全 文 ：黔琼产艾纳香中主要化学成分含量差异分析
庞玉新1，2，黄梅1，2，3，于福来1，2，陈振夏1，2，王丹1，2，胡璇1，2
(1．中国热带农业科学院 热带作物品种资源研究所 /农业部华南作物基因资源与种质创制重
点开放实验室，海南 儋州 571737;2．海南省艾纳香工程技术研究中心，海南 儋州 571737;
3．广东药学院 中药学院，广东 广州 510006)
摘要:目的 比较贵州和海南产艾纳香药材的质量差异，为艾纳香药材生产与提取加工提供参考。方法
采用 GC法测定艾纳香中左旋龙脑质量分数，紫外分光光度法测定总黄酮质量分数，并运用方差分析对
海南和贵州不同居群间艾纳香左旋龙脑与总黄酮质量分数差异进行分析。结果 不同居群间艾纳香总
黄酮质量分数差异有统计学意义(P ＜ 0． 05)，而左旋龙脑质量分数差异无统计学意义;海南和贵州 2 个
产区艾纳香在化学成分上存在一些差异，但差异无统计学意义。结论 海南产艾纳香可作为加工艾片的
原料;本试验所建立的含量测定方法简便、快速、准确，可用于艾纳香左旋龙脑与总黄酮的测定。
关键词:艾纳香;不同产地;左旋龙脑;总黄酮;含量测定
中图分类号:Ｒ284． 1 文献标志码:A doi:10． 3969 / j． issn． 1006-8783． 2014． 04． 013
文章编号:1006-8783(2014)04-0448-05
Comparative analysis on the contents of main chemical compositions in Blumea
balsamifera(L．)DC． from Hainan and Guizhou province
PANG Yuxin1，2，HUANG Mei1，2，3，YU Fulai1，2，CHEN Zhenxia1，2，WANG Dan1，2，HU Xuan1，2
(1． Tropical crops Genetic Ｒesources Institute，Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences /Key
Laboratory of Crop Gene Ｒesources and Germplasm Enhancement in Southern China，Danzhou 571737，
China;2． Hainan Provincial Engineering Ｒesearch Center for Blumea Balsamifera，Danzhou 571737，China;
3． School of Traditional Chinese Medicine，GuangDong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，
China)
Abstract:Objective To compare the quality of Blumea balsamifera(L．)DC from Guizhou and Hainan and
provide guidance for the production and extraction of B． balsamifera． Methods The content of l-borneol
was determined by gas chromatography，and total flavonoids were determined by UV． And the analysis of
variance was used for statistical analysis of the l-borneol and total flavonoids． Ｒesults There were no
significant difference among different populations in the content of l-borneol，while there were significant
difference in the content of total flavonoids(P ＜ 0． 05)． The chemical compositions of B． balsamifera
varied slightly between Hainan and Guizhou province，but with no statistical significance． Conclusion It
may be feasible to use B． balsamifera from Hainan as the raw material for l-borneolum extraction． The
determination methods of l-borneol and total flavonoids are simple，rapid and accurate，which can be used
for the assays of l-borneol and total flavonoids in B． balsamifera．
Key words:Blumea balsamifera(L．)DC．;different origin;l-borneol;total flavonoids;content
determination
收稿日期:2014-03-26
基金项目:国家自然科学基金项目(81303171 /81374065);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(1630032013006)
作者简介:庞玉新(1975—)，男，博士，副研究员，从事南药 GAP规范化栽培、南药质量控制和南药资源开发与利用研究，电话:
0898-23300268，Email:pyxmarx@ 126． com。
网络出版时间:2014-07-08 16:35 网络出版地址:http:/ /www． cnki． net /kcms /doi /10． 3969 / j． issn． 1006-8783． 2014． 04． 013． html
广东药学院学报
Journal of Guangdong Pharmaceutical University Aug． 2014，30(4)
艾纳香［Blumea balsamifera(L．)DC．］为菊科艾
纳香属多年生木质草本植物或亚灌木，别名大风艾、
冰片艾等，主要药用部位为全草或者地上部分，产于
贵州、广西、广东、海南等地［1-2］。艾纳香主要的药效
成分包括挥发油和黄酮类等，是影响艾纳香质量优
劣的主要因素。挥发油主要成分为左旋龙脑，具有
抗菌、消炎、消肿、止痛等作用，黄酮类成分包括艾纳
香素、二氢黄酮醇等，具有抗感染、抑菌、抗氧化、抗
肿瘤等药理作用［3-5］。
不同产地药材质量间存在差异，其化学成分种
类和质量分数不尽相同。中药材的功效讲究来源的
道地性，即中药材必须在一定的地理环境下才能优
质生长、保证疗效，因此探讨不同产地的中药材质量
差异对于指导临床用药具有重要现实意义［6］。就
艾纳香而言，目前研究主要集中于挥发油类和黄酮
类化学成分的分析［7-8］、药理作用［9-10］及艾纳香油指
纹图谱建立等方面［11］。有关不同产地艾纳香化学
成分差异分析的报道较少，未见涉及海南和贵州产
区艾纳香化学成分比较研究的报道。本研究在建立
左旋龙脑和总黄酮测定方法的基础上，分析贵州和
海南 2 个主产区及不同居群间(居群指同一时间里
同一区域内同一物种的集合，本文主要指在同一个
县所采集的样品)艾纳香中左旋龙脑、总黄酮质量
分数差异，进一步比较 2 个产区的药材质量，为艾纳
香药材种植、提取加工及相关生产实践提供依据。
1 仪器与试药
7890A气相色谱仪(美国安捷伦科技公司，包括
FID氢火焰离子化检测器、G4513A 16 位自动进样
器)，SartariusCPA225D 电子分析天平［赛多利斯科
学仪器(北京)有限公司］，KQ-500DB型数控超声波
清洗器(昆山市超声仪器有限公司)，UNICO2012-
PCS紫外-可见分光光度计［尤尼柯(上海)仪器有限
公司］。
左旋龙脑对照品(阿法埃莎化学有限公司，批
号:10147015，质量分数 ＞ 98%)，芦丁对照品(中国
药品生物制品检定所，批号:100080-200707，质量分
数为 92． 5%)，水杨酸甲酯(分析纯，天津光复精细
化工研究所，质量分数 ＞ 99． 5%)，其余试剂均为国
产分析纯，H2O为蒸馏水。
试验材料均由中国热带农业科学院热带作物品
种资源研究所庞玉新副研究员鉴定为菊科艾纳香属
植物艾纳香［Blumea balsamifera(L．)DC．］的功能叶
片。详见表 1。
表 1 艾纳香来源信息表
Table 1 Information for Blumea balsamifera
序号 采集地点
采集
日期
资源
类型
样品
数量
1 贵州安龙县 2013-11 野生 5
2 贵州罗甸县 2013-11、2013-12 野生、栽培 9
3 贵州望谟县 2013-11 野生 3
4 贵州兴义市 2013-06、2013-11 栽培 3
5 海南白沙市 2013-09 野生、栽培 6
6 海南儋州市 2013-12 栽培 2
7 海南琼中县 2013-09 野生、栽培 7
8 海南五指山市 2013-05 野生 4
2 方法与结果
2． 1 GC法测定艾纳香中左旋龙脑的质量分数
2． 1． 1 色谱条件 HP-5 石英毛细管色谱柱(0． 32
mm ×30 m，0． 25 μm);以 80 ℃为起始温度，保持 2
min;以 5 ℃ /min升温至 100 ℃，再以 20 ℃ /min 升
温至 200 ℃;进样口温度为 220 ℃;FID 检测器，检
测器温度为 240 ℃;进样量为 0． 6 μL，分流比为 9∶
1。按上述条件测定，水杨酸甲酯 +左旋龙脑对照
品、艾纳香供试品溶液的气相色谱图见图 1。
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1．左旋龙脑;2．水杨酸甲酯。
图 1 水杨酸甲酯 +左旋龙脑对照品(A)、供试品(B)溶液
的气相色谱图
Figure 1 GC Chromatogram of methyl salicylate + l-borneol
reference(A)and sample(B)
2． 1． 2 左旋龙脑对照品溶液的制备 精密称取左
旋龙脑对照品 100． 00 mg，置 100 mL 容量瓶中，加
乙酸乙酯定容，摇匀，即得质量浓度为 1． 031 7 mg /
mL的左旋龙脑对照品溶液。
2． 1． 3 内标溶液的制备 精密称取水杨酸甲酯
250. 00 mg，置 250 mL容量瓶中，加乙酸乙酯定容，摇
944第 4 期 庞玉新，等．黔琼产艾纳香中主要化学成分含量差异分析
匀，即得质量浓度为 1． 014 4 mg /mL的内标溶液。
2． 1． 4 供试品溶液的制备 取艾纳香叶片粉末
(过 20 目筛)2 g，精密称定，置于 50 mL具塞三角瓶
中，加入乙酸乙酯 25 mL，称定质量，在频率 40 kHz、
功率 400 W的条件下超声提取 30 min。放冷，称定
质量，用乙酸乙酯补足减失的质量，摇匀，滤过，取 1
mL续滤液至 10 mL容量瓶中，加入内标溶液 1 mL，
用乙酸乙酯定容，摇匀，即得。
2． 1． 5 标准曲线的绘制 精密称取“2． 1． 2”项下
对照品溶液 0． 1、0． 2、0． 5、1． 0、2． 0 mL，置于 10 mL
容量瓶中，精密加入“2． 1． 3”项下内标溶液 1． 0 mL，
再加入乙酸乙酯定容至刻度，摇匀，即得混合对照品
溶液。精密吸取 0． 6 μL，按照“2． 1． 1”项下色谱条
件测定。以左旋龙脑质量浓度为横坐标(X)，对照
品左旋龙脑与内标物水杨酸甲酯的峰面积比为纵坐
标(Y)绘制标准曲线，得到线性回归方程:Y =
14. 823X + 0． 012 9，r = 0． 999 9，线性范围为 10． 371
～ 207． 428 μg /mL。
2． 1． 6 精密度试验 取贵州兴义市采集的艾纳香
药材，约 2 g，精密称定，按“2． 1． 4”项下方法制备供
试品溶液，按“2． 1． 1”项下色谱条件连续测定 6 次，
记录色谱图。计算得左旋龙脑与水杨酸甲酯峰面积
比的 ＲSD值为 2． 1%，表明本方法精密度良好。
2． 1． 7 重复性试验 分别取贵州兴义市采集的艾
纳香药材 5 份，每份约 2 g，精密称定，按“2． 1． 4”项
下方法制备供试品溶液，按“2． 1． 1”项下色谱条件
进行测定。结果测得左旋龙脑质量分数的 ＲSD 值
为 3%，表明方法重复性良好。
2． 1． 8 稳定性试验 取贵州兴义市采集的艾纳香
药材 1 份，约 2 g，精密称定，按“2． 1． 4”项下方法制
备供试品溶液，于室温下放置，分别于 0、2、4、8、12、
24 h依法测定。结果左旋龙脑与内标物的相对峰
面积比的 ＲSD 为 0． 49%，表明供试品溶液在 24 h
内稳定性良好。
2． 1． 9 加样回收率试验 取已知质量分数的艾纳
香叶片粉末(过 20 目筛)1 g，精密称定，共 6 份。分
别加入左旋龙脑对照品约 5 mg，按“2． 1． 4”项下方
法制备供试品溶液，按“2． 1． 1”项下色谱条件测定
并计算加样回收率，结果见表 2。
2． 1． 10 样品中左旋龙脑的测定 取表 1 中各艾纳
香药材，各 2 g，精密称定，按照“2． 1． 4”项下方法制
备供试品溶液，按“2． 1． 1”项下色谱条件测定，根据
线性回归方程计算各产地艾纳香中左旋龙脑的质量
分数。结果见表 3。
表 2 艾纳香中左旋龙脑的加样回收率试验结果
Table 2 Ｒecovery test results of l-borneol from Blumea
balsamifera(n = 6)
编号
样品量 /
g
样品中的
量 /mg
加入量 /
mg
测得量 /
mg
回收率 /
%
1 1． 000 37 5． 06 5． 22 10． 52 104． 74
2 1． 001 95 5． 07 5． 33 10． 35 99． 01
3 1． 007 46 5． 10 5． 08 10． 24 101． 18
4 1． 009 66 5． 11 5． 15 10． 52 105． 09
5 1． 007 03 5． 10 5． 65 10． 76 100． 20
6 1． 007 57 5． 10 5． 69 10． 81 100． 39
平均回收率 = 101． 77%，ＲSD = 2． 50%
表 3 不同居群艾纳香叶中左旋龙脑的质量分数
Table 3 Contents of l-borneol of B． balsamifera in different
populations w /(mg·g －1)
序号 采集地点 左旋龙脑 序号 采集地点 左旋龙脑
1 贵州安龙 5． 25a 5 海南白沙 6． 99a
2 贵州罗甸 6． 67a 6 海南儋州 5． 70a
3 贵州望谟 3． 86a 7 海南琼中 6． 82a
4 贵州兴义 4． 22a 8 海南五指山 4． 01a
平均值 5． 00A 平均值 5． 88A
注:有相同字母上标者表示左旋龙脑质量分数差异无统计
学意义，即 P ＞ 0． 05;a 代表不同居群间差异性的比较，A 代
表贵州与海南 2 个产区间差异性的比较。
从表 3 可知，海南白沙的艾纳香中左旋龙脑质
量分数最高，为 6． 99 mg /g;贵州望谟的质量分数最
低，为 3． 86 mg /g，不同居群间左旋龙脑质量分数差
异无统计学意义，贵州与海南 2 个产区间差异亦无
统计学意义。
2． 2 紫外分光光度法测定艾纳香中总黄酮的质量
分数
2． 2． 1 显色剂的配制 称取 NaNO2 25 g，用 H2O
定容至 500 mL，配成 5% (质量浓度，下同)的
NaNO2 溶液，备用;称取 Al(NO3)3·9H2O 88 g，
用 H2O 定容至 500 mL，配成 10% (质量浓度，
下同)的 Al(NO3)3 溶液，备用;称取 NaOH 20 g，
用 H2O定容至 500 mL，配成 4%(质量浓度，下同)
的 NaOH溶液，备用。
2． 2． 2 芦丁对照品溶液的制备 精密称取于 105 ℃
干燥至恒重的芦丁对照品 12． 00 mg，置于 50 mL 容
量瓶中，加适量 75%(体积分数，下同)乙醇，置水浴
锅上微热溶解，放冷，加 75%乙醇定容，摇匀，即得
质量浓度为 0． 235 9 mg /mL的芦丁对照品溶液。
2． 2． 3 供试品溶液的制备 称取艾纳香药材粉末
054 广东药学院学报 第 30 卷
(过 20 目)0． 5 g，至具塞锥形瓶中，加 75%乙醇溶
液 25 mL，称定质量，在频率 40 kHz、功率 400 W 下
超声提取 40 min，放冷。称定质量，用 75%乙醇补
足减失的质量，摇匀，滤过，即得。
2． 2． 4 测定波长的选择 分别精密量取对照品溶
液 2． 00 mL、供试品溶液 0． 50 mL，分别置于 25 mL
容量瓶中，各加 75% 乙醇至 10 mL。分别加 5%
NaNO2 溶液 1 mL，摇匀，放置 5 min;再分别加 10%
Al(NO3)3 溶液 1 mL，摇匀，放置 5 min;加 4%
NaOH溶液 10 mL，最后加入 75%乙醇至刻度，摇
匀，放置 15 min。以相应的试剂溶液为空白，在 300
～ 999 nm波长间进行全波长扫描，选择最适测试波
长为 509 nm。吸收曲线如图 2 所示。
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图 2 芦丁对照品、供试品溶液的全波长扫描图
Figure 2 Full wavelength scan of the reference and sample of
rutin
2． 2． 5 标准曲线的绘制 精密量取芦丁对照品溶
液 1． 00、2． 00、4． 00、6． 00、8． 00 mL，分别置于 25 mL
容量瓶中，按“2． 2． 4”项下方法进行显色反应，以相
应的试剂溶液为空白对照，在 509 nm处测定吸光度
A。以对照品质量浓度(ρ)为横坐标，吸光度(A)为
纵坐标绘制标准曲线，得到线性回归方程为 A =
12. 847ρ + 0． 009 3，r = 1，线性范围为 9． 176 ～ 73．
408 μg /mL。
2． 2． 6 精密度试验 取质量浓度为 0． 235 9 mg /mL
的对照品溶液 2 mL，置于 25 mL 容量瓶中，按“2． 2．
4”项下方法测定吸收值，连续测定 6 次，吸光度值的
ＲSD值为 1． 05%，表明方法精密度良好。
2． 2． 7 稳定性试验 取同一供试品溶液，置于 25
mL容量瓶中，按“2． 2． 4”项下方法操作，每隔 10
min测定其吸光度，共计 60 min。结果溶液在显色
后 40 min 内吸光度值的 ＲSD 值为 1． 89%，表明供
试品溶液在 40 min内较稳定。
2． 2． 8 重复性试验 分别取同一批艾纳香药材 6
份，每份 0． 5 g，精密称定，按“2． 2． 3”项下方法制备
供试品溶液，取供试品溶液 0． 5 mL，按“2． 2． 4”项下
方法测定并计算总黄酮质量分数。结果测得总黄酮
质量分数的 ＲSD值为 3． 8%，表明方法重复性良好。
2． 2． 9 加样回收率试验 取已知质量分数的艾纳
香叶片粉末(过 20 目筛)0． 25 g，精密称定，共 6 份。
分别加入芦丁对照品约 30 mg，按“2． 2． 3”项下方法
制备供试品溶液，取供试品溶液 0． 5 mL，按“2． 2． 4”
项下方法测定并计算加样回收率，结果见表 4。
表 4 艾纳香叶中总黄酮加样回收率试验结果
Table 4 Ｒecovery test results of total flavonoids from
B． balsamifera(n = 6)
编号
样品量 /
g
样品中的
量 /mg
加入量 /
mg
测得量 /
mg
回收率 /
%
1 0． 250 12 34． 79 30． 92 66． 33 101． 78
2 0． 250 06 34． 78 30． 03 64． 67 99． 61
3 0． 250 35 34． 82 30． 14 64． 67 99． 18
4 0． 250 44 34． 84 30． 06 66． 52 104． 66
5 0． 250 10 34． 79 30． 11 65． 74 102． 43
6 0． 250 07 34． 78 30． 26 64． 77 99． 23
平均回率 = 101． 15%，ＲSD = 2． 17%
2． 2． 10 样品中总黄酮的测定 取表 1 中各艾纳香
药材适量，按“2． 2． 3”项下方法制备供试品溶液，按
“2． 2． 4”项下方法测定各供试品溶液的吸光度，计
算各产地艾纳香中总黄酮的质量分数。结果见表 5。
表 5 不同居群艾纳香叶中总黄酮的质量分数
Table 5 Contents of total flavonoids from B． balsamifera in
different populations w /(mg·g －1)
序号 采集地点 总黄酮 序号 采集地点 总黄酮
1 贵州安龙 26． 37abc 5 海南白沙 26． 82abc
2 贵州罗甸 52． 64b 6 海南儋州 127． 29d
3 贵州望谟 11． 48c 7 海南琼中 40． 00abc
4 贵州兴义 24． 95abc 8 海南五指山 29． 39abc
平均值 28． 86A 平均值 55． 88A
注:有不同字母上标者表示总黄酮质量分数差异有统计学意
义，即 P ＜ 0． 05;a、b、c、d代表不同居群间的差异性比较，A代表
贵州与海南 2 个产区间的差异性比较。
从表 5 可知，海南儋州的总黄酮质量分数远超
过其他居群，为 127． 29 mg /g，是质量分数最低的贵
州望谟产艾纳香(11． 48 mg /g)的 11． 09 倍，贵州罗
甸产艾纳香质量分数为 52. 64 mg /g，位列第 2 位，不
同居群间质量分数差异具有统计学意义，但海南、贵
州 2 个产区间质量分数差异不具统计学意义。
3 讨论
夏稷子等［12］研究表明，选择水杨酸甲酯作为内
154第 4 期 庞玉新，等．黔琼产艾纳香中主要化学成分含量差异分析
标物，不仅保留时间与左旋龙脑接近，分离度也很
好，因此本研究选择了水杨酸甲酯作为内标物。本
研究对贵州和海南 2 大产区的艾纳香中左旋龙脑和
总黄酮的质量分数进行比较。结果表明，海南白沙
样品中左旋龙脑质量分数最高，海南琼中产位居第
2，但方差分析显示，各居群间左旋龙脑质量分数差
异无统计学意义。海南儋州样品总黄酮质量分数最
高，为最低的贵州望谟产样品的 11． 09 倍，各居群间
总黄酮质量分数差异有统计学意义(P ＜ 0． 05)，但
海南和贵州 2 个产区间差异无统计学意义。
罗夫来等［13］研究表明，不同居群贵州产艾纳香
的挥发油质量分数差异有统计学意义，但黄酮质量
分数差异无统计学意义。夏稷子等［11］研究表明，不
同产地间的艾纳香挥发性成分种类上差异不大，但
成分比例和质量分数差异较大。由于艾纳香中挥发
性成分受种质、生长环境、生长发育阶段等因素影响
较大，上述结果的差异可能与样品的采集类型、采集
地点及采样时间的不同有关。
贵州作为艾纳香传统道地产区，其提取加工历
史悠久。随着艾纳香提取物(艾粉和艾片)市场需
求增加，其原料供应日趋紧张。从本研究看，海南和
贵州 2 个产区艾纳香的主要化学成分无明显差异，
一定程度上说明海南产艾纳香作为提取加工原料的
可行性。因此，在贵州产区土地资源匮乏的情况下，
可考虑将海南作为艾片等提取加工的第 2 产区，在
海南白沙、琼中、儋州等地建立艾纳香 GAP 生产示
范基地，从而缓解原料供需矛盾。
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(责任编辑:刘晓涵
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我院 3 项成果获 2013 年度广东省科学技术奖
2014 年 4 月 29 日下午，省委、省政府在广州隆重召开广东省科学技术奖励大会暨全省科技创新大会，表彰奖
励了获得 2013 年度广东省优秀科技成果奖的单位和个人。我校附属医院何兴祥教授课题组完成的“MIF与胃肠
肿瘤的基础与临床研究”荣获广东省科学技术二等奖，药科学院王秀芳教授课题组完成的“功能化有序介孔炭的
设计合成及吸附与释放应用基础研究”和基础学院王启华教授主编的“《临床解剖学》系列参考书”分获三等奖。
何兴祥课题组首次利用盲肠造疝原位接种法建立小鼠大肠癌肝转移模型，并且发现 ISO-1 能够抑制大肠癌的
生长和肝转移、抗-MIF抗体也可以抑制大肠癌原位肿瘤的生长并降低大肠癌肝转移率。该成果利用 MIF作为分
子标记物开发一种简便易行的外周血检测试剂盒，有望用于胃肠道肿瘤的早期诊断。
王秀芳课题组采用一步浸渍法合成了一系列磁性有序介孔炭材料，弥补了传统合成工艺中需要使用溶剂等
不足，并率先采用初湿浸渍原位聚合法进行功能化改性，研究其吸附机理和响应释放规律。该技术有望用于药物
释放与环境毒性分子去除领域。
王启华及其团队自上世纪 80 年代至今，一直致力于临床解剖学研究，其长期孜孜不倦努力编写的《临床解剖
学》系列参考书，在我国临床应用解剖学领域中，特别是在眼耳鼻咽喉专业方向上具有卓越的贡献。
(科技处)
254 广东药学院学报 第 30 卷