全 文 ：第刊卷 第 2期 热 带 作 物 学 报
C HI EN E SJ OU R N A L O F R TO PIC A LC R O P S
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。
1 4
1 9 93年 9月 Se P
N o
。
2
1 9 93
丛生芽’ 一一蝴蝶兰无性快速繁殖的新途径
刘荣维 梅庆超 崔元方 麦小燕
( 深圳 农业科学研究 中心 , 深圳 5 1 8 0 4 0 )
摘要 不经 过愈伤组织直接诱导蝴蝶兰 “ 丛生芽 ” 是一种变异率 低的 快 繁方 法 。 本文 着 重 研
究了诱导 “ 丛 生芽 ” 的两个关键环节 , 即 “ 丛生芽 ” 的增殖及其壮苗的培育 。
随着 B A浓度的提高 , “ 丛生芽 ” 增殖率上升 , B A浓度分别为 1 , 5 , 10 , Z o m g / L 培养 50
天后增殖率分别为 1 89 % , 307 % , 4 7 5 % , 523 % , 但 10 m g / L培育的 苗比 20 m g / L 的 壮 。 添 加 椰
子水可使 “ 丛生芽 ” 的增殖率提高近 1 倍 , 而且生势较好 。
适当增加培养室的光照并加入香蕉和土豆等有机物能促进根系生长 , 使蝴蝶兰苗更健壮 。
关键词 蝴蝶兰 丛生芽 无性繁殖
中图法分类号 5 6 5 2 . 3 1 Q 9 4 4 · 6
蝴蝶兰的繁殖主要通过两个途径 : ①用近成熟的果实消毒后进行无菌播种 产生 播 种 苗
( S e e d l i n g ) 〔 1 〕 。 ②花梗试管苗叶 片 诱 导 愈 伤 组 织 ( e a l l u s ) 形 成 圆 球 体 ( P r o t o -
e o r m l i k e b o d y )
, 进 而诱导分生 苗 ( M e r 主e l o r e ) 实现快繁 〔 “ 一 4 〕 。 前者简单 易 行 ,
短期内可 获得大 量试管苗 , 但是有性后代变异率高 , 除少数自花系 列较稳定 外 , 难 以 形 成
品质 划一的规模钱培 。 后者品质比较一致 , 增殖系数较高 , 但技术 难度大 , 经过愈伤组织阶
段仍有较高的变 异率 , 而且试管苗较弱 。 为了进一步减少变异 , 我们试图不经过愈伤组织直
接诱导 “ 丛生芽 , , 以实 现蝴蝶兰快速繁殖 , 并已首次在国内取得了初 步的成功 。
1 途径 、 材料和方法
1
.
1 途径
蝴蝶兰花梗一 、 消毒一。 花梗芽试管 苗诱导一 , 花梗苗丛生芽诱导一 、 丛生芽增殖
一 , 成苗培 养一 、 出瓶
1
.
2 材料
选用蝴蝶兰 已开花的花梗 , 取其下端休眠芽作为外植体。
1
.
3 方法
1
.
3
.
1 外植体的消毒 以 蝴蝶兰 N o . Z o 4 5为材料 , 切取带休眠芽的花 梗 2 . 5一 3 . oc m 长 , 在
。 . 1肠氯化汞水溶液中消毒 10 m i n , 无菌水冲洗后 , 花梗两端切去 。 . 3一。 . s c m . 并剥去休眠芽
上的叶梢 。 再在 0 . 1肠氯化汞中消毒 s m i n , 无菌水冲洗 4 次 。
1
.
3
.
2 花梗芽诱导 上述外植体接种 到M S培养基 上 , 在25 ℃ , 1 2 0 0一 1 5 0 lx 条件 下 , 每天
光照 1叼、 时 , 培养 2 个月后得无菌苗 。
1
.
3
.
3 丛生芽的诱导 花梗芽在含有 B A 5 m g / L 的 培 养 基 上培养 , 培养条件同上 , 经 3
. 蝴螺兰在 自然状况下属 单茎型 不分株 , 这里 的 “ 丛生芽” 是 指不经过 “ 愈伤 ” 阶段直接诱导 腋芽萌动产生丛生芽 。
蝴辗兰试管苗呈丛生 状 。
1 0 6 热 带 作 物 学 报 1 4卷
一 4个月的培养诱导出丛生芽 。
1
。
3
.
4 丛生芽的增殖 仍以 M S为基本培养基 。 比较不同浓度 B A ( 1 m g / L , 5 m g / L,
10 m g / L
, 2 0 m g / L ) 和加入 10 帕椰子水对丛生芽增殖的影 响 。
1
.
3
.
5 成苗培养 选取大小一致的丛生苗 , 培养基为修改的 K y o ot 培养基 , 在不同光 照 条
件下比较了蝴蝶兰的生长情况 , 以及香蕉和土豆对成苗的影响。
结果
不同浓度的 B A对丛生芽增殖的影响
以 M S为基本培养基 , 随着加入的 B A浓度的 增 高 , 丛 生 芽 的 增 殖 率 上 升 。 结 果 如
表 1
表 1 不同 B A浓度对丛生芽增殖率的影响
3 0天 4 0天 5 0天
处 理
增殖芽 /原芽 增殖率% 增殖芽 /原 芽 增殖率 % 增殖芽 /原芽 增殖率 %
宁dné八J孟任丹匕内舀乙,土,.上,ó勺JJ以B A l m g / L
B A 5 m g / L
B A I Om g / L
B A 20 m g / L
8 减/ 6 0
1 1 1 / 6 0
1 5 2 / 6 0
1 8 0 / 6 0
1 4 0
1 8 6
2 5 4
3 0 1
。 8 / 6 0
1 3 5 / 6 0
2 06 / 6 0
2 4 5 / 6 0
1 1 3 / 6 0
1 8 4 / 6 0
2 8 5 / 6。
3 x 4 / 6 0
1 8 9
3 0 了
4了 5
5 2 3
,二
824
实验结果表明 : 在试验的范围内 B A ZOm ; / L增殖率最高 , 但芽生长较弱 , 呈嫩 绿 色 。
B A 1 0 m g / L增殖率高且丛生芽生长健壮 。
2
.
2 培养基中加椰子水对丛生芽增殖 的 影响
用 3 个不 同品种的蝴蝶兰 ( N o . 2 0 5 3 , 2 0 5 4 , 2 0 5 5 ) 作为材料 , 分别在加入椰子水 与无
椰子水的培养基中培养 5 天 ( 培养基其它成分相同 ) , 结果见 表 2 。
加椰子水的处理明显地提高了蝴蝶兰丛生芽的增殖率 。 并且蝴蝶兰丛生芽生势也较好 。
2
。
3 光照强度对苗生长 的影响
尽管蝴蝶兰是阴生植物 ,但实验表明 ,光照强度对试管苗的发 根和生势仍有明显的影响 。
为此比较了 3 种不 同光照强度对蝴蝶兰丛生芽成苗的影响 (见表 3 ) 。
衰 2 娜子水对丛生芽 .J 殖率的影晌 表 3 光照强度对生根长苗的影晌 ( 40 天 )
品种 不 加 椰 子 水 加 椰 子 水增殖芽 /原芽 增殖率% 增殖芽 /原 芽 增殖率%
光 强 ( l x ) 平 均每株发根量
(条 ) 苗生长情况
2 0 5 3
2 0 5 4
2 0 5 5
2 2 6 / 6 0
2 5 8 / 6 0
2 3 8 / 6 0
3 7 7
4 3 0
3 9 7
4了8 / 6 0
4。了 / 6 0
4 0 3 / 6 0
7 9了
8 2 8
6 了2
1 0 0 0
2 0 0 0
3 0 0 0
叶色浅 绿 , 叶片瘦长 ,植
株较弱 , 叶色翠绿 ,植 株
生长一 般 , 叶色深绿 , 叶片肥厚 , 植 株健壮 。
从表 3可以看出 , 在试验范围内光照 3 0 0 0 x1 对蝴蝶兰根的诱导和植株的生长有利 。
2
。
4 在培养基中添加香蕉和土豆对蝴 蝶 兰苗生长的影响
本实验中的基本培养基为修改 了 的 K y ot o 培 养 基 , 即 花 宝一号 3 . 5 9 / L , 水 解 蛋 白
。 . 1肠 , N A A Z m舒 L , 肌醇 10 O ln 叮 L , 活性碳。 . 1肠 , 蔗糖 1 . 5 9 / L ,琼脂 1 9 / L , 分别加入
2期 刘荣维等 :丛生芽— 蝴蝶兰无性快速繁殖的新途径 10 7
香蕉 1。 。 g/ L(第二组 )和土豆 15 0 9/ L(第三组 ), 第一组为对照不加香蕉和土豆 。 培养
动天后观察结果见表 4 。
表 4 香蕉或土豆对蝴蝶兰苗生长的影响
平均叶长
(
e m )
平均叶宽
(
e m )
侮片叶的
宽 /长比 例
实验结果表明 : 香蕉和土豆对蝴蝶兰苗
的根诱导和生势都有良好的影 响 。株知侮(卜量卫,根平发处理
对 照
香蕉
土 豆 7 。 3
2
, 了5
2
.
6
2
。
5 5
0
.
4 0
0
。
5 0
0
。
4 7
规模生产上有着重要意义 。 其关键环节是
生产 “ 丛 生芽 ” 技术提供了依据 。
3 讨论
3
.
1 不经过愈伤组织阶段直接诱导蝴 蝶 兰
一 “ 丛生芽 , 可 以避免产生大量的变异 , 在大
“ 丛生芽 , 的增殖和壮苗的形成 。 本研究为大规模
3
.
2 蝴蝶兰对 B A细胞激动素的适应范围特别广 , 远远高于许多植物 。 B A浓度高达 20 m酬 L
时 , 其 “ 丛生芽 ” 增殖率仍在上升 , 但在实际应用时 , 增殖率越高 , 苗的生势越差 。 而随着
“ 丛生芽 ” 的继代培养 , 内源激素会积累上升 , 故有经验的生产者常调 低 B A激素 浓度 , 使
增 殖率控制在 30 。肠 以下 , 以便获得壮 苗 。
参 考 文 献
4
阮育雄 . 兰花组织培养实务 . 兰花 世界 , 1 9 8 8 , 53 一5
颜东敏 . 蝴裸兰叶片愈伤组织繁殖 的探讨 . 兰花 世界 , 19 8 9 , 75 一 79
王博仁 . 兰花组织培养法 中华兰花 , 2 9 8 6 , 9 ( 4 ) : 36 5一 3 74
王博仁 . 蝴蝶兰花茎茎节培养繁殖 法 . 中华兰花 , 19 8 6 , 9 ( 4 ) : 3 8 3一 3 87
C L U S T E R SH 0 0 T S
:
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V E C E T AT IV E P RO P AG AT !ON O F P HA LA E NO P S IS
L 1 u Y o n g w e i M
e i Q i n g e h a o C u i Y a n f a n g M a i X i a o y a n
( S h e n z h e n A g r i e u l t u r a l S e i e n e e R e s e a r e h C e n t r e )
A b s t r a e t
D i r e e t l y i n d u e i n g e l u s t e r s h o o t s o f p n a l a e n o p s i s w i t h o u t f o r m i n g
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r a p i d v e g e t a t i v e p r o p a g a t i o n m e t h o d w i t h l o w v a r i a b i l i t y
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: P h a r a e n o p s i s 。 l u s t e r s h o o t s r a p i d p r o p a g a t s o n