---

作 者 ：许燕

期 刊 ：云南中医学院 2016年 08期 页码：105

关键词：滇重楼；SE；HMGR；FPS；基因克隆；原核表达；荧光定量；PCR；

摘 要 ：目的克隆滇重楼甾体皂苷生物合成途径中的关键酶鲨烯环氧酶(SE)基因、3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)基因和法呢基焦磷酸合酶(FPS)基因并进行原核表达。并用Real-time PCR法检测c DNA样本中SE1基因、SE2基因、HMGR基因和FPS基因的相对含量。方法以昆明市梁王山采摘的滇重楼根茎为材料,提取其总RNA,再反转录为c DNA。以反转录得到的c DNA为模板,根据Hi Seq2500 sequencing platform得到的滇重楼转录组数据中的两组SE基因、HMGR基因和FPS基因全长序列设计特异性引物,克隆SE基因、HMGR基因和FPS基因,再将克隆得到...

---