后
的溶液，于 414 nm处测定吸光度，再用 50 ml 75%乙醇
以 2 BV /h 的流速进行动态解吸，分别收集各解吸液，
于 414 nm处测定吸光度。4 种不同型号的树脂在相同
条件下，经过动态吸附及解吸，分别计算出其对东北铁
线莲总黄酮的动态吸附率和解吸率(表 3)。
表 3 4 种树脂对东北铁线莲总黄酮的动态吸附与解吸率
树脂种类 吸附后药液 C1(g /L) 解吸液 C2(g /L) 吸附率(%) 解吸率(%)
LSA-10 0． 550 2 0． 264 8 61． 99 50． 58
AB-8 0． 716 4 0． 169 4 48． 74 41． 16
D-101 0． 507 5 0． 299 8 63． 69 56． 90
LSA-21 0． 729 6 0． 088 8 49． 60 42． 99
由表 3 可以看出，在所考察的树脂中，D-101 型大
孔吸附树脂吸附及解吸效果最好，故选择 D-101 型树
脂进一步进行工艺优化研究。
3． 3 D-101 型大孔吸附树脂工艺优化研究
3． 3． 1 上柱药液浓度的考察 取已处理的 D-101 型
大孔吸附树脂 5 份，各 4 g，湿法装柱，分别加入东北铁
线莲总黄酮提取液(总黄酮浓度为 1． 340 6 g /L)以及
稀释 5、10、15、20 倍的样品溶液各 50 ml，先以2 BV /h
的流速进行吸附后，分别收集过柱液并记录体积，然后
以 75%乙醇各 50 ml以 2 BV /h 的流速进行解吸，分别
收集洗脱液并记录体积，于 414 nm 处测定吸光度，计
算解吸率(表 4)。
表 4 上样浓度考察结果
稀释倍数 药液浓度 C0(g /L) 吸附后药液 C1(g /L) 解吸液 C2(g /L) 吸附率(%) 解吸率(%)
0
5
10
1． 340 6
0． 268 1
0． 134 1
0． 567 6
0． 110 7
0． 0713 4
0． 501 9
0． 102 8
0． 049 2
64． 35
62． 02
48． 92
54． 04
60． 59
72． 76
15
20
0． 089 4
0． 067 0
0． 051 2
0． 045 0
0． 036 2
0． 025 4
49． 58
39． 47
80． 15
94． 01
·28·
上海中医药杂志 2012年第 46卷第 4期 SH． J． TCM Apr．，2012;Vol． 46 No． 4
由表 4 可知，上柱药液浓度对吸附率和解吸率均
有影响，随着上柱药液浓度的降低，吸附率有逐步下降
的趋势，而解吸率逐步上升，但随着解吸率的升高，解
吸量却下降，综合吸附率和解吸率结果看，选择原药液
浓度即浓度在 1． 30 g /L 左右(相当于原生药浓度
0． 2 g /ml)为上柱药液浓度。
3． 3． 2 吸附速率的考察 取已处理的 D-101 型大孔
吸附树脂 5 份，各 4 g，湿法装柱，分别加入东北铁线莲
总黄酮上柱液(总黄酮浓度为 1． 341 9 g /L)各 30 ml，
分别以 1、2、3、4、5 BV /h的流速进行吸附，分别收集过
柱液并记录体积，分别吸取各树脂吸附后的药液 1． 0
ml，在 414 nm 处测定吸光度，计算吸附率。然后以
75%乙醇各 50 ml以 2 BV /h 的流速进行解吸，分别收
集洗脱液并记录体积，分别取各解吸液 1． 0、1． 0、1． 5、
1． 5、2． 0 ml，于 414 nm处测定吸光度，计算解吸率(表
5)。
表 5 吸附速率考察结果
吸附速率(BV /h) 吸附后药液 C1(g /L) 解吸药液 C2(g /L) 吸附率(%) 解吸率(%)
1
2
3
4
5
0． 456 5
0． 521 1
0． 777 7
0． 875 8
0． 956 3
0． 263 8
0． 309 7
0． 288 6
0． 294 7
0． 239 9
67． 16
63． 69
45． 91
39． 08
31． 11
45． 89
56． 17
74． 96
89． 90
92． 90
由表 5 可以看出，吸附速率的大小对吸附率和解
吸率也有影响，吸附速率较快，树脂尚未完全吸附，黄
酮类化合物就已随吸附液流出树脂柱，吸附率逐渐降
低。吸附速率过慢，吸附率增加的同时吸附时间也增
长，最终将导致解吸率下降，因此应合理的考虑上样流
速问题，综合解吸率和吸附率两方面，吸附率选择 2
BV /h为宜。
3． 3． 3 解吸液浓度的考察 取已处理的 D-101 型大
孔吸附树脂 5 份，各 4 g，湿法装柱，分别加入东北铁线
莲总黄酮上柱液(总黄酮浓度为 1． 319 5 g /L)各 30
ml，以 2 BV /h 的流速进行吸附，收集过柱液并记录体
积，分别以 10%、30%、50%、75%、95%乙醇各 50 ml以
2 BV /h的流速进行解吸，分别收集洗脱液并记录体积，
于 414 nm处测定吸光度，计算解吸率(表 6)。
表 6 解吸液乙醇浓度考察结果
乙醇浓度(%) 吸附后药液 C1(g /L) 解吸药液 C2(g /L) 吸附率(%) 解吸率(%)
10
30
50
75
95
0． 522 1
0． 488 0
0． 540 5
0． 497 6
0． 518 6
0． 037 2
0． 095 9
0． 164 1
0． 415 5
0． 504 1
63． 07
64． 25
63． 13
64． 08
63． 32
7． 15
18． 47
28． 20
58． 61
68． 20
不同浓度的乙醇极性不同，对黄酮类化合物的洗
脱能力也不同。由表 6 可以看出，在其他纯化条件相
同时，随着解吸液乙醇浓度的增大，解吸率不断增大，
所以最佳解吸液乙醇浓度为 95%。
3． 3． 4 解吸速率的考察 取已处理的 D-101 型大孔
吸附树脂 5 份，各 4 g，湿法装柱，分别加入东北铁线莲
总黄酮上柱液(总黄酮浓度为 1． 345 4 g /L)各 30 ml，
以 2 BV /h 的流速进行吸附，收集过柱液并记录体积，
以 95%乙醇各 50 ml，分别以 1、2、3、4、5 BV /h 的流速
进行洗脱，分别收集洗脱液并记录体积，于 414 nm 处
测定吸光度，计算解吸率(表 7)。
表 7 解吸速率考察结果
解吸速率(BV /h) 吸附后药液 C1(g /L) 吸附率(%) 解吸药液 C2(g /L) 解吸率(%)
1
2
3
4
5
0． 487 1
0． 455 6
0． 450 4
0． 448 6
0． 506 4
65． 00
66． 14
66． 99
67． 21
66． 13
0． 364 3
0． 382 9
0． 297 4
0． 286 6
0． 242 8
64． 57
69． 71
51． 49
52． 29
45． 49
洗脱速率过快，洗脱不完全，浪费溶剂;洗脱速率
过慢，洗脱时间延长，生产效率降低。由表 7 可以看
出，在其他纯化条件相同时，解吸率在洗脱速率为1 ～ 2
BV /h时较高，从解吸率结果角度看，可以确定最佳解
吸速率为 2 BV /h。
3． 3． 5 洗脱终点考察 取已处理的 D-101 型大孔吸附
树脂4 g，湿法装柱，加入东北铁线莲总黄酮上柱液(总黄
酮浓度为 1． 338 4 g /L)30 ml，以 2 BV/h 的流速进行吸
·38·
上海中医药杂志 2012 年第 46 卷第 4 期 SH． J． TCM Apr．，2012;Vol． 46 No． 4
附，收集过柱液并记录体积，以 95%乙醇以 2 BV/h的流
速进行解吸，分别按不同倍树脂床体积收集洗脱液，于
414 nm处测定吸光度，计算总黄酮的含量(图 1)。
图 1 洗脱终点考察结果
从图 1 可以看出，当洗脱液用量为 6 BV 时，洗脱
液中总黄酮的浓度已经较低了，当洗脱液用量为 8 BV
时，已基本将总黄酮洗脱净，所以洗脱液用量选择 8 BV
时即可达到目标。
3． 3． 6 上柱药液 pH的考察 取已处理的 D-101 型大
孔吸附树脂 7 份，各 4 g，湿法装柱，准备东北铁线莲总
黄酮上柱液(总黄酮浓度为 1． 338 4 g /L)30 ml 7 份，分
别调 pH为 1、2、3、4、5、7、9，分别加入柱内，以 2 BV /h
的流速进行吸附，收集过柱液并记录体积。以 95%乙
醇各 50 ml以 2 BV /h的流速进行解吸，收集解吸液并
记录体积，于 414 nm 处测定吸光度，计算解吸率
(表 8)。
上样液的 pH值不同，也会影响树脂的纯化效果，
实验中分别考察了 pH 值 1 ～ 9 对纯化效果的影响，由
表 8 可知，在其他纯化条件相同时，随着上柱药液 pH
值增大，解吸率有逐渐增大的趋势，但吸附率在 pH 值
2 ～ 4 时处于较高水平，所以综合吸附率和解吸率，上柱
药液 pH值选择为 4。
表 8 上柱药液 pH值考察
药液 pH值 吸附后药液 C1(g /L) 吸附率(%) 解吸药液 C2(g /L) 解吸率(%)
1
2
3
4
5
7
9
0． 643 8
0． 418 0
0． 423 2
0． 418 8
0． 446 9
0． 884 5
0． 938 8
48． 69
67． 73
68． 38
67． 67
64． 38
27． 30
20． 50
0． 182 6
0． 316 0
0． 369 6
0． 374 1
0． 371 3
0． 208 2
0． 156 0
44． 83
54． 61
63． 27
67． 47
66． 07
89． 25
90． 01
3． 4 D-101 型大孔吸附树脂纯化东北铁线莲总黄酮工
艺验证 经过上述对影响树脂纯化效果因素考察，可
以知道采用 D-101 大孔吸附树脂纯化东北铁线莲总黄
酮的较佳工艺为:吸附速率 2 BV /h，上柱液浓度相当于
原生药浓度 0． 2 g /ml，解吸液乙醇浓度 95%，洗脱速率
2 BV /h，洗脱剂用量为 8 BV，上柱液的 pH 值为 4 左
右。为了考察上述优化工艺的稳定性，进行了 3 次验
证性实验，取已处理的 D-101 型大孔吸附树脂 3 份，各
4 g，湿法装柱，分别加入 pH 值为 4 左右的东北铁线莲
总黄酮上柱液(总黄酮浓度为 1． 352 4 g /L)各 30 ml，
以 2 BV /h的流速进行吸附，然后用 100 ml 95%乙醇以
2 BV /h的流速进行洗脱，收集洗脱液，于 414 nm 处测
定吸光度，计算总黄酮的浓度，再取上柱液、洗脱液各
90 ml 倒入称重后的蒸发皿中水浴蒸干，基本蒸干后放
入温度调为 60 ℃的电热鼓风干燥箱中干燥，待其干燥
至恒重后称重做差，得浸膏质量，计算干浸膏中总黄酮
的纯度(表 9)。
表 9 D-101 型大孔吸附树脂纯化东北铁线莲总黄酮工艺验证实验结果
试验次数 吸附后药液 C1(g /L) 吸附率(%) 解吸液浓度 C2(g /L) 解吸率(%) 浸膏质量(g) 纯度(%)
上柱液
1
2
3
1． 352 4
0． 431 1
0． 423 2
0． 425 0
67． 59
66． 62
67． 53
1． 352 4
0． 193 4
0． 194 5
0． 192 4
68． 41
69． 44
68． 12
1． 450
0． 073
0． 072
0． 067
8． 39
23． 84
24． 31
25． 84
由表 9 可以看出，经 D-101 大孔吸附树脂处理东
北铁线莲醇提液后，干膏中总黄酮纯度由 8． 39%提高
到 24． 66%，且具有较好的重现性。
4 结论
本实验对 6 种不同型号的大孔吸附树脂进行了东
北铁线莲总黄酮纯化实验，通过对影响大孔吸附树脂
吸附及解吸各种因素的系统研究，初步确定了 D-10l型
大孔吸附树脂分离纯化东北铁线莲总黄酮的效果比较
理想，其最佳工艺为:药液浓度为 0． 2 g /ml (相当于原
生药) ，药液 pH值为 4，吸附速率为 2 BV /h，再用 8 BV
·48·
上海中医药杂志 2012年第 46卷第 4期 SH． J． TCM Apr．，2012;Vol． 46 No． 4
的 95%乙醇以 2 BV /h的流速洗脱，洗脱率平均可以达
到 68． 66%，干浸膏中总黄酮的纯度由原来的 8． 39%提
高到 24． 66%，树脂富集倍数约为 3 倍，表明 D-10l型大
孔树脂对东北铁线莲总黄酮具有一定的纯化性能，为
东北铁线莲总黄酮的工业化生产提供了理论依据。但
由于东北铁线莲的化学成分复杂，原药材中仅含有少
量的黄酮类化合物，所以纯化后东北铁线莲干浸膏中
的总黄酮纯度较低，如果想获得总黄酮纯度较高的东
北铁线莲干浸膏，则需要采用必要的方法提高东北铁
线莲粗提物中总黄酮含量，然后再经过 D-101 型大孔
吸附树脂分离纯化。
参考文献:
［1］ 朱有昌． 东北药用植物［M］． 哈尔滨:黑龙江科学技术出版社，
1989．
［2］张海丰，郗瑞云，张宏桂，等．东北铁线莲根与茎叶化学成分的 GC -
M S比较分析［J］．中医研究，2008，21(3) :22-24．
［3］ 史社坡，蒋丹，董彩霞，等．东北铁线莲化学成分研究［J］．中草药，
2007，38(3) :335-337．
［4］ 川田幸雄．东北铁线莲根的皂苷成分［J］．国外医学中医中药分册，
1997，19(6) :48．
［5］ 李家实，肖培根，楼文岑．中药威灵仙的原植物和生药学研究［J］．
药学学报，1980，15(5) :288-297．
［6］ 赵燕强，杨立新，张宪民，等． 威灵仙的成分、药理活性和临床应用
的研究进展［J］．中药材，2008，31(3) :465-469．
［7］ 吴依娜，贺文娟．中药材威灵仙的化学成分和药理研究概述［J］．中
医药导报，2008，5(20) :27-28．
［8］ 高伟城，蓝晓庆，潘馨．大孔吸附树脂在分离纯化总黄酮化合物中
的应用［J］．海峡药学，2009，21(7) :26-27．
［9］ 白夺龙，杨开华．大孔吸附树脂分离纯化技术及应用［J］． 海峡药
学，2007，19(9) :96-99．
［10］ 王晓静，贾献慧，孙敏耀，等．猪毛菜总黄酮的提取工艺研究［J］．上
海中医药杂志，2010，44(1) :73-74．
［11］ 马陶陶，张群林，李俊．三氯化铝比色法测定中药总黄酮方法的探
讨［J］．时珍国医国药，2008，28(22) :54-56．
［12］ 谭林，郭增军，徐颖．大孔吸附树脂纯化小丛红景天总黄酮的初步
研究［J］．中药材，2008，31(11) :1740-1743．
［13］ 陈顺，关延彬．大孔树脂吸附骨碎补总黄酮特性的研究［J］．中国中
药杂志，2007，32(8) :750-753．
编辑:季春来
收稿日期:2011-08-
櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍
25
最 新 邮 购 消 息
上海中医药杂志社出版 3 种期刊，分别为《上海中医药杂志》《上海中医药大学学报》《中医药文化》，现有少量
往年合订本出售，欢迎广大读者汇款邮购。以下未列出年份的均已售完，合订本价格均已含邮资。当年单本请另
加邮资 1 元。
一、《上海中医药杂志》月刊。1994 年，36 元;1997 年 ～ 2003 年每套各 60 元;2004 年 ～ 2005 年每套各 80 元;
2006 年(上、下册)90 元;2007 年 ～ 2008 年(上、下册)每套各 110 元;2009 年 ～ 2011 年(精装)每套各 120 元;2012
年各期单本，每本 8 元。邮局订阅代号:4 － 13。
二、《上海中医药大学学报》2007 年改双月刊。1994 年 ～ 1995 年，36 元;1996 年 ～ 1998 年，80 元;1999 年 ～
2006 年，每套各 36 元;2007 年 ～ 2008 年，每套各 48 元;2009 年 ～ 2010 年(精装)每套各 55 元;2011 年各期单本，
每本 8 元。邮局订阅代号:4 － 619。
三、《中医药文化》(原医古文知识)2006 年更名并改双月刊。1998 ～ 1999 年合订本，40 元;2000 年合订本，24
元;2001 ～ 2002 年合订本，40 元;2003 ～ 2004 年，40 元;2005 年，24 元;2006 年 ～ 2008 年每套各 40 元;2009 年(精
装)50 元;2010 年(精装)55 元;2011 年各期单本，每本 6． 80 元。邮局订阅代号:4 － 449。
汇款地址:上海市浦东新区蔡伦路 1200 号上海中医药杂志编辑部，邮编:201203。请在汇款单附言栏内写明
购买何年、何期、何种期刊。
·58·