全 文 ：中国药房 2007年第 18卷第 33期 China Pharmacy 2007 Vol.18 No.33 · 2575·
耳叶牛皮消对胃肠运动的作用及其机制研究
李文胜 1* ,彭定国 2 ,屈万红 2 ,黄祖明 2 ,郭莲军 3(1.湖北宜昌市夷陵区医疗保险局 ,宜昌市 443100;2.湖北宜
昌市夷陵医院 ,宜昌市 443100;3.华中科技大学同济医学院 ,武汉市 430030)
中图分类号 R285.5;R975 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2007)33-2575-03
摘 要 目的:研究耳叶牛皮消对胃肠道的药理作用及其机制 。方法:用硫酸阿托品抑制小鼠小肠推进运动 ,观察耳叶牛皮消对小
肠推进运动的影响;以夹尾刺激法制造大鼠功能性消化不良模型 ,观察耳叶牛皮消对模型大鼠胃黏膜一氧化氮(NO)含量的影响;
用苦寒泻下法制造大鼠脾虚泄泻模型 ,观察耳叶牛皮消对模型大鼠血中胃肠激素水平的影响 。结果:耳叶牛皮消能显著提高小肠运
动受抑小鼠的小肠推进功能 , 显著降低功能性消化不良大鼠胃黏膜 NO 含量 ,显著升高脾虚泄泻模型大鼠血清胃泌素(GAS)和血
浆胃动素(M T L)含量。结论:耳叶牛皮消促进胃肠运动的机制可能与其降低胃黏膜 NO 含量 、提高血清 GAS和血浆M TL 水平有
关 。
关键词 耳叶牛皮消;胃肠运动;一氧化氮;胃泌素;胃动素
Role and Mechanism of Cynanchum auriculatum on Gastrointestinal Motil ity
LI Wensheng(Hubei Prov ince Yichang Yiling Dist rict M edical Insurance Bureau , Yichang 443100 , China)
PENG Dingguo ,QU Wanhong ,HUANG Zuming(Hubei Province Yichang Yiling Hospital , Yichang 443100 ,
China)
GUO Lianjun(Tong ji M edical School of Huazhong Science and Technology University , Wuhan 430030 ,
China)
ABSTRACT OBJECT IVE:To study the pharmacological action and mechanism of Cynanchum auriculatum (CYA)on the
gastro intestinal tract.METHODS:Using at ropine sulfa te to inhibit mices intestina l propulsive ac tivi ty and the effec t o f CYA
on the intestinal propulsive activity o f m ice w as observed.Using clipping t ail stimula tion m ethod to induce functional dyspepsia
mode l in rats and the effect o f CYA on nit rogen monoxidum(NO)level in gastric m ucous membrane of the mode l rats w as
observed.Using co ld and bitter rhubarb lax method to induce rat spleen-deficiency diar rhea mode l and t he effect of CYA on
levels o f gastrin (GAS)and motilin(M TL)in the mode l rats w as observed.RESU LTS:CYA can apparently inc rease the in-
te stinal propulsive activ ity o f mice , markedly decrease the level o f NO in gastric mucous membrane o f functional dyspepsia
mode l rats , and markedly increase levels of GAS in serum and M TL in plasm a of spleen-deficiency dia rrhea model rats.
CONCLUSION :CYA can imp rove intestinal propulsive activity , w hich might be a ttributed to the decreased NO level in gast ric
mucous memb rane and the elevated levels o f GAS in serum and MT L in plasma.
KEY WORDS Cynanchum auriculatum ;Gast rointestinal motility ;Nitrogen monoxidum ;Gastrin;M otilin
*副主任药师。研究方向:中药药理学。电话:0717-8212070。E-
mail:ylqjszx@163.com
耳叶牛皮消 Cynanchum auriculatum Royle ex Wight
为萝 科鹅绒藤属植物 , 广泛分布于四川 、湖北 、江苏 、江西等
地 ,又名白首乌 、隔山消 、飞来鹤 。笔者经研究发现 ,以耳叶牛皮
消为主药制成的复方隔山消颗粒对大鼠慢性萎缩性胃炎有较
好的治疗作用 [1 ] 。为了进一步探讨耳叶牛皮消对胃肠道的药理
作用 ,笔者研究了耳叶牛皮消对胃肠运动的影响及其机制 。
1 材料
1.1 仪器
SN -682型放射免疫 γ计数器 (上海核福光电仪器有限
公司);DL-8R 型冷冻离心机(上海离心机械研究所);7060型
全自动生化分析仪(日本日立公司)。
1.2 试药
耳叶牛皮消(采自宜昌市夷陵区 , 经湖北三峡大学医学院
陈涛教授鉴定为 Cynanchum auriculatum Royle ex Wight),
取块根 , 干燥 , 研成细粉 ,用 0.3%羧甲基纤维素钠分别配制成
高 、中 、低(88 、50 、38g ·L -1)浓度的混悬液;硫酸阿托品(安阳
九洲药业有限公司 ,批号:0306141);大黄(华中科技大学同济
医学院附属同济医院提取),制成 200%水煎液;活性炭(药用 ,
用 10%阿拉伯胶配制成 5%炭末混悬液);胃泌素(GAS)、胃动
素(M TL)放射免疫试剂盒(北京华英生物技术研究所);一氧
化氮(NO)、蛋白定量试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
1.3 动物
清洁级昆明种小鼠 , 体重(20±2)g , ♀♂兼半;清洁级 SD
大鼠 ,体重(200±20)g , ♂,均由华中科技大学同济医学院实验
动物中心提供(动物生产许可证号:医动字第 19-025号)。
2 方法与结果
2.1 耳叶牛皮消对小鼠小肠推进运动的影响
取健康小鼠 50只 ,随机分为正常对照组 、模型对照组及耳
叶牛皮消高 、中 、低剂量组 ,每组 10只 。各组小鼠均给予普通饲
料适应性喂养 3d后 ,耳叶牛皮消高 、中 、低剂量组按 0.2mL ·
10g
-1体重分别灌服不同浓度的耳叶牛皮消混悬液;模型对照
组和正常对照组均灌服等体积的 0.9%氯化钠溶液 , 1次 ·d -1 ,
连续给药 6d 。末次给药前 24h ,动物禁食不禁水 。于末次给药后
1h ,正常对照组腹腔注射 0.9%氯化钠溶液 ,每只 0.5mL;其余
各组均以 0.5mg ·kg -1的剂量腹腔注射硫酸阿托品 。再立即
灌服炭末混悬液 ,每只 0.6mL 。20min后脱颈椎处死动物 ,剖开
· 2576· China Pharm acy 2007 Vol.18 No.33 中国药房 2007年第 18卷第 33期
表 3 耳叶牛皮消对大鼠血清 GAS和血浆 MTL的影响(x ±
s , n=10)
Tab 3 Effect of Cynanchum auriculatum on GAS in
serum and MTL in plasma of spleen -deficiency diarrhea
model rats(x ±s , n=10)
组别 剂量/g ·kg-1 GAS/pg ·mL- 1 M TL/pg ·mL-1
正常对照组 - 48.42±16.72 53.47±12.19
模型对照组 - 34.49±10.87* 40.92±11.67*
耳叶牛皮消低剂量组 0.38 36.25±7.44 57.97±22.18
耳叶牛皮消中剂量组 0.50 44.76±5.95# 53.46±7.02#
耳叶牛皮消高剂量组 0.88 50.31±8.24## 60.80±22.44#
与正常对照组比较:*P<0.05;与模型对照组比较:#P<0.05 ,
##P<0.01
vs.norm al g roup:*P<0.05;vs.model co ntrol group:#P<0.05,
##P<0.01
腹腔 ,立即取出自贲门到直肠末端的肠管 ,不加牵引 ,平铺于玻
璃板上 , 测其全长和炭末前沿到贲门的距离 , 以炭末在小肠的
推进长度占小肠全长的百分比计算小肠推进率 。结果 , 模型对
照组小鼠的小肠推进率显著低于正常对照组(P <0.05);耳叶
牛皮消高 、中 、低剂量组小鼠的小肠推进率均显著高于模型
对照组(P <0.05),详见表 1。
表 1 耳叶牛皮消对小鼠小肠推进运动的影响(x ±s , n=10)
Tab 1 Effect of Cynanchum auriculatum on intestinal
propulsive act ivity in mice(x ±s , n=10)
组别 剂量/g·kg- 1 小肠推进率/ %
正常对照组 - 58.12±9.87
模型对照组 - 42.15±8.34*
耳叶牛皮消低剂量组 0.76 55.97±11.09#
耳叶牛皮消中剂量组 1.00 56.12±12.23#
耳叶牛皮消高剂量组 1.76 58.09±12.40#
与正常对照组比较:*P<0.05;与模型对照组比较:#P<0.05
vs.normal group:*P <0.05;vs.model con trol group:# P<
0.05
2.2 耳叶牛皮消对大鼠胃黏膜 NO 的影响
取健康 SD 大鼠 50只 , 经适应性饲养 1w k后 ,同“2.1”项
下分组法分为 5组 ,每组 10只 。除正常对照组外 ,其余各组均
采用夹尾刺激法制备功能性消化不良动物模型 [2 ] 。造模 7d后 ,
各组同时灌服相应药物 , 1次·d -1 ,连续 7d 。其中 ,耳叶牛皮消
高 、中 、低剂量组按 1mL ·100g -1体重分别灌服不同浓度的耳
叶牛皮消混悬液;模型对照组和正常对照组均灌服等体积的
0.9%氯化钠溶液 。大鼠造模后均出现功能性消化不良症状 。经
治疗后 , 耳叶牛皮消高 、中 、低剂量组大鼠逐渐恢复正常 , 而模
型对照组大鼠多数未恢复 。于末次给药后禁食 12h , 断头处死
动物 , 立即剖腹 , 取下整胃 ,以冰冷的 0.9%氯化钠溶液冲洗干
净 , 刮取适量胃窦部组织黏膜 , 加入冰冷的 0.9%氯化钠溶液 ,
在冰水中制成 10%的组织匀浆 。以 3 000r ·min -1离心 10min ,
取上清液 , 以硝酸还原酶法测定组织匀浆中 NO 含量 , 采用考
马斯亮蓝法测定蛋白含量 。结果 , 模型对照组大鼠胃黏膜 NO
含量显著高于正常对照组(P <0.01);耳叶牛皮消高 、中 、低剂
量组大鼠胃黏膜 NO 含量均显著低于模型对照组(P <0.05或
P<0.01),详见表 2 。
表 2 耳叶牛皮消对大鼠胃黏膜 NO 的影响(x ±s , n=10)
Tab 2 Effect of Cynanchum auriculatum on NO in gastric
mucous membrane intestinal of functional dyspepsia model
rats(x ±s , n=10)
组别 剂量/g·kg- 1 NO/μmol· g -1pro t
正常对照组 - 0.56±0.38
模型对照组 - 1.77±0.72*
耳叶牛皮消低剂量组 0.38 1.18±0.56#
耳叶牛皮消中剂量组 0.50 1.15±0.46#
耳叶牛皮消高剂量组 0.88 0.96±0.35##
与正常对照组比较:*P<0.01;与模型对照组比较:#P<0.05,
##P<0.01
vs.norm al g roup:*P<0.01;vs.model control g roup:#P<
0.05 , # #P <0.01
2.3 耳叶牛皮消对大鼠血清GAS和血浆MTL的影响
取健康 SD 大鼠 50只 , 经适应性饲养 1w k后 ,同“2.1”项
下分组法分为 5组 ,每组 10只 。除正常对照组外 ,其余各组均
采用苦寒泻下法制备大鼠脾虚泄泻模型 [3 ] 。即以 200%大黄水
煎液按 2mL ·100g -1体重灌胃 , 1次 ·d -1 ,连续 14d。从造模
第 15天开始 ,耳叶牛皮消高 、中 、低剂量组按 1mL ·100g -1体
重分别灌服不同浓度的耳叶牛皮消混悬液;模型对照组和正常
对照组均灌服等体积的 0.9%氯化钠溶液 , 1次 ·d -1 , 连续
5d 。于末次给药后禁食 12h ,断头取血 4mL ,置于 2支试管中 ,
每管 2mL 。取其中一支 , 以 2 000r ·min -1离心 5min ,分离血
清于 —20℃下保存 , 待测 GAS;在另一支试管中预置 10%乙二
胺四乙酸钠 30μL和抑肽酶 30μL ,充分混匀 ,以 2 000r ·min -1离
心 10min ,分离血浆于 —20℃下保存 ,待测 MT L 。血清 GAS
和血浆 M TL 均采用放射免疫法 , 由华中科技大学同济医
学院附属同济医院核医学室测定 。结果 , 与正常对照组比
较 , 模型对照组大鼠血清GAS和血浆MT L 均显著下降 , 而
0.5g ·kg -1以上剂量的耳叶牛皮消能使其恢复至接近正常水
平 ,详见表3。
3 讨论
耳叶牛皮消具有养阴补虚 、健脾消食之功效 , 民间多用于
治疗痢疾 、疳积和胃痛饱胀等胃肠疾病 。文献报道耳叶牛皮消
具有提高免疫力 、清除体内自由基 、降低血清总胆固醇 、抑制肿
瘤等多方面的药理活性 [ 4 ] , 但其对胃肠道的药理作用研究却未
见报道 。
胃肠运动功能是受体液调节和神经调节的复杂生理过程 ,
其中肠神经系统的兴奋性和抑制性神经元控制着胃肠道的协
调运动 。抑制性神经元释放的主要递质为 NO , 可引起胃肠平
滑肌的松弛作用 。余跃等 [5 ]通过观察胃排空障碍患者胃壁内的
NO 能神经含量 , 发现胃排空障碍组 NO 能神经元明显增多 ,
提示 NO 产量增多 , 抑制了胃蠕动 , 从而产生了胃动力障碍 。
GAS 是分布于胃肠道的重要激素 , 能促进胃肠黏膜生长和胃
肠道分泌 ,促进胃肠运动 ,使胃 、肠 、胆囊的收缩作用加强 ,还能
增加胃肠黏膜细胞的分裂 。M T L是影响胃肠运动的重要因素 ,
其机制是增加细胞内三磷酸肌醇含量 , 导致细胞内 C a2 +浓度
增加 , 引起胃和小肠产生消化间期移行性复合运动波Ⅲ相 , 从
而诱发胃肠规律性和周期性的收缩运动 [ 6 ]。M T L分泌不足可
能导致胃肠平滑肌松驰 、胃张力及蠕动减弱 , 使胃排空时间延
长 ,小肠运动减弱 ,胆囊浓缩及收缩功能产生障碍等 。
本研究显示 , 大鼠造模后胃黏膜 NO 含量显著增高 , 血清
GAS 和血浆M T L 含量显著减少 , 并不同程度地出现进食减
少 、体重减轻 、腹部鼓胀或泄泻等症状 。经耳叶牛皮消治疗后 ,
大鼠胃黏膜 NO 含量和胃肠激素水平逐渐恢复正常 ,功能性消
化不良或脾虚泄泻体征逐渐消失 , 而模型对照组大多数未恢
复 。提示耳叶牛皮消可能是通过降低胃黏膜 NO 含量 、提高血
清 GAS 和血浆M TL 水平 , 从而促进胃肠运动 , 改善胃肠功
中国药房 2007年第 18卷第 33期 China Pharmacy 2007 Vol.18 No.33 · 2577·
·中药工艺与制剂·
综合评分法筛选驱虫斑鸠菊水提取液澄清工艺 Δ
于鲁海 * ,李燕菊 ,孙 力 ,尚 靖 ,徐建国(新疆维吾尔自治区人民医院临床药学研究所 ,乌鲁木齐市 830001)
中图分类号 R94;R283 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2007)33-2577-03
摘 要 目的:优化驱虫斑鸠菊水提取液的澄清工艺 。方法:采用正交试验设计 , 以浸膏量 、浸膏中紫铆素和总黄酮含量为评分指
标 , 筛选驱虫斑鸠菊水提取液的澄清条件 。结果:驱虫斑鸠菊水提取液的澄清条件为:ZTC 1+1型澄清剂的加入顺序为先加入
0.5%(g ·mL -1)澄清剂 B溶液 ,再加入 1.0%(g ·mL -1)澄清剂 A 溶液;澄清剂 B和 A 的最佳用量分别为 2.0%(V/V)和 0.5%
(V/V);反应温度分别为(80±1)℃和(60±1)℃;反应时间均为 2h 。结论:该工艺简便、可行 ,可为实际生产提供理论依据 。
关键词 驱虫斑鸠菊;正交试验;综合评分法;澄清工艺
Optimizing of Clarifying Technology of Water Extract of Vernonia Anthelmintica Willd.by Comprehen-
sive Grading Method
YU Luhai , LI Yanju , SUN Li , SHANG Jing , XU Jianguo (The Clinical Pharmaceutical Insti tute , Xinjiang
Urumqi Autonomous Reg ion Peoples Hospi tal , U rumqi 830001 , China)
ABSTRACT OBJECT IVE:To optimize the clarify ing technology of w ate r ex tract o f Vernonia an thelm intica Willd..
M ETHODS:T he clarifying conditions o f w ate r ex tract o f Vernonia anthelm intica Willd.were optimzed by orthogonal test
design with the contents o f the ex tract and those o f Butin and Tota l flavonoids in the ex trac t as indexes fo r the grading.RE-
SULTS:The optim al clarify ing procedure w as as fo llow s:the adding sequence o f ZTC 1+1 natural clarify ing agents w as 0.5%
(g ·mL -1)B solution preceded 1.0% (g ·mL -1)A solution;the optim al am ount fo r B solution w as 2.0%(V/V)as against
0.5%(V/V)fo r A solution;the reaction temperatures solution and A solution w ere (80±1)℃and (60±1)℃, respectively ,
w ith a reaction time of 2 hours for bot h.CONCLUSION :The clar ify ing technology o f Vernonia anthelmi ntica Willd.w as
simple and feasible , w hich serves as a theoretical basis fo r the prac tical production.
KEY WORDS Vernonia anthelmin tica Willd.;Orthogonal test;Com prehensive grading method;Clarify ing tech no logy
Δ国家高新技术研究发展计划项目资助课题(2002AA 2Z3226)
*副主任药师。研究方向:天然药物研究与开发。电话:0991-
8562367。E-mail:ylh0226@sohu.com
能 ,发挥健脾消食作用的 。
参考文献
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性萎缩性胃炎的治疗作用[ J].中国中西医结合消化杂志 ,
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研究[ J] .中国中西医结合消化杂志 , 2001 , 9(3):141.
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大鼠血清胃泌素及血浆胃动素影响的研究 [ J] .中国中
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研究进展[ J].药学实践杂志 ,2004 , 22(5):260.
[ 5] 余 跃 , 侯晓华 , 茹立强 , 等.非溃疡性消化不良患者胃
窦壁内 NO 和 VIP 能神经与胃排空关系的影响 [ J] .中
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[ 6] Pan XZ , Cai LM.Curent status o f gastrointestinal hor_
mones[ J] .Sh ijie H uaren Xiaohua Zazhi , 1999 , 7:464.
(收稿日期:2007-02-12 修回日期:2007-06-25)
驱虫斑鸠菊 Vernonia anthelmi ntica Willd.为菊科一年
生草本植物 , 是新疆维吾尔医生习惯用的药材 。其药用部位为
驱虫斑鸠菊植物的成熟果实 ,具有清除异常黏液质 、驱虫、消肿 、散
寒 、止痛的作用 ,用于治疗湿寒性胃痛、肝病 、白癫风等症[1 ] 。本文
以筛选的活性部位和活性成分为目标物 , 选用 ZTC1+1型天
然澄清剂 , 对驱虫斑鸠菊水提取液的澄清工艺进行了筛选 , 并
通过综合评分法优化驱虫斑鸠菊水提取液的澄清工艺条件 。
1 材料
1.1 仪器
1100型高效液相色谱仪 、 8453型紫外分光光度计 (美国
Agilent公司);BP 211D 型电子天平(德国 Sarto rius公司)。
1.2 试药
驱虫斑鸠菊成熟果实 (采自新疆阿克苏地区扎木台乡 , 经
北京医科大学药学院天然药物教研室艾铁民教授鉴定为菊科
植物驱虫斑鸠菊 Vernonia anthelmi ntica Willd.);芦丁对照
品(中国药品生物制品检定所 ,批号:0080-9705);紫铆素对照
品 (新疆维吾尔自治区人民医院临床药学研究所自制 , 批号:
000516 ,色谱纯度大于 99.0%);ZTC-预处理剂 A 、ZTC-预
处理剂 B 、ZTC-Ⅳ型澄清剂 A 、ZTC-Ⅳ型澄清剂 B(天津正
天成澄清技术有限公司);乙腈为色谱纯 , 水为去离子水 , 其余