全 文 ：中国执业药师
质
量
控
制
全缘绿绒蒿药材质量标准研究
陈燕 1 黄志芳 1 德吉 2 刘云华 1 易进海 1
（1四川省中医药科学院，四川 成都 610041；2西藏自治区藏医院，西藏 拉萨 850000）
作者简介：陈燕，女，副研究员，执业药师。研究方向：中药质量标准研究及新药研发。
易进海，男，研究员。主要从事天然药物的研究及新药开发。通讯作者 Email：yijinhai@yahoo.com.cn
【摘要】 目的： 建立全缘绿绒蒿药材中槲皮素的薄层色谱鉴别与含量测定方法。方法：采用 TLC法对全缘
绿绒蒿进行鉴别；采用 HPLC 法测定槲皮素含量，色谱条件为：色谱柱，Phenomenex Luna C18(2)（4.6 mm×
150mm，5μm）；流动相，甲醇 -0.4%磷酸溶液（50∶50）；检测波长，360nm；流速，0.8ml/min。柱温：35℃。结果：各
批全缘绿绒蒿药材 TLC 色谱中均能检出槲皮素；槲皮素 HPLC 色谱峰与其它色谱峰分离良好，进样量在
0.043 04～0.258 24μg范围内，呈良好线性关系（r = 0.999 8），平均回收率为 97.14%，RSD =1.24%（n = 6）。结论：
本法简便快捷，结果可靠，为控制全缘绿绒蒿药材的质量提供参考。
【关键词】 全缘绿绒蒿；薄层色谱鉴别；槲皮素；HPLC；含量测定
Quality Control of Meconopsis integrifplia
Chen Yan1 Huang1 Zhifang1 Deji2 LiuYuhua1 Yi Jinhai1 (1 Sichuan Academy of Chinese Medicine Sciences, Chengdu 610041,
China；2 Tibet Medical Hospital of Tibet Autonomous Region, Lasa 850000 ,China)
ABSTRACT Objective：To establish the TLC identification and quantitative determination methods of Meconopsis integrifplia.
Method: TLC and HPLC were adopted to identify and determine Meconopsis integrifplia. The chromatographic conditions were Phe-
nomenex Luna C18(2)，（4.6 mm×150 mm，5μm）column as analytic column，methanol-0.4%H3PO4 water solution (50∶50) as mo-
bile phase，detection wavelength at 360nm; column temperature at 35℃，flow rate at 0.8ml/min. Results: Quercetin was identified
by TLC and determined by HPLC. The liner range of quercetin was 0.043 04～0.258 24μg，r = 0.999 8，The average recovery was
97.14%，RSD=1.24%(n=6). Conclusion: These methods are simple，accurate，reproducible and can be used to enhance the quality
control of this drug.
KEY WORDS Meconopsis Integrifolia；TLC Identification；Quercetin；HPLC；Determination
绿绒蒿为藏族习用药材，具有清热、利尿、消炎、止痛的
功效，用于治疗肺炎、肝炎、肝与肺的热症，水肿[1]。绿绒蒿基
源复杂，其中罂粟科植物全缘绿绒蒿 Meconopsis integrifplia
(Maxim.) Franch.为其主流品种，药用部位为干燥全草，主要
分布在我国甘肃、青海、西藏等省区。该药材收载于《中华人
民共和国卫生部药品标准·藏药》第一册。曾报道全缘绿绒
蒿含 β－谷甾醇、胡萝卜苷、二十九烷醇、亚麻油酸乙酯和
原鸦片碱等化学成分[2]，而对其黄酮类化合物未见报道。本
文对收集的六批全缘绿绒蒿进行了系统的薄层研究，发现
全缘绿绒蒿药材中含有大量的黄酮类化合物，而黄酮类化
合物本身具有传统的抗炎、抗变态、抗病毒、解热和保肝的
作用[3]，这与该药的功能主治相符。为此，我们参照文献方法
首次建立了全缘绿绒蒿的质量标准，为控制全缘绿绒蒿药
材的质量提供科学的实验依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Waters高效液相色谱仪：包括 Waters1525 泵，2487 双
通道紫外检测器，Waters 柱温箱，Breeze 液相色谱工作站。
Brasson超声清洗仪。塞多利斯十万分之一电子天平。
1.2 试剂与样品
槲皮素对照品（批号：100081-200406；中国药品生物制
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Feb.2009，Vol.6 No.2
质
量
控
制
品检定所，含量测定用；120℃干燥 4小时后使用，UV法含
量测定按 100%计，HPLC法含量测定按 97.3%计）。全缘绿
绒蒿药材 6批，由西藏自治区藏医院提供，经四川省中药研
究所生药室舒光明研究员鉴定为罂粟科植物全缘绿绒蒿
Meconopsis integrifplia (Maxim) Franch。甲醇为美国 Tedia色
谱纯，水为超纯水，硅胶 G（青岛海洋化工厂），其他试剂均
为分析纯。
2 方法与结果
2.1 薄层鉴别
取六批本品粗粉各 0.5g，加入 80%甲醇 20ml，加热回
流 30分钟，放冷，滤过，滤液加盐酸 2ml，加热水解 1 小时，
浓缩至约 2ml，加水 5ml，用乙酸乙酯提取 2 次，每次 5ml，
合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇 1ml 使溶解，作为供试
品溶液。另取槲皮素对照品，加甲醇制成每 1ml含 0.5mg的
溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典 2005年版
一部附录 VI B）试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各
5μl，分别点于同一用 3%醋酸钠溶液制备的硅胶 G薄层板
上，以甲苯 -乙酸乙酯 -甲酸（5∶2∶1）上层溶液为展开剂，
展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯（365nm）
下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显
相同颜色的荧光斑点。见图 1。
2.2 槲皮素的含量测定
2.2.1 色谱条件 色谱柱：Phenomenex Luna C18(2),
4.6 mm×150 mm，5μm；柱温：35℃；流动相：甲醇 -0.4%磷酸
溶液（50∶50）；检测波长：360nm；流速：0.8ml/min。理论板
数按槲皮素峰计算应不低于 2 500。在此色谱条件下，槲皮
素对照品、全缘绿绒蒿药材的 HPLC 图谱见图 2，所测主成
分槲皮素与其他成分实现基线分离，分离度为 2.81。
2.2.2 线性关系 精密称取 120℃干燥 4 小时的槲皮素对
照品 11.06mg（折合槲皮素 10.76mg），置 50ml量瓶中，加
80%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取 1ml，置 10ml
量瓶中，加 80%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。分别精密吸取
上述对照品溶液（0.021 52mg/ml）2、4、6、8、10、12μl，注入液
相色谱仪中测定。结果槲皮素在 0.043 04～0.258 24μg范围
内呈良好线性关系，以进样量（μg）为横坐标，峰面积为纵坐
标作回归曲线，Y=4 925 938X－33 651.8，r = 0.999 8。
2.2.3 供试品溶液的制备 [4] 取本品粉末（过三号筛）约
0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 80%甲醇 50ml，
密塞，称定重量，加热回流 1 小时，放冷，再称定重量，用
80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液
25ml，精密加入盐酸 5ml，置 90℃水浴中加热水解 1 小时，
取出，迅速冷却，转移至 50ml量瓶中，用 80%甲醇稀释至刻
度，摇匀，即得。
1 2 3 4 5 6 7
图 1 全缘绿绒蒿药材 TLC图谱
1~6 全缘绿绒蒿药材；7 槲皮素对照品
A:槲皮素对照品
B: 全缘绿绒蒿药材
图 2 全缘绿绒蒿药材槲皮素含量测定 HPLC图谱
37
中国执业药师
表 2 全缘绿绒蒿药材中槲皮素含量测定（n=3）
2.2.4 精密度实验 取供试品溶液（批号：01），重复测定 5
次；结果精密度好，RSD为 0.69%（n=5）。
2.2.5 重复性实验 取样品粉末（批号：01）照 2.2.3项下方
法分别制成供试品溶液 5 份，依法测定，结果重复性好，槲
皮素的含量为 1.473mg/g，RSD为 1.26%（n=5）。
2.2.6 稳定性实验 取供试品溶液（批号：01），于室温放置
24小时后依法测定，结果稳定，RSD为 0.90%（n=6）。
2.2.7 加样回收率实验 分别取已知槲皮素含量的样品
（批号：01，1.473mg/g）0.4g，精密称定，分别准确加入 1.6、
2.0、2.4ml的槲皮素对照品溶液(0.292 8 mg/ml)，照 2.2.3 项
下方法制成供试品溶液。依法测定，结果见表 1。
2.2.8 样品含量测定 样品 6 批，分别依 2.2.3 项下方法
制成供试品溶液，依法测定，槲皮素含量测定结果见表 2。
3 小结与讨论
3.1 绿绒蒿属植物种类较多，对其化学成分的探索主要集
中在生物碱[5]成分的分离鉴定上，但还未见该种植物黄酮类
成分的研究，而质量标准的研究尚属空白，我们根据该药的
功能主治，以黄酮类成分建立质量标准，对全缘绿绒蒿的质
量评价有一定的参考意义。
3.2 全缘绿绒蒿的薄层色谱鉴别，曾以 2005 年版一部金
钱草药材的 TLC 展开条件对样品进行鉴别，发现斑点间分
离度较差，经反复试验，采用 3%醋酸钠溶液制备的硅胶 G
薄层板，甲苯—乙酸乙酯—甲酸（5∶2∶1）上层溶液为展开
剂进行展开，效果较好，薄层鉴别斑点清晰、明确。
3.3 试验采用高效液相色谱法测定了游离黄酮苷元槲皮
素的含量，因含量太低，控制意义不大，故改用酸水解测定
总黄酮苷元槲皮素的含量作为定量指标。
3.4 提取溶剂的选择：曾尝试采用甲醇—盐酸（4∶1）溶
液为提取溶剂，直接回流水解 60min，结果发现其他成分
对槲皮素的分离有干扰。因此，参照文献 [ 4 ]的方法，可得
满意结果。
3.5 首次测定了全缘绿绒蒿药材中黄酮的含量，方法简
便、准确、重现性好，可作为全缘绿绒蒿药材质量控制的参
考方法。
参考文献：
[1] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药
品标准藏药第一册[S].1995年：98.
[2] 高黎明，王小雄.藏药全缘绿绒蒿化学成分的研究（Ⅰ）[J].西北
师范大学学报（自然科学版），1997，33（3）：49-52.
[3] 王晓梅，曹稳根. 黄酮类化合物药理作用研究进展[J].宿州学院
学报，2007，22（1）：105-107.
[4] 中国药典 2005年版一部[S].2005：152.
[5] 刘松渝.绿绒蒿属植物的生物碱[J]. 华西药学杂志，1987,2(3)：
55-58.
表 1 加样回收率测定结果（n=6）

(g)
(mg) (ml) (mg) (mg) (%) % RSD
0.4078 0.60069 1.6 0.46848 1.05993 98.03
0.3927 0.57845 1.6 0.46848 1.02503 95.33
0.3764 0.55444 2.0 0.5856 1.11725 96.11 97.14 1.24
0.4102 0.60422 2.0 0.5856 1.17706 97.82
0.4209 0.61999 2.4 0.70272 1.30244 97.12
0.4058 0.59774 2.4 0.70272 1.28935 98.42


 mg/g RSD(%)
01 1.475 1.36
02 1.574 1.20
03 1.529 1.11
04 2.657 1.08
05 1.954 1.22
06 2.034 1.17

质
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