作 者 :牛苏燕
期 刊 :河南农业大学 2012年 06期 页码:47
关键词:蝴蝶兰;ACC合成酶;反义基因;表达载体的构建;遗传转化;
摘 要 :本研究以蝴蝶兰(Phalaenopsis hybrid)为研究对象,克隆获得蝴蝶兰ACC合成酶的基因片段,构建了反义基因的植物表达载体。采用根癌农杆菌介导法,将ACC合成酶反义基因导入蝴蝶兰,并对蝴蝶兰的转化植株进行GUS组织化学染色检验和筛选,还对蝴蝶兰的转化植株进行了PCR分子检验。主要研究结果如下: (1)蝴蝶兰ACC合成酶基因的克隆与序列分析 根据NCBI中已报道的蝴蝶兰ACC合成酶基因序列设计引物,从蝴蝶兰总RNA中克隆出ACS保守区的461bp片段,连接至克隆载体pMD19-T后转化E.coli DH5α,通过菌落PCR、双酶切、测序鉴定,得到ACS基因片段的克隆。...