全 文 ：4.3　本文采用高效液相色谱法测定青蒿植物中青
蒿素含量的方法 。在索氏提取器上用石油醚提取样
品 ,青蒿素经碱反应后 ,酸化成稳定的 Q260形式 ,然
后在ODS 反相柱上 ,以 0.01 moL·L-1磷酸氢二钠-磷
酸二氢钠缓冲溶液[ 水-甲醇(55∶45)] 作为流动相。
波长 260 nm ,使用紫外检测器测定 。应用文献方法
测定了蒿秦风湿胶囊中青蒿素的含量 ,通过对不同
溶剂石油醚 ,乙酸乙酯 ,三氯甲烷 ,不同提取方式加
热回流 、冷浸 、超声处理以及提取时间的比较 ,结果
表明以石油醚超声处理 30 min青蒿素含量最高 ,从
而制定了正文中青蒿素含量测定方法 。
[参考文献]
[ 1] 　国家药典委员会.中华人民共和国药典[ S] .一部 ,
2005:222 ,附录Ⅵ B.
[ 2] 　赵世善 ,曾美怡.高效液相色谱法测定青蒿植物中的
青蒿素[ J] .《药物分析杂志》 1986 , 6(1):3.
[ 收稿日期] 　2008-10-21
[ 通讯作者] 　＊王淑琴 ,Tel:(0431)86816850;E-mail:zywsq62@
yahoo.com.cn
高效液相色谱法测定金钱草中鼠李酮酸-γ-内酯的含量
王淑琴＊ ,崔东滨 ,马　倩
(吉林省中医中药科学院 ,吉林 长春　130021)
　　[ 摘要] 　目的:建立用高效液相色谱法测定金钱草中鼠李酮酸-γ-内酯含量的方法。方法:采用 HypersilC18柱(4.6 mm×250
mm , 5μm),流动相:甲醇-水(50∶50),检测波长 204 nm。结果:平均加样回收率为 97.1%, RSD=1.5%。结论:方法简便 、灵敏 、
准确 、专属性强 , 适用于金钱草中鼠李酮酸-γ-内酯的含量测定。
[ 关键词] 　金钱草;鼠李酮酸-γ-内酯;高效液相色谱法
[ 中图分类号] 　R284.1　　[文献标识码] 　B　　[ 文章编号] 　1005-9903(2009)05-0017-02
　　金钱草主要含有对羟基苯甲酸 、尿嘧啶 、山奈酚
-3-葡萄糖甙 、槲皮素[ 1] 、鼠李酮酸-γ-内酯[ 2] 等 。鼠
李酮酸-γ-内酯系本实验室自金钱草中分离鉴定的
含量较高一种化合物 ,本文通过方法学考察等试验 ,
建立了高效液相色谱法测定金钱草中鼠李酮酸-γ-
内酯的含量方法 。
1　仪器与试药
日本岛津高效液相色谱仪 , 10A 检测器 。鼠李
酮酸-γ-内酯(本实验室自制),甲醇为色谱纯 ,水为
重蒸水 ,其余试剂均为分析纯。金钱草药材产自四
川。经本院生药室徐国经研究员鉴定为报春花科植
物过路黄 Lysimachia christinae Hance干燥全草。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　色谱柱 Hypersil C18(4.6 mm ×250
mm ,5μm)。流动相甲醇-水(50∶50),流速 0.5 mL·
min
-1 ,检测波长204 nm ,柱温30 ℃。
2.2　对照品溶液的制备　精密称取鼠李酮酸-γ-内
酯对照品适量 ,加甲醇制成每 1 mL含 2 mg 的溶液 ,
即得。
2.3　供试品溶液的制备　取金钱草粉末约 1 g ,精
密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加甲醇 40 mL 冷浸 4
h ,超声提取 0.5 h ,滤过 ,滤液浓缩至适量 ,拌入 3 g
硅藻土 ,挥尽溶剂 ,装入硅胶柱(1.5 cm×12 cm 3 g
硅胶)。先用氯仿-甲醇(10∶1)40 mL 洗脱 ,弃去;继
用氯仿-甲醇(3∶1)40 mL 洗脱 ,收集洗脱液 ,蒸干 ,用
甲醇定容至 5 mL 量瓶 ,摇匀 ,即得。
2.4　检测波长测定试验　在 200 ～ 400 nm测定鼠李
酮酸-γ-内酯的紫外吸收 ,根据所得紫外吸收光谱
图 ,确定检测波长为 204 nm ,见图 1 、图 2。
2.5　线性关系的考察 　精密吸取不同浓度(1.0 ,
1.5 ,2.0 ,2.5 , 3.0 mg·mL-1)的对照品溶液各 10 μL ,
注入液相色谱仪 ,测定。以鼠李酮酸-γ-内酯对照品
溶液的浓度为横坐标 ,峰面积积分值为纵坐标 ,得回
归方程为 Y =7.57 ×105 X -2.44×105 , r =0.999。
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第 15卷第 5 期
2009年 5 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.15 , No.5
May , 2009
DOI :10.13422/j.cnki.syf jx.2009.05.015
结果表明鼠李酮酸-γ-内酯在 10 ～ 30 μg 范围内线性
良好 。
2.6　精密度试验　精密吸取同一供试品溶液 ,连续
进样 5 次 ,每次 10 μL ,分别进行测定 ,结果 RSD 为
1.3%,表明本含量测定方法精密度较好 。
2.7　稳定性试验　取供试品溶液 ,于 0 , 12 , 24 ,36 ,
48 h测定。RSD为 0.94%,结果表明供试品溶液在
48 h内稳定。
2.8　重复性试验　取同一批样品 ,分别制备 6份供
试品溶液 ,按上述色谱条件测定 ,结果鼠李酮酸-γ-
内酯平均含量为 0.84%, RSD为 2.2%,表明本法重
复性较好 。
2.9　加样回收率试验　采用加样回收率的方法 ,取
同一批已知含量的样品 5份 ,每份 0.5 g ,精密称定 ,
每份精密加入一定量的对照品 ,按供试品溶液的制
备方法制备 ,按上述色谱条件测定 ,结果见表 1。
2.10　样品含量测定　取不同批次金钱草药材 ,按
2.2 、2.3项下方法制备 ,精密量取对照品溶液供试品
溶液各 10 μL进样 ,按上述色谱条件测定含量 ,结果
见表 2。
表 1　鼠李酮酸-γ-内酯加样回收率试验结果
实验
号
样品取量
(g)
样品含量
(mg)
加对照
品量(mg)
测得值
(mg)
回收率
(%)
平均回
收率(%)
RSD
(%)
1 0.508 6 5.34 5.20 10.49 99.0
2 0.498 5 5.23 5.22 10.21 95.4
3 0.499 4 5.24 5.24 10.31 97.9 97.1 1.5
4 0.507 6 5.33 5.27 10.39 96.0
5 0.500 2 5.25 5.21 10.31 97.1
表 2　金钱草中鼠李酮酸-γ-内酯含量
批次 1 2 3 4 5
含量(%) 1.10 0.83 1.37 1.18 1.32
3　讨论
本实验在供试品制备过程中 ,采用了硅胶柱处
理方法 ,通过对不同洗脱量(30 mL;40 mL;60 mL)的
图 1　鼠李酮酸-γ-内酯色谱图
　
　　
图 2　金钱草供试品色谱图
　
比较试验 ,结果当洗脱液为 30 mL时 ,测得的含量较
低 ,为 0.98%;而采用 40 mL 和 60 mL 洗脱时 ,测得
的含量基本相同 ,分别为1.11%和 1.10%,故本试验
采用 40 mL体积量洗脱 。
　　鼠李酮酸-γ-内酯系本实验室自金钱草中分离 、
鉴定的化合物。也是该属植物中首次发现的化合
物 。经对 5个不同批次金钱草的含量测定 ,结果表
明鼠李酮酸-γ-内酯在其中含量较高;经方法学考
察 ,结果表明此法重复性好 、精密度高 ,可作为金钱
草的含量测定方法。
[参考文献]
[ 1] 　赵世萍 ,林　平 , 薛　智 , 等.大金钱草化学成分的研
究[ J] .中草药 , 1988 , 19(6):245-248.
[ 2 ] 　崔东滨 , 王淑琴 , 严铭铭 , 等.金钱草中黄酮苷的分离
与结构鉴定[ J] .药学学报 , 2003 , 38(3):196-198.
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第 15卷第 5 期
2009年 5 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.15 , No.5
May , 2009