全 文 ：檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
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［责任编辑 顾雪竹］
［收稿日期］ 20121231(005)
［基金项目］ 国家自然科学基金项目(81274187) ;北京中医药大学自主课题(2009TYB22JS027) ;北京中医药大学创新团队项目(2011-
CXTD-12)
［通讯作者］ * 张兰珍，研究员，博士生导师，从事中药药效物质与质量研究，Tel:010-84738629，E-mail:zhanglanzhen01@ 126. com
不同产地藏药余甘子总鞣质含量测定
吴玲芳，张鸿雁，王坤风，李淑青，石任兵，张兰珍*
( 北京中医药大学中药学院，北京 100102)
［摘要］ 目的:建立磷钼钨酸 /干酪素分光光度法测定不同产地藏药余甘子中总鞣质含量的方法。方法:以没食子酸为对
照品，磷钼钨酸为显色剂，检测波长 760 nm，测定 8个不同产地余甘子中总鞣质含量。结果:没食子酸在 0. 306 ～2. 448 mg·L －1与
吸光度呈良好线性关系(r = 0. 999 1) ，平均加样回收率 99. 27%，RSD 2. 30%。不同产地余甘子药材总鞣质含量差别较大
(6. 72% ～ 11. 95%) ，印度和尼泊尔产余甘子中总鞣质含量最高。结论:该方法简单、准确、重复性好，可用于测定余甘子中总
鞣质含量。
［关键词］ 余甘子;总鞣质含量，不同产地;没食子酸
［中图分类号］ R284. 1，R284. 4 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2013)15-0061-03
［doi］ 10． 11653 /syfj2013150061
Determination of Total Tannins in Fruits of
Tibetan Medicine Phyllanthus emblica from Different Areas
WU Ling-fang，ZHANG Hong-yan，WANG Kun-feng，LI Shu-qing，SHI Ren-bing，ZHANG Lan-zhen*
(School of Chinese Materia Medica，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100102，China)
［Abstract］ Objective:To develop a phosphomolybdic acid-casein spectrophotometry for determination of
total tannins in fruits of Phyllanthus emblica from different areas． Method:With gallic acid as reference substance
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Vol． 19，No． 15
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and phosphomolybdic acid as chromogenic agent，detection wavelength 760 nm，the content of total tannins in P．
emblica from eight different areas was determined． Result:The linearity range of gallic acid was 0. 306-2. 448 mg
·L －1 with r = 0. 999 1，the average recovery was 99. 27% with RSD 2. 30% ． The content of total tannins in P．
emblica from different areas were significantly different (6. 72% -11. 95%) ，the content of total tannins in samples
from India and Nepal were the highest． Conclusion:This method was simple，accurate and reproducible which
could be adopted for determination of total tannins in P． emblica．
［Key words］ Phyllanthus emblica;the content of total tannins;different locations;gallic acid
余甘子被多版《中国药典》作为藏药收载，具有
降脂、降血糖、抗氧化、抗癌等作用，主要用于治疗血
热血瘀、消化不良、腹胀、咳嗽、喉痛、口干等症。余
甘子富含鞣质、酚酸、黄酮、多糖和维生素 C 等成
分，目前其质量控制多采用 HPLC测定没食子酸、鞣
花酸等单体成分或分光光度法测定多糖、总黄酮和
鞣质［1-7］。在比较 8 个不同产地藏药余甘子中 5 个
主要单体成分(诃黎勒酸、粘酸-2-O-没食子酸酯、没
食子酸、柯里拉京和鞣花酸)含量［8-9］的基础上，本
实验对其总鞣质含量进行测定，为余甘子的合理用
药和质量控制提供依据。
1 材料
TU1810 型紫外-可见分光光度计(普析通用公
司)。没食子酸对照品(自制，经 HPLC 检测纯度 ＞
98. 50%) ，硫酸锂(天津市光复精细化工研究所) ，
钨酸钠(天津市光复精细化工研究所) ，钼酸钠(广
东汕头市西陇化工厂) ，干酪素(天津市光复精细化
工研究所) ，试剂均为分析纯。
余甘子购自北京藏医院(产地尼泊尔)、河北安
国药材市场(产地云南)和安徽亳州药材市场(产地
印度、福建、广西、广东、四川、贵州、新疆) ，经北京
中医药大学生药系阎玉凝教授鉴定为大戟科植物
Phyllanthus emblica L． 的干燥果实。鞣质有效部位
为课题组制备的大孔树脂富集物。
2 方法与结果
2. 1 提取方法考察 取过 50 目筛的余甘子粉末约
100 mg，精密称定，置 100 mL 锥形瓶中，精密加入
60%乙醇 50 mL，称定质量，按 6 种不同方法(冷浸
12 h +超声 30 min，50 ℃温浸 12 h，超声 30 min +冷
浸 12 h，冷浸 12 h，超声 30 min)提取，冷却至室温，
用 60%乙醇补足减失的质量，取续滤液，稀释 10
倍，计算总鞣质质量分数分别为 11. 56%，11. 88%，
11. 66%，10. 98%，10. 32%，故选取 50 ℃温浸 12 h。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取没食子酸对照
品约 5 mg，置于 25 mL 量瓶中，加水溶解并稀释至
刻度，摇匀，即得。
2. 3 供试品溶液的制备 取 8个不同产地余甘子药
材适量，分别粉碎过 50 目筛，取药材粉末，每个产地
各称取 3 份，每份约 100 mg，精密称定，置于 100 mL
锥形瓶中，分别加入 60%乙醇 50 mL，称定质量，温
浸提取 12 h，冷却至室温，用 60%乙醇补足减轻质
量，过滤，取续滤液，稀释 10 倍，即得。
2. 4 显色剂的配制
2. 4. 1 磷钼钨酸试液 分别取钨酸钠、钼酸钠
100，25 g，加水 700 mL使溶解，加盐酸 100 mL和磷
酸 50 mL，加热回流 10 h，放冷，加硫酸锂 150 g，水
50 mL和溴 0. 2 mL，煮沸除去残留的溴(约 15 min) ，
冷却，加水稀释至 1 000 mL，滤过，即得。本液不得
显绿色(如放置后变绿色，可加溴 0. 2 mL，煮沸除去
多余的溴即可)。
2. 4. 2 29%碳酸钠溶液 取 29 g 碳酸钠溶液和
100 mL水或 10. 8 g 无水碳酸钠溶于 100 mL 水中，
即得。
2. 5 余甘子总鞣质含量测定的方法学考察
2. 5. 1 测定波长的选择 分别精密吸取没食子酸
对照品溶液和余甘子干酪素吸附前后溶液各 2 mL，
分别置于 25 mL 棕色量瓶中，加入磷钼钨酸试液
1 mL，加水 10 mL，用 29%碳酸钠溶液稀释至刻度，
摇匀，暗处放置 30 min，于 400 ～ 900 nm扫描，结果
二者的最大吸收波长(760 ± 2)nm，且阴性无干扰，
故选 760 nm为检测波长。
2. 5. 2 线性关系考察 精密吸取 0. 051 3 g·L －1没
食子酸对照品溶液 0. 5，1. 0，1. 5，2. 0，2. 5，3. 0，3. 5，
4. 0 mL，分别置于 25 mL量瓶中，各加磷钼钨酸试液
1 mL，依次加水 11. 5，11. 0，10. 5，10，9. 5，9，8. 5，
8 mL，用 29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，静置
30 min，以相应试剂为空白，于 760 nm 处测定吸光
度(A) ，以质量浓度为横坐标，为 A 纵坐标，得回归
方程 Y = 0. 359 5X + 0. 068 4(r = 0. 999 1) ，表明没
食子酸在 0. 306 ～ 2. 448 mg·L －1呈良好线性关系。
2. 5. 3 精密度考察 精密吸取余甘子干酪素吸附
前后溶液 2 mL，置 25 mL 量瓶中，按上述方法测定
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A，连续测定 6 次，结果 RSD 0. 54%，表明仪器精密
度良好。
2. 5. 4 重复性考察 精密称取同一批余甘子鞣质
药材 6 份，按 2. 3 项下方法制备供试品溶液，测定干
酪素吸附前后 A，结果总鞣质含量的 RSD 1. 34%，
表明该方法重复性好。
2. 5. 5 稳定性试验 余甘子样品溶液配制后，分别
于 0，2，4，6，8 h 精密吸取干酪素吸附前后溶液各
2 mL，测定 A，结果总鞣质含量的 RSD 0. 35%，表明
样品溶液在 8 h内稳定。
2. 5. 6 加样回收率试验 精密称取余甘子粉末
(过 50 目筛)6 份，每份约 50 mg，分别精密加入没食
子酸对照品约 5 mg，按 2. 3 项下方法制备供试品溶
液，测定 A，计算总鞣质含量，结果见表 1。
表 1 余甘子中总鞣质含量测定加样回收率试验
称样量
/mg
总鞣质
含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
加样
回收率
/%
平均
回收率
/%
RSD
/%
50. 02 4. 93 5. 01 10. 03 101. 80 99. 27 2. 30
50. 06 4. 93 9. 93 99. 76
49. 96 101. 17 9. 93 99. 88
50. 09 4. 94 9. 78 96. 44
49. 91 4. 94 9. 78 96. 54
150. 07 4. 95 10. 02
2. 6 不同产地余甘子中总鞣质含量测定 取 8 个
不同产地(四川、贵州、福建、云南、新疆、印度、广
西、尼泊尔)余甘子药材适量，粉碎过 50 目筛，取药
材粉末，每个产地各称取 3 份，每份约 100 mg，精密
称定，按 2. 3 项下方法制备供试品溶液，测定 A，计
算总鞣质质量分数依次为 10. 11% (1. 47%) ，
9. 54% (2. 35%) ，9. 90% (1. 98%) ，10. 03%
(3. 01%) ，6. 72% (2. 25%) ，11. 95% (2. 38%) ，
8. 57%(2. 15%) ，11. 11%(1. 73%)。表明印度、尼
泊尔进口余甘子中总鞣质含量较高，与之前报道的
5 个单体成分(诃黎勒酸、粘酸-2-O-没食子酸酯、没
食子酸、柯里拉京和鞣花酸)含量之和基本一致，也
是印度(16. 83%)和尼泊尔(17. 54%)产地余甘子
中 5 个单体成分含量较高［8-9］。
3 讨论
余甘子粉碎分别过 20，50，80 目筛，加 60%乙
醇温浸 12 h，结果显示 50 目药材提取已较完全。分
别考察体积分数 50%，60%，70% 的乙醇溶液和
60%甲醇温浸 12 h 对总鞣质含量的影响，结果表明
选择 60%乙醇提取较完全，与 60%甲醇提取效果一
致。藏医药应用中以印度、尼泊尔等进口余甘子药
材为上好药材，几乎不用内地余甘子，与所测结果基
本相符。
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［责任编辑 仝燕］
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吴玲芳，等:不同产地藏药余甘子总鞣质含量测定