全 文 ：蝴蝶兰无菌播种育苗技术
刘晓青 , 陈尚平 , 李倩中
(江苏省农业科学院园艺研究所 ,江苏南京 210014)
　　摘要:研究了不同培养基对蝴蝶兰种子原球体的诱导及生长状况的影响 ,结果表明 , 3.00 g/L花宝(Hyponex
N-P-K=6.5-6-19)+2.00 g/L蛋白胨 +2.00 g/L活性炭 +20.00 g/L蔗糖 +7.50 g/L琼脂 +10%椰乳最适
宜对蝴蝶兰种子进行原球体的诱导;并介绍了蝴蝶兰种子胚培养育苗技术流程。
　　关键词:蝴蝶兰;胚培养;原球体;诱导
　　中图分类号:S682.310.4+7　　文献标识码:A　　文章编号:1002-1302(2005)05-0086-01
收稿日期:2005-05-08
基金项目:江苏省农业科学院科研基金项目(编号:6110322)。
作者简介:刘晓青(1970—),女 ,山东平度人 ,助理研究员 ,主要从事
花卉研发工作。 Tel:(025)51513093;E-mail:liuxiaoqing884264
@yahoo.com.cn。
　　蝴蝶兰为单茎性气生兰 ,植株极少发育侧枝 ,很
难进行常规繁殖 。生产上一般选用蝴蝶兰的离体器
官如幼嫩的茎段 、叶片 、花梗等作外植体 ,诱导产生
原球体或直接诱导产生丛生芽而进行快速繁殖 。蝴
蝶兰种子的无菌培养则适合于新品种的选育 ,每一
个蝴蝶兰的果实内含有数万粒种子 ,而每一粒种子
都可能是与亲本性状不同的个体 ,这对新品种的选
育工作十分有利 。但蝴蝶兰的种子极为细小 ,只有
一个尚未发育的胚 ,且没有胚乳供给胚进一步发育 ,
所以 ,要为其提供糖类和生长素等物质 ,种子才能萌
发 ,形成原球体 , 再发育成有叶绿素可以自养的
小苗。
1　育苗技术流程
蝴蝶兰种子※原球体诱导※分化丛生芽※壮苗
※生根※炼苗※出瓶种植 。
2　胚培养技术
2.1　材料消毒
蝴蝶兰经人工授粉半年后 ,采其果皮已变黄而
尚未开裂的长卵圆形蒴果 ,先用流水冲洗并用牙刷
轻轻刷洗 ,然后在洗衣粉溶液中刷洗 5 ～ 10 min,冲
净 。在超净工作台内用 0.1%的氯化汞表面消毒 20
min后倾去溶液 ,再用无菌水冲洗 3 ～ 4次 ,备用。
2.2　培养条件
培养基:(A)3.00 g/L花宝(HyponexN-P-K
=6.5-6-19)+2.00g/L蛋白胨 +2.00 g/L活性
炭 +20.00 g/L蔗糖 +7.50 g/L琼脂 +10%椰乳 ,
pH值 5.33;(B)3.00 g/L花宝 +2.00 g/L蛋白胨
+1.00g/L活性炭 +10.00 g/L蔗糖 +7.50 g/L琼
脂 +有机物 5%(V/V), pH值 5.33;(C)3.00 g/L
花宝 +3.00 g/L蛋白胨 +1.00 g/L活性炭 +
100.00g/L香蕉 +30.00 mg/L柠檬酸 +15.00 g/L
蔗糖 +7.50 g/L琼脂 , pH值 5.33;(D)1/4MS+
20.00g/L蔗糖 +7.50g/L琼脂 +2.00g/L活性炭
+2.00 g/L水解乳蛋白 , pH值 5.33;(E)改良 KC
培养基。培养温度 25 ℃左右 ,光照时间 10 ～ 12 h/
d,光照度 2 000 ～ 3 000 lx。
2.3　接种
在超净工作台上 ,用无菌手术刀将果荚前后两
端各切去 1 cm,中间再纵向切开 ,用无菌镊子夹出种
子块 ,均匀地散放在无菌且潮湿的滤纸上 ,让种子均
匀地吸附于滤纸上 ,最后将滤纸片轻轻撕下 ,均匀地
放在培养基 A、C、E上 ,有种子的一面接触培养基。
2.4　诱导发芽与生长
以 A培养基为例 , 1周后 ,种子由金黄色转为淡
黄色 , 3周后种子开始膨大且部分变绿 ,一个月后开
始形成原球体(PLB)。随后 ,原球体拉长 ,其顶端生
长点有芽鞘叶长出 , 2个月后 ,芽鞘叶之间长出真
叶 ,形成大量的丛生苗。由表 1可以看出 ,培养基 A
较适宜原球体的诱导 ,原球体在培养基 A中生长得
既快又好 ,比在培养基 C中快 5 d。而培养基 E则
不适宜原球体的诱导 ,种子大部分死亡 。
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变化不显著的原因 。而皮下组织脂肪含量高达
80%,主要是甘油三酯 ,因此虽然前期氧化起步较
慢 ,但氧化持续性较强 。
羰基值即 C=O基团含量的变化 ,包括醛 、酮 、
酸等 ,因此它也可以作为脂肪氧化程度的指示性指
标;共轭双烯值即 =C—C=基团含量的变化 ,其指示
意义与羰基值相似。本试验羰基值和双烯值的总体
趋势不断升高 ,但由于羰基值本身即很小 ,受样品个
体差异影响较大 ,所以标准差范围较大 ,这与国外学
者在干腌火腿加工过程中的研究结果基本一致[ 7, 8] 。
过氧化值表示油脂氧化初期自由基的生成量 。
脂肪酸在外界如光 、热 、金属离子等的催化下 ,引起
脂类分子形成自由基 (R· ),自由基进一步与氧
(O2)作用生成过氧自由基(ROO·),过氧自由基继
续与脂类分子反应形成氢过氧化物(ROOH)和新的
自由基 ,引起自身的链式反应 。原料鹅脂肪的初始
过氧化值一般很低 ,肌肉组织充满水分而皮下组织
也很致密 ,加之在腌制过程中加入了亚硝酸盐 ,对自
由基的形成有一定的抑制作用 ,所以在风鹅加工前
期无论是风鹅肌间脂肪还是皮下脂肪 ,它们的过氧
化值增加都比较缓慢 。而到了风干中后期 ,随着鹅
体水分减少 ,氧气充分进入鹅肌肉和皮下组织的间
隙 ,过氧化值迅速增大 。
同时 ,由于肌肉中脂肪含量很少 ,脂肪氧化的比
率相对较高;并且肌肉中大多为磷脂 ,不饱和脂肪酸
的含量较高 , 因此相对于皮下组织更加容易
氧化[ 9] 。
结合风鹅加工过程中的感官指标 ,风干 1 d的
鹅基本没有氧化味 。而风干 2 d结束时鹅皮肤已经
发黄 ,有轻微的油脂渗出 ,脂香味突出 。到风干 3 d
时鹅皮大量滴油 ,脂肪氧化味浓厚 。少量放置到 4d
的鹅会出现不愉快的味道。表明在现有工艺生产条
件下 ,风干 3d的风鹅脂肪氧化程度已经很高 ,如果
继续风干 ,将有哈败的倾向。
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(上接第 86页)
2.5　壮苗
将丛生的小苗逐个分离 ,转接于培养基 B中 , 2
～ 3个月后 ,植株开始出现第三片新叶 ,部分植株有
气生根产生。再将培养基 B中的苗转接于培养基 D
中 ,光照度提高到 8 000 ～ 10 000 lx,约 30 d左右大
部分苗开始生根。 2 ～ 3个月后 ,当苗高 3 ～ 5 cm、叶
片 3 ～ 5张时 ,即可出瓶种植。
表 1　蝴蝶兰种子在不同培养基中的发芽和生长状况
培养基 发芽时间(d) 原球体形成情况 40d后生长状况 叶片长势
A 7～ 10 较快 , 25d开始形成 ,颗粒较整齐饱满 原球体与淡绿色胚共存 ,有少许鞘芽产生 整齐
C 7～ 10 较快 , 30d开始形成 ,颗粒大小较整齐 原球体与淡绿色胚共存 较整齐
E 7～ 15 较慢 ,很少形成 只有少许淡黄色胚 ,其他变黑 ,老化 很少
3　炼苗与移栽
将准备移栽的瓶苗置于智能温室中 ,温度控制
在 15 ～ 25 ℃之间 ,开启瓶盖 ,用 50%的遮阳网覆盖
7d左右 ,用镊子将其轻轻取出 ,洗净根部培养基 ,
移栽到装有水苔的营养钵内 ,用细眼喷壶喷透水 ,置
于阴凉处 ,并经常喷水保湿。一个月左右后 ,待生长
基本稳定 ,可施稀薄液肥 。
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