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重楼水提液对小鼠胃肠运动功能的影响



全 文 :重楼水提液对小鼠胃肠运动功能的影响
黄彦峰,何显教,晋玲,赵善民,王彩冰,黄永毅
(右江民族医学院应用生理研究室,百色 533000)
摘 要 目的 观察重楼水提液对小鼠胃肠运动功能的影响。方法 采用碳末推进试验法,以正常、新斯的明、阿
托品、肾上腺素负荷为实验模型,观察重楼水提液(2. 5,5. 0 g·kg -1)对小鼠胃排空和小肠推进运动的影响。结果 正
常情况下,重楼水提液低剂量组有促进小鼠小肠推进作用,而高剂量组有抑制小鼠小肠推进作用,重楼水提液高、低两个
剂量组均有抑制小鼠胃排空的作用;以阿托品、肾上腺素为负荷时,重楼水提液低剂量组有拮抗阿托品、肾上腺素,促进
小鼠小肠推进的作用,而高剂量组有协同阿托品、肾上腺素,抑制小鼠胃排空的作用;以新斯的明为负荷时,重楼水提液
高、低两个剂量组均有拮抗新斯的明,抑制小鼠胃排空和小肠推进的作用。结论 重楼水提液对小鼠胃肠功能的影响与
M 胆碱能受体、肾上腺素能系统有关。
关键词 重楼水提液;胃肠运动;新斯的明;阿托品;肾上腺素
中图分类号 R282. 71;R285. 5 文献标识码 A 文章编号 1004 - 0781(2014)04 - 0442 - 04
Effect of Paris Polyphylla Water Extract on Gastrointestinal Movement
HUANG Yan-feng,HE Xian-jiao,JIN Ling,ZHAO Shan-min,WANG Cai-bing,HUANG Yong-yi(Research
Center of Applied Physiology,Youjiang Nationality Medical College,Baise 533000,China)
ABSTRACT Objective To observe the effect of Paris polyphylla water extract on gastrointestinal movement. Methods
By using propulsion test,the effect of Paris polyphylla water extract (2. 5 and 5. 0 g·kg -1)on gastric emptying and intestine
propulsion was studied in normal,neostigmine-,atropine-and adrenaline-treated mice. Results Under normal circumstances,
low dose of Paris polyphylla water extract promoted small intestine propulsion,while the high dose inhibited small intestine
propulsion. Both low dose and high dose of the water extract inhibited gastric emptying of mice. The low dose of Paris polyphylla
water extract antagonized atropine and adrenaline to promote intestine propulsion in the atropine- and adrenaline-treated mice,
respectively;while the high dose had synergistic effect with atropine and adrenaline to inhibit gastric emptying of those mice. Both
the low and high doses antagonized neostigmine to inhibit gastric emptying and intestine propulsion in the neostigmine-treated
mice. Conclusion The effect of Paris polyphylla water extract on gastrointestinal movement may be related with M cholinergic
receptor and adrenergic system.
KEY WORDS Paris polyphylla water extract;Gastrointestinal motility;Neostigmine;Atropine;Adrenaline
胃肠动力学异常性疾病发病率日益增高,而中药
在调节和改善胃肠功能方面有着自身的优势。重楼为
百 合 科 植 物 云 南 重 楼 (Paris polyphylla var.
yunnanensis)的干燥根茎,又名七叶一枝花(Paris
polyphylla var. chinensis) ,以蚤休之名始载于《神农本
草经》[1]。其主要有效成分为甾体皂苷,并含有氨基
酸、甾酮、蜕皮激素、黄酮苷等化合物[2]。重楼药用历
史悠久,近年来药理研究表明,该属植物具有止血、抗
肿瘤、抗菌、抗炎等多方面药理作用[3]。临床上,应用
重楼治疗的疾病越来越多,重楼是否影响胃肠功能,目
前尚未见报道。本实验以小鼠为研究对象,初步探讨
重楼水取液对小白鼠胃肠运动功能的影响。
1 材料与方法
1. 1 试剂 重楼(广西壮族自治区百色市市售药
收稿日期 2013 - 06 - 04 修回日期 2013 - 11 - 04
作者简介 黄彦峰(1977 -)女,广西田东人,实验师,学
士,主要从事生理学实验技术及中草药药效学研究。电话:(0)
13877696995,E-mail:huangyf238@ 126. com。
材) ,经广西右江民族医学院民族医学教研室覃道光
教授鉴定为重楼根茎;活性碳末(广东台山化工厂,批
号:940402) ;羧甲基纤维素钠(天津市光复精细化工
研究所,批号:20070708) ;硫酸阿托品注射液(河南润
弘制药股份有限公司,批号:1104161) ;盐酸肾上腺素
注射液(天津药业集团新郑股份有限公司,批号:
100912) ;新斯的明注射液(郑州羚锐制药股份有限公
司,批号:1005161)。
1. 2 动物 昆明种小鼠 150 只,体质量 22 ~ 28 g,雌
雄不限,由本院实验动物中心提供,合格证号:SCXK
(桂)2003-0003。
1. 3 仪器 ARII40 /C电子天平(奥毫斯,上海公司生
产)。
1. 4 重楼水提液的制备 称取重楼饮片 50 g,加入
10 倍量水(500 mL)常温浸泡 18 h,大火煮沸后慢火煎
煮 1 h,过滤留下滤液,取滤渣再加水 500 mL煮沸后慢
火煎煮 1 h,过滤弃滤渣,合并两次滤液用 16 层纱布过
滤,隔水蒸发浓缩,定容为 1 g·mL -1,冰箱冷藏,用时
·244· Herald of Medicine Vol. 33 No. 4 April 2014
恢复至室温。
1. 5 碳末悬液的制备 称取活性碳末 5 g、羧甲基纤
维素钠 1 g溶于 100 mL双蒸水中,搅拌均匀配制成碳
末悬液,冰箱冷藏,用时恢复至室温。
1. 6 对正常小鼠胃排空和小肠推进运动的影响 取
30 只小鼠按体质量随机分 3 组,即重楼水提液低剂量
组(2. 5 g· kg -1) ,重楼水提液高剂量组(5. 0 g·
kg -1)和正常对照组,每组 10 只。灌胃给药前,小鼠禁
食12 h,每组小鼠均按每千克体质量剂量灌胃给药,对
照组给予等体积双蒸水。灌胃给药 30 min 后,再以
5%碳末悬液 0. 25 mL·(10 g)- 1灌胃给药。20 min
后,将小鼠处死,打开腹腔,结扎胃贲门和幽门,取出
胃,用滤纸吸干后称质量,然后沿胃大弯剪开胃体,洗
去胃内容物,再用滤纸吸干,称胃净质量。计算胃内容
物残留率(%)=[(胃全质量 -胃净质量)/半固体米
糊]× 100%[4]。以胃内容物残留率为指标评价胃排
空速度。同时取出小肠自然平铺于桌面上,将小肠摆
成直线并测量,以幽门至回盲部的距离作为“小肠总
长度”,以幽门至炭末推进前端的距离作为“炭末推进
距离”。用下列公式计算炭末推进百分比:炭末推进
比(%)= 炭末在小肠内推进距离 /小肠总长度 ×
100%。以炭末推进比为指标评价小肠推进速度。
1. 7 对阿托品所致小鼠胃排空和小肠推进抑制的影
响 取小鼠 40 只,随机分成 4 组,即正常对照组、单纯
阿托品组(0. 5 mg·kg -1)、阿托品 +重楼水提液低剂
量组(2. 5 g·kg -1)、阿托品 + 重楼水提液高剂量组
(5 g·kg -1)。实验前小鼠禁食 12 h,重楼水提液高、
低两个剂量组的给药剂量和方法同“1. 6”项,正常对
照组和阿托品组给予等体积双蒸水。灌胃给药的同时
正常对照组肌内注射等体积双蒸水,其余各组小鼠均
按 0. 5 mg·kg -1肌内注射阿托品,注射给药30 min后,
操作方法及计算方法按“1. 6”项进行。
1. 8 对肾上腺素所致小鼠胃排空和小肠推进抑制的
影响 取小鼠 40 只,随机分成 4 组,即正常对照组、单
纯肾上腺素组(0. 3 mg·kg -1)、肾上腺素 +重楼水提
液低剂量组(2. 5 g·kg -1)、肾上腺素 +重楼水提液高
剂量组(5 g·kg -1)。实验前小鼠禁食 12 h,重楼水提
液高、低两个剂量组的给药剂量和方法同“1. 6”项,正
常对照组和肾上腺素组给予等体积双蒸水。灌胃给药
的同时正常对照组肌内注射等体积双蒸水,其余各组
小鼠均按 0. 3 mg·kg -1肌内注射肾上腺素,注射给药
30 min后,操作方法及计算方法按“1. 6”项进行。
1. 9 对新斯的明所致小鼠胃排空和小肠推进亢进的
影响 取小鼠 40 只,随机分成 4 组,即新斯的明组
(0. 125 mg·kg -1)、新斯的明 +重楼水提液低剂量组
(2. 5 g· kg -1)、新斯的明 + 重楼水提液高剂量组
(5 g·kg -1)、和正常对照组,每组 10 只 。实验前小
鼠禁食 12 h,重楼水提液高、低两个剂量组的给药剂
量和方法同“1. 6”项,对照组给予等体积双蒸水。新
斯的明组、新斯的明 +重楼水提液低剂量组、新斯的明
+ 重楼水提液高剂量组在灌胃给药的同时均按
0. 125 mg·kg -1肌内注射新斯的明,正常对照组肌内
注射等体积双蒸水。注射给药 30 min 后,操作方法及
计算方法按“1. 6”项进行。
1. 10 统计学方法 采用 SPSS 13. 0 版统计软件进行
统计学分析,数据以均数 ±标准差(x ± s)表示,采用单
因素方差分析,P < 0. 05 表示差异有统计学意义。
2 结果
2. 1 对正常小鼠胃排空和小肠推进运动的影响 结
果表明,与正常对照组比较,重楼水提液高、低两个剂
量组的胃内残留率和小肠推进率差异有统计学意义。
见表 1。
表 1 重楼水提液对正常小鼠胃排空和小肠推进运动的影响
Tab. 1 Effect of water extraction of Paris polyphylla on
gastric emptying and intestine propulsion of normal mice
x ± s
组别
小鼠 /

剂量 /
(g·kg -1)
胃内残留率 小肠推进率
%
重楼
低剂量组 10 2. 5 10. 00 ± 2. 07* 1 86. 09 ± 4. 95* 1
高剂量组 10 5. 0 12. 42 ± 1. 37* 1 65. 66 ± 7. 74* 1
正常对照组 10 0. 0 5. 45 ± 1. 21 77. 83 ± 6. 98
与正常对照组比较,胃内残留率:F = 49. 29,t = 6. 39,9. 78,
小肠推进率:F = 24. 41,t = 2. 80,4. 14,* 1P < 0. 01
Compared with the normal control group,gastric residual rate:
F = 49. 29,t = 6. 39,9. 78,small intestine propulsion rate:F =
24. 41,t = 2. 80,4. 14,* 1P < 0. 01
2. 2 对阿托品所致小鼠胃排空和小肠推进抑制的影
响 结果表明,与正常对照组比较,阿托品组的胃内残
留率和小肠推进率均差异有统计学意义。与阿托品组
比较,重楼水提液低剂量组的小肠推进率和重楼水提
液高剂量组的胃内残留率均差异有统计学意义。见表
2。
2. 3 对肾上腺素所致小鼠胃排空和小肠推进抑制的
影响 结果表明,与正常对照组比较,肾上腺素组的胃
内残留率和小肠推进率均差异有统计学意义。与肾上
腺素组比较,重楼水提液低剂量组的小肠推进率和重
·344·医药导报 2014 年 4 月第 33 卷第 4 期
表 2 重楼水提液对阿托品所致小鼠胃排空和小肠推进抑制的影响
Tab. 2 Effect of water extraction of Paris polyphylla on gastric emptying and intestine propulsion of mice treated with
atropine x ± s
组别 小鼠 /只
灌胃剂量 /
(g·kg -1)
注射剂量 /
(mg·kg -1)
胃内残留率 小肠推进率
%
阿托品 +重楼
低剂量组 10 2. 5 0. 5 11. 34 ± 1. 48 75. 73 ± 10. 13* 1
高剂量组 10 5. 0 0. 5 12. 04 ± 2. 04* 1 68. 21 ± 13. 21
阿托品组 10 0. 0 0. 5 10. 62 ± 1. 08* 2 65. 39 ± 6. 99* 2
正常对照组 10 0. 0 0. 0 5. 45 ± 1. 21 77. 83 ± 6. 98
与阿托品组比较,胃内残留率:F = 40. 03,t = 2. 12,小肠推进率:F = 3. 77,t = 2. 40,* 1P < 0. 05;与正常对照组比较,胃内残留率:
F = 40. 03,t = 7. 72,小肠推进率:F = 3. 77,t = 2. 88,* 2P < 0. 01
Compared with atropine group,gastric residual rate:F = 40. 03,t = 2. 12,small intestine propulsion rate:F = 3. 77,t = 2. 40,* 1P < 0.
05;compared with the normal control group,gastric residual rate:F = 40. 03,t = 7. 72,small intestine propulsion rate:F = 3. 77,t = 2. 88,* 2
P < 0. 01
楼水提液高剂量组的胃内残留率差异均有统计学意
义。见表 3。
2. 4 对新斯的明所致小鼠胃排空和小肠推进亢进的
影响 结果表明,与正常对照组比较,新斯的明组的胃
内残留率和小肠推进率均差异有统计学意义。与新斯
的明组比较,重楼水提液高、低两个剂量组的胃内残留
率和小肠推进率均差异有统计学意义。见表 4。
3 讨论
3. 1 胃肠运动的调节因素 胃肠运动主要由神经、体
液因素进行调节。神经调节包括交感神经、副交感神
经和存在肠壁内的肠神经系统[5]。交感神经神经末梢
通过释放去甲肾上腺素,作用于胃肠道平滑肌细胞膜
上的肾上腺素能受体,而抑制胃肠运动。副交感神经
末梢通过释放乙酰胆碱,作用于胃肠道平滑肌细胞膜
上的 M受体,而促进胃肠运动。胃肠道上主要存在胆
碱能 M 受体、肾上腺素 α 和 β 受体、组胺受体及多种
胃肠激素受体[6]。体液因素主要是胃肠激素的调节,
胃肠激素种类较多,不同的胃肠激素,对胃肠活动产生
不同的效应。
3. 2 重楼水提液对正常小鼠胃肠运动功能的影响
实验表明,重楼水提液低剂量组有促进小鼠小肠推进
作用,重楼水提液高剂量组有抑制小鼠小肠推进作用,
重楼水提液高、低两个剂量组均有抑制小鼠胃排空的
作用。此结果提示,在完整的神经体液因素调节下,不
同剂量的重楼水提液对正常小鼠小肠推进功能表现不
一;但均能抑制正常小鼠胃排空功能,这可能与肠道活
动比胃活动更复杂性有关。
3. 3 重楼水提液对胆碱能系统的影响 新斯的明为
可逆性的抗胆碱酯酶药物[7],使胆碱能神经末梢释放
的乙酰胆碱破坏减少,突触间隙中乙酰胆碱积聚,具有
表 3 重楼水提液对肾上腺素所致小鼠胃排空和小肠推进抑制的影响
Tab. 3 Effect of water extraction of Paris polyphylla on gastric emptying and intestine propulsion of mice treated with
adrenaline x ± s
组别 小鼠 /只
灌胃剂量 /
(g·kg -1)
注射剂量 /
(mg·kg -1)
胃内残留率 小肠推进率
%
肾上腺素 +重楼
低剂量组 10 2. 5 0. 3 10. 71 ± 1. 09 72. 66 ± 8. 61* 1
高剂量组 10 5. 0 0. 3 12. 20 ± 2. 87* 2 69. 20 ± 7. 32
肾上腺素组 10 0. 0 0. 3 9. 83 ± 1. 39* 3 57. 23 ± 7. 41* 3
正常对照组 10 0. 0 0. 0 5. 45 ± 1. 21 77. 83 ± 6. 98
与肾上腺素组比较,胃内残留率:F = 26. 29,t = 2. 96,* 2P < 0. 05,小肠推进率:F = 13. 25,t = 4. 54,* 1P < 0. 05;与正常对照组比
较,胃内残留率:F = 26. 29,t = 5. 48,小肠推进率:F = 13. 25,t = 6. 06,* 3P < 0. 01
Compared with adrenaline group,gastric residual rate:F = 26. 29,t = 2. 96,* 2P < 0. 05,small intestine propulsion rate:F = 13. 25,t =
4. 54,* 1P < 0. 05;compared with the normal control group,gastric residual rate:F = 26. 29,t = 5. 48,small intestine propulsion rate:F =
13. 25,t = 6. 06,* 3P < 0. 01
·444· Herald of Medicine Vol. 33 No. 4 April 2014
表 4 重楼水提液对新斯的明所致小鼠胃排空和小肠推进亢进的影响
Tab. 4 Effect of water extraction of Paris polyphylla on gastric emptying and intestine propulsion of mice treated with
neostigmine x ± s
组别 小鼠 /只
灌胃剂量 /
(g·kg -1)
注射剂量 /
(mg·kg -1)
胃内残留率 小肠推进率
%
新斯的明 +重楼
低剂量组 10 2. 5 0. 125 7. 06 ± 2. 37* 1 75. 76 ± 7. 52* 1
高剂量组 10 5. 0 0. 125 8. 00 ± 3. 42* 1 85. 03 ± 5. 47* 1
新斯的明组 10 0. 0 0. 125 2. 88 ± 1. 21* 2 92. 48 ± 6. 41* 2
正常对照组 10 0. 0 0. 000 5. 45 ± 1. 21 7. 83 ± 6. 98
与新斯的明组比较,胃内残留率:F = 9. 96,t = 4. 16,5. 10,小肠推进率:F = 13. 07,t = 5. 63,2. 51,* 1P < 0. 01;与正常对照组比
较,胃内残留率:F = 9. 96,t = 2. 56,小肠推进率:F = 13. 07,t = 4. 93,* 2P < 0. 01
Compared with neostigmine group,gastric residual rate:F = 9. 96,t = 4. 16,5. 10,small intestine propulsion rate:F = 13. 07,t = 5. 63,
2. 51,* 1P < 0. 01;compared with the normal control group,gastric residual rate:F = 9. 96,t = 2. 56,small intestine propulsion rate:F =
13. 07,t = 4. 93,* 2P < 0. 01
兴奋胆碱能 M 受体的作用。实验表明,重楼水提液
高、低两个剂量组均有拮抗新斯的明,抑制小鼠胃排空
和小肠推进的作用。此结果提示,重楼水提液对胃肠
运动抑制作用可能与阻断 M 胆碱能受体有关。阿托
品是临床上常用的一种 M 受体拮抗药,通过阻断 M胆
碱能受体,使副交感神经抑制,导致胃肠平滑肌松,小
肠推进运动减慢,临床上常用于胃肠痉挛等疾病的治
疗[8]。实验表明,重楼水提液低剂量组有拮抗阿托品,
促进小鼠小肠推进的作用,而重楼水提液高剂量组有
协同阿托品,抑制小鼠胃排空的作用。此结果提示,重
楼水提液对胃肠运动功能的影响可能不是单纯与阻断
M 胆碱能受体有关。
3. 4 重楼水提液对肾上腺素能系统的影响 支配胃
肠的交感神经属于肾上腺素能神经,其末梢通过释放
去甲肾上腺素,作用于胃肠道平滑肌细胞膜上的肾上
腺素能受体,而抑制胃肠运动。实验表明,重楼水提液
低剂量组有拮抗肾上腺素,促进小鼠小肠推进的作用,
而重楼水提液高剂量组有协同肾上腺素,抑制小鼠胃
排空的作用。此结果提示,重楼水提液对胃肠运动功
能的影响可能与肾上腺素能系统有关。
综上所述,重楼水提液可抑制胃运动,具有解除胃
痉挛的作用,对于小肠运动,则不同的剂量产生不同的
效应。因此,笔者推测重楼水提液对胃肠运动功能的
影响除了与 M 胆碱能受体、肾上腺素能系统有关外;
也可能是由于中草药成分复杂,胃肠机能状态存在差
异,对药物中不同成分具有不同的反应结果;其作用机
制有待进一步深入研究。本实验对治疗胃痉挛、肠功
能紊乱等疾病提供一定的药理理论基础。
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·544·医药导报 2014 年 4 月第 33 卷第 4 期