全 文 ：钟海丰，钟淮钦，黄敏玲，等．蝴蝶兰丛生芽增殖培养条件优化研究 ［Ｊ］．福建农业学报，２０１３，２８ （７）：６７５－６７９．
ＺＨＯＮＧ　Ｈ－Ｆ，ＺＨＯＮＧ　Ｈ－Ｑ，ＨＵＡＮＧ　Ｍ－Ｌ，ｅｔ　ａｌ．Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｔｉｓｓｕｅ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　ｆｏｒ　Ｐｒｏｐａｇａｔｉｎｇ　Ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ　Ｓｈｏｏｔｓ　ｏｆ　Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ ［Ｊ］．
Ｆｕｊｉａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０１３，２８ （７）：６７５－６７９．
蝴蝶兰丛生芽增殖培养条件优化研究
钟海丰１，２，３，钟淮钦１，２，３，黄敏玲１，２，３，吴建设１，２，３，叶秀仙１，２，３
（１．福建省农业科学院作物研究所，福建　福州　３５００１３；２．福建省农业科学院花卉研究中心，
福建　福州　３５００１３；３．福建省特色花卉工程技术研究中心，福建　福州　３５００１３）
收稿日期：２０１３－０２－１７初稿；２０１３－０４－０２修改稿
作者简介：钟海丰 （１９８２－），男，助理研究员，主要从事花卉品种选育与组培快繁技术研究 （ｚｈｇｈｆ００８＠１６３．ｃｏｍ）
通讯作者：黄敏玲 （１９６０－），女，研究员，主要从事花卉品种选育与生物技术研究 （Ｅ－ｍａｉｌ：ｐｕｄａｎｇ１２＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ）
基金项目：福建省科技计划重大专项专题 （２０１０ＮＺ０００３－１）；福建省科技计划项目———省属公益类科研院所基本科研专项
（２０１１Ｒ１０２８－６）；福建省农业科学院导师制青年科技创新基金项目 （２０１２ＤＱＢ－２１）
摘　要：以蝴蝶兰品种 ‘Ｌａｕｌｕｎｓ’花梗腋芽诱导出的不定芽为试验材料，研究芽体物理切分与摆放方式、不同
无机盐浓度以及有机添加物对蝴蝶兰丛生芽增殖的影响。研究结果表明：不同的芽体物理切分与摆放方式、无
机盐浓度以及有机添加物对蝴蝶兰丛生芽的增殖均有显著影响，单芽切除生长点后横插 （ＰＳＰ－３）处理的单芽平
均诱导芽数最高，但死亡率也达到２３．３％，双芽切除生长点后横插 （ＰＳＰ－６）在控制死亡率的同时能获得较高的
诱导芽数；在１／３ＭＳ～１／２ＭＳ之间的无机盐浓度比较适合于蝴蝶兰丛生芽增殖，且种苗长势健壮；１５％（ｖ／ｖ）
椰汁最适于蝴蝶兰丛生芽增殖，１５０ｇ·Ｌ－１的马铃薯或１５０ｇ·Ｌ－１香蕉泥也可作为低成本有机添加物。
关键词：蝴蝶兰；丛生芽；增殖；无机盐；有机添加物；顶端优势
中图分类号：Ｓ　６８２．３１ 文献标识码：Ａ
Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｔｉｓｓｕｅ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　ｆｏｒ　Ｐｒｏｐａｇａｔｉｎｇ　Ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ　Ｓｈｏｏｔｓ　ｏｆ　Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ
ＺＨＯＮＧ　Ｈａｉ－ｆｅｎｇ１，２，３，ＺＨＯＮＧ　Ｈｕａｉ－ｑｉｎ１，２，３，ＨＵＡＮＧ　Ｍｉｎ－ｌｉｎｇ１，２，３，ＷＵ　Ｊｉａｎ－ｓｈｅ１，２，３，ＹＥ　Ｘｉｕ－ｘｉａｎ１，２，３
（１．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｃｒｏｐ　ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｆｕｊｉａｎ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ　３５００１３，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｆｌｏｗｅｒｓ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ，Ｆｕｊｉａｎ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ　３５００１３，Ｃｈｉｎａ；
３．Ｆｕｊｉａｎ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｒｔｅｒ　ｆｏｒ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ　Ｆｌｏｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ　３５００１３，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｓｈｏｏｔｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｐｅｄｕｎｃｌｅ　ａｕｘｉｌｉａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｏｆ　Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ‘Ｌａｕｌｕｎｓ’ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ
ｓｔｕｄｙ．Ｔｈｅ　ｐｈｙｓｉｃａｌ　ｓｅｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ，ｐｌａｃｅｍｅｎｔ　ｍｏｄｅ　ａｎｄ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎｏｒｇａｎｉｃ　ｓａｌｔ　ａｎｄ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｄｄｉｔｉｖｅｓ　ａｌ
ｓｈｏｗｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ　ｗｉｔｈ　ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ　ｓｈｏｏｔｓ．Ａｍｏｎｇ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ，ｔｈｅ
ｇｒｅａｔｅｓｔ　ａｖｅｒａｇｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｉｎｄｕｃｔｉｖｅ　ｂｕｄｓ　ｏｃｃｕｒｒｅｄ　ｗｈｅｎ　ａ　ｂｕｄ　ｗａｓ　ｅｘｃｉｓｅｄ　ａｔ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｐｏｉｎｔ　ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ｇｒａｆｔｅｄ
ｈｏｒｉｚｏｎｔａｌｙ（ＰＳＰ－３）．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅ　ｂｕｄ＇ｓ　ｄｅａｔｈ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　ａｓ　ｈｉｇｈ　ａｓ　２３．３％．Ｉｎ　ｃｏｎｔｒａｓｔ，ｗｈｅｎ　ｔｈｅ　ｄｏｕｂｌｅ　ｂｕｄｓ
ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ，ａｎｄ　ｆｏｌｏｗｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｈｏｒｉｚｏｎｔａｌ　ｇｒａｆｔｉｎｇ（ＰＳＰ－６），ｔｈｅ　ｂｕｄｄｉｎｇ　ｗａｓ　ｈｉｇｈ，ｂｕｔ　ｔｈｅ　ｄｅａｔｈ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　ｌｏｗ．
Ｔｈｅ　ｉｎｏｒｇａｎｉｃ　ｓａｌｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　１／３ＭＳ　ｔｏ　１／２ＭＳ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｔｏ　ｂｅ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｎｇ　ｗｉｔｈ　ｓｔｒｏｎｇ
ｓｅｅｄｌｉｎｇ　ｇｒｏｗｔｈ．Ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｃｏｎｕｔ　ｊｕｉｃｅ　ａｔ　１５％ （ｖ／ｖ）ｌｅｖｅｌ　ｗａｓ　ｄｅｓｉｒａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ　ｃｌｕｓｔｅｒ　ｂｕｄｓ
ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｗｈｉｌｅ　１５０ｇ·Ｌ－１　ｐｏｔａｔｏ　ｊｕｉｃｅ　ｏｒ　ｂａｎａｎａ　ｐｕｒｅｅ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ａｐｐｌｉｅｄ　ａｓ　ｌｏｗ　ｃｏｓｔ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｄｄｉｔｉｖｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ
ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ；ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ　ｓｈｏｏｔｓ；ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；ｉｎｏｒｇａｎｉｃ　ｓａｌｔ；ｏｒｇａｎｉｃ　ａｄｄｉｔｉｖｅ；ａｐｉｃａｌ　ｄｏｍｉｎａｎｃｅ
　 　 蝴 蝶 兰 为 兰 科 Ｏｒｃｈｉｄａｃｅａｅ 蝴 蝶 兰 属
Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ　ｓｓｐ．植物，因其花形别致、色彩艳
丽、花期长，素有 “洋兰皇后”美称，是当今国内
外花卉市场上最受欢迎的花卉之一，其产业更是被
行业人士称之为 “农业中的ＩＴ产业”。蝴蝶兰是
单茎性气生兰，很难进行分株繁殖［１］；又因其种子
小，胚发育不完全，无胚乳，常规播种难以萌发。
而且在长期传统繁殖过程中，受到病毒的侵染，使
福建农业学报２８（７）：６７５～６７９，２０１３
Ｆｕｊｉａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
文章编号：１００８－０３８４ （２０１３）０７－６７５－０５
其花形、花色、叶片发生不同程度的劣变，严重影
响其观赏价值，通过组织培养能够有效克服以上问
题。以腋芽途径进行不定芽的增殖培养，从芽到
芽，遗传性状稳定，繁殖速度快，可以大幅降低后
代发生变异的可能性，是蝴蝶兰快速而有效的繁殖
方法［２－４］。目前，针对蝴蝶兰芽生芽途径的研究仍
主要集中在不同激素组合及浓度配比上，且增殖系
数较低，而关于物理刻伤等破坏蝴蝶兰顶端优势的
措施则较少涉及，同时同一基本培养基不同无机盐
浓度和有机添加物对其增殖与生长的影响也较少见
报道。近年来，本课题组在蝴蝶兰品种引进、种苗
工厂化繁育关键技术等方面开展深入研究，通过研
究物理刻伤等处理、不同无机盐浓度以及有机添加
物对蝴蝶兰丛生芽增殖与生长的影响，为建立蝴蝶
兰种苗高效安全的快繁技术提供技术支持。
１　材料与方法
１．１　材料
以蝴蝶兰品种 ‘Ｌａｕｌｕｎｓ’花梗腋芽诱导增殖
的不定芽为试验材料，选择芽高１．５ｃｍ以上，单
轴茎直径０．５ｃｍ以上的芽体。
１．２　试验方法
１．２．１　芽体不同物理切分与摆放方式对蝴蝶兰丛
生芽增殖的影响　设置６种不同的芽体物理切分与
摆放方式 （图１）：（１）单芽切除２／３叶片后横插；
（２）单芽切除２／３叶片后竖插；（３）单芽切除生长
点后横插；（４）单芽切除生长点后竖插；（５）单芽
切除２／３叶片后纵切横插；（６）双芽切除生长点后
横插；每处理２瓶，每瓶接种１０个芽体，重复３
次。
以上处理均接种于１／３ＭＳ （大量元素、微量
元素、铁盐均减为１／３，不添加 ＭＳ有机成分，下
同）＋ 有机 ＋６－ＢＡ　３ ｍｇ·Ｌ－１ ＋ ＮＡＡ　０．０５
ｍｇ·Ｌ－１＋１５％ （ｖ／ｖ）椰子汁＋蔗糖２０ｇ·Ｌ－１
＋琼脂５ｇ·Ｌ－１，ｐＨ　５．４～５．６，其中有机成分包
含：肌醇１００ｍｇ·Ｌ－１＋ＶＢ１１０ｍｇ·Ｌ－１＋ＶＢ６１
ｍｇ·Ｌ－１＋烟酸１ｍｇ·Ｌ－１［５］。培养室温度 （２５±
２）℃，光强１　５００～２　０００ｌｘ，光照时间１６ｈ·ｄ－１。
１．２．２　不同无机盐浓度对蝴蝶兰丛生芽增殖的影
响　设置４个无机盐浓度梯度处理：（１）ＭＳ；（２）
１／２ＭＳ；（３）１／３ＭＳ；（４）１／４ＭＳ。处理材料为
单芽切除２／３叶片后竖插于上述培养基中，每处理
２瓶，每瓶接种１０个单芽，重复３次。
以上处理均添加１／３ ＭＳ＋ 有机 ＋６－ＢＡ　３
ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　０．０５ｍｇ·Ｌ－１＋１５％ （ｖ／ｖ）椰
子汁＋蔗糖２０ｇ·Ｌ－１＋琼脂５ｇ·Ｌ－１，ｐＨ　５．４～
５．６，培养室温度 （２５±２）℃，光强１　５００～２　０００
ｌｘ，光照时间１６ｈ·ｄ－１。
１．２．３　不同有机添加物对蝴蝶兰丛生芽增殖的影
响　设置４种不同的有机添加物：（１）１５％（ｖ／ｖ）
椰子汁；（２）１５０ｇ·Ｌ－１香蕉泥；（３）１５０ｇ·Ｌ－１
马铃薯汁 （去皮煮熟过滤）；（４）１．５ｇ·Ｌ－１胰蛋
白胨；（５）不添加任何有机添加物为对照。处理材
料为单芽切除２／３叶片后竖插于上述培养基中，每
处理２瓶，每瓶接种１０个单芽，重复３次。
以上处理均添加１／３ ＭＳ＋ 有机 ＋６－ＢＡ　３
ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　０．０５ｍｇ·Ｌ－１＋１５％ （ｖ／ｖ）椰
子汁＋蔗糖２０ｇ·Ｌ－１＋琼脂５ｇ·Ｌ－１，ｐＨ　５．４～
５．６，培养室温度 （２５±２）℃，光强１　５００～２　０００
ｌｘ，光照时间１６ｈ·ｄ－１。
１．２．４　数据分析　观测记录蝴蝶兰芽体接种２个
月后的死亡率、单芽平均诱导数、苗高与生长情
况，其中：死亡率为死亡芽数与接种芽数的比值；
单芽平均诱导数为诱导总芽数与存活总芽数的比
值；苗高为每个原始接种芽体新抽生最高叶片的叶
尖至芽体基部的长度。试验结果用ＳＰＳＳ软件进行
统计分析，采用邓肯氏新复极差法进行差异分析。
２　结果与分析
２．１　芽体不同物理切分与摆放方式对蝴蝶兰丛生
芽增殖的影响
从表１可以看出，不同处理对蝴蝶兰丛生芽的
增殖与存活有显著的影响。从增殖效果看，破坏芽
体的顶端生长点的处理方式以及以横插的摆插方式
更有利于蝴蝶兰丛生芽的增殖，其中ＰＳＰ－４的处
理方式单芽平均诱导芽数最高，ＰＳＰ－６的处理方式
单芽平均诱导芽数次之，但二者差异不显著，其他
依次为 ＰＳＰ－５＞ＰＳＰ－４＞ＰＳＰ－１＞ＰＳＰ－２，其中
ＰＳＰ－４、ＰＳＰ－５处理间差异不显著，ＰＳＰ－１、ＰＳＰ－４
处理间差异不显著，其他处理均达到显著水平。从
处理后芽体的死亡率来看，芽体的损伤程度以及摆
放方式对芽体死亡率具有显著的影响，损伤程度越
高以及以横插方式摆放的死亡率更高，其中ＰＳＰ－５
的处理方式死亡率最高，达显著水平，其他依次为
ＰＳＰ－３＞ＰＳＰ－４、ＰＳＰ－６＞ＰＳＰ－１＞ＰＳＰ－２，其中
ＰＳＰ－１、ＰＳＰ－２、ＰＳＰ－４、ＰＳＰ－６处理间差异不显
著，其他处理均达显著水平。综上，ＰＳＰ－６的处理
方式在控制死亡率 （６．７％）的同时能获得较高的
诱导芽数 （５．９个）。
６７６ 福建农业学报 第２８卷
表１　芽体不同物理切分与摆放方式对蝴蝶兰丛生芽增殖的影响
Ｔａｂｌｅ　１　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐｈｙｓｉｃａｌ　ｓｅｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｌａｃｅｍｅｎｔ　ｍｏｄｅ　ｏｎ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ　ｗｉｔｈ　ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ　ｓｈｏｏｔｓ
编号 处理
接种芽数
／个
死亡芽数
／个
芽诱导数
／个
死亡率
／％
单芽平均诱导
芽数／个
ＰＳＰ－１ 单芽切除２／３叶片后横插 ６０　 ２　 ２７４　 ３．３ｃ ４．７ｃ
ＰＳＰ－２ 单芽切除２／３叶片后竖插（ＣＫ） ６０　 ０　 ２１０　 ０ｃ ３．５ｄ
ＰＳＰ－３ 单芽切除生长点后横插 ６０　 １４　 ２７７　 ２３．３ｂ ６．０ａ
ＰＳＰ－４ 单芽切除生长点后竖插 ６０　 ４　 ２８３　 ６．７ｃ ５．１ｂｃ
ＰＳＰ－５ 单芽切除２／３叶片后纵切横插 ６０　 ２０　 ２０９　 ３３．３ａ ５．２ｂ
ＰＳＰ－６ 双芽切除生长点后横插 ６０　 ４　 ３２８　 ６．７ｃ ５．９ａ
注：同列不同小写字母表示在０．０５水平上差异显著，表２、３同。
图１　芽体不同物理切分与摆放方式处理下蝴蝶兰丛生芽增殖情况
Ｆｉｇ．１　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ　ｗｉｔｈ　ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ　ｓｈｏｏｔｓ　ｕｎｄｅｒ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｈｙｓｉｃａｌ　ｓｅｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｐｌａｃｅｍｅｎｔ　ｍｏｄｅｓ
注：Ａ为单芽切除２／３叶片后横插；Ｂ为单芽切除２／３叶片后竖插 （ＣＫ）；Ｃ为单芽切除生长点后横插；Ｄ为单芽切除生长点后
竖插；Ｅ为单芽切除２／３叶片后纵切横插；Ｆ为双芽切除生长点后横插。
２．２　不同无机盐浓度对蝴蝶兰丛生芽增殖的影响
为分析同一基本培养基中不同无机盐浓度对蝴
蝶兰丛生芽增殖与种苗生长的影响，试验以 ＭＳ为
基本培养基设置４个不同的浓度梯度，从表２的统
计结果可以看出，随着无机盐浓度的降低，单芽平
均诱导芽数逐渐增加，苗高逐渐降低，各处理间均
达到显著水平。在１／４ＭＳ培养基中的外植体虽然
单芽平均诱导芽数最高，但叶色黄绿，芽体小，长
势较弱。此外，在培养过程中发现，较高浓度的无
机盐浓度会引起外植体酚的氧化，进而加速褐化的
速度，在 ＭＳ培养基中的外植体出现褐化的时间最
早，且褐变颜色最深 （图２）。因而，适宜的无机
盐质量浓度 （１／３ＭＳ～１／２ＭＳ），不仅可诱导蝴蝶
兰丛生芽的萌发，也可促使植物健康生长。
７７６第７期 钟海丰等：蝴蝶兰丛生芽增殖培养条件优化研究
表２　不同无机盐浓度对蝴蝶兰丛生芽增殖的影响
Ｔａｂｌｅ　２　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎｏｒｇａｎｉｃ　ｓａｌｔ　ｏｎ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ　ｗｉｔｈ　ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ　ｓｈｏｏｔｓ
处理
接种芽数
／个
芽诱导数
／个
单芽平均诱
导数／个
苗高
／ｃｍ
种苗长势
ＭＳ　 ６０　 １４８　 ２．５ｄ ４．４ａ 叶色浓绿，生长健壮
１／２ＭＳ　 ６０　 ２０１　 ３．４ｃ ３．２ｂ 叶色绿，生长健壮
１／３ＭＳ　 ６０　 ２２８　 ３．８ｂ １．９ｃ 叶色浅绿，生长良好
１／４ＭＳ　 ６０　 ２８３　 ４．７ａ １．２ｄ 叶色黄绿，生长较弱
图２　不同无机盐浓度处理的蝴蝶兰丛生芽增殖情况
Ｆｉｇ．２　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ　ｗｉｔｈ　ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ　ｓｈｏｏｔｓ　ｉｎ
ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉａ　ｗｉｔｈ　ｖａｒｉｅｄ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｉｎｏｒｇａｎｉｃ　ｓａｌｔ
注：Ａ为 ＭＳ；Ｂ为１／２ＭＳ；Ｃ为１／３ＭＳ；Ｄ为１／４ＭＳ。
２．３　不同有机添加物对蝴蝶兰丛生芽增殖的影响
有机添加物对细胞和组织的增殖和分化具有明
显的促进作用。从表３的统计结果可以看出，在蝴
蝶兰单芽平均诱导芽数方面，１５％ （ｖ／ｖ）椰子汁
的效果 显 著 优 于 其 他 处 理，其 他 依 次 为 １５０
ｇ·Ｌ－１香蕉泥、１５０ｇ·Ｌ－１马铃薯汁、１．５ｇ·Ｌ－１
胰蛋白胨和不添加有机物，其中１．５ｇ·Ｌ－１胰蛋
白胨与不添加有机物处理间差异不显著，其他处理
均达到显著水平。在苗高方面，１５０ｇ·Ｌ－１香蕉泥
与１．５ｇ·Ｌ－１胰蛋白胨最高，与其他处理达到显
著水平，其中添加１５０ｇ·Ｌ－１香蕉泥的丛生芽叶
色浓绿，生长健壮，而添加１．５ｇ·Ｌ－１胰蛋白胨
的丛生芽叶色黄绿，生长较弱。其他依次为１５０
ｇ·Ｌ－１马铃薯汁、不添加有机物、１５％ （ｖ／ｖ）椰
子汁，其中１５０ｇ·Ｌ－１马铃薯汁与不添加有机物
的处理之间差异不显著、不添加有机物与１５％
（ｖ／ｖ）椰子汁的处理之间差异不显著。
表３　不同有机添加物对蝴蝶兰丛生芽增殖的影响
Ｔａｂｌｅ　３　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｄｄｉｔｉｖｅｓ　ｏｎ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ　ｗｉｔｈ　ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ　ｓｈｏｏｔｓ
编号 处理 接种芽数／个 芽诱导数／个
单芽平均诱
导数／个
苗高／ｃｍ 种苗长势
ＯＡ－１　 １５％（ｖ／ｖ）椰子汁 ６０　 ２３４　 ３．９ａ １．８ｃ 叶色绿，生长健壮
ＯＡ－２　 １５０ｇ·Ｌ－１香蕉泥 ６０　 １８０　 ３．０ｃ ２．９ａ 叶色浓绿，生长健壮
ＯＡ－３　 １５０ｇ·Ｌ－１马铃薯汁 ６０　 ２０６　 ３．４ｂ ２．４ｂ 叶色浓绿，生长健壮
ＯＡ－４　 １．５ｇ·Ｌ－１胰蛋白胨 ６０　 １３４　 ２．２ｄ ２．９ａ 叶色黄绿，生长较弱
ＯＡ－５ 不添加有机物 ６０　 １２６　 ２．１ｄ ２．１ｂｃ 叶色黄绿，生长较弱
３　讨　论
目前，蝴蝶兰组织培养研究大多采用类原球茎
途径［６－８］，而丛生芽途径报道较少。植物组织培养
中可获得大量形态、生理特征不变的植株，但通过
愈伤组织分化不定芽的方式所获得的再生植株变异
率较高，虽然其中有些是有益变异，但更多的是不
良变异［９］。而利用丛生芽途径繁殖蝴蝶兰是一种从
芽到芽的增殖途径，具有稳定遗传母本的特征特
性，减少后代发生变异的优点。
植物内源激素是调控腋芽生长的重要因素，生
长素主导顶端优势，并抑制侧芽生长，在传统的植
物繁殖方式中，经常利用摘心来影响内源生长素的
含量，从而促进侧芽萌发。芽体在除去叶片后会降
低内源ＩＡＡ的总量，再配合摘心处理，对于部分
物种效果更加显著［１０］。吴宣萱等［１１］的研究结果也
表明剥离叶片的方法不但有利于提高增殖系数，而
且丛芽中大芽数比例也较高，但这种处理方法在实
８７６ 福建农业学报 第２８卷
际应用中，尤其是工厂化生产过程中往往效率不
高。本试验研究结果也表明，芽体不同物理切分与
摆放方式对蝴蝶兰丛生芽增殖具有显著的影响，芽
体切除生长点后横插处理的单芽平均诱导芽数要显
著高于其他处理，其中，单芽切除生长点后横插
（ＰＳＰ－３）和双芽切除生长点后横插 （ＰＳＰ－６）的单
芽平均诱导芽数分别达到６个和５．９个，而常规的
单芽切除２／３叶片后竖插处理的单芽平均诱导芽数
仅３．５个。但由不同处理对芽体损伤差异和芽体大
小差异，不同处理的死亡率也不同，单芽切除２／３
叶片后纵切横插处理的死亡率最高，达到３３．３％，
单芽切除生长点后横插处理的死亡率也较高，达到
２３．３％，据此推测芽体的死亡率可能跟损伤的大
小、芽体大小以及氧气供应情况有关。本研究结果
表明双芽切除生长点后横插 （ＰＳＰ－６）处理在控制
死亡率的同时能获得较高的诱导芽数。
植物组织培养中不同种类的植物对无机物浓度
的要求也不同，培养基中无机物的成分和浓度是植
物生长的重要因素。ＭＳ培养基是一种无机盐浓度
较高的培养基，一般来说，茎段再生不定芽需要使
用全量无机盐浓度的 ＭＳ培养基，而不定芽生根需
要 ＭＳ培养基中无机盐减少即采用１／２ＭＳ或１／４
ＭＳ［１２］。本试验研究结果显示高浓度的无机盐
（ＭＳ）不利于丛生芽发生，而有利于植株生长，而
较低浓度的无机盐 （１／３ＭＳ～１／２ＭＳ）不仅有利
于丛生芽发生，植株生长也较为 健 壮，这 与
Ｖａｒｓｈａ［１２］等人的研究结果不一致，分析可能是不
同植物间的差异以及较高浓度的 ＮＯ－３ 抑制了芽的
萌发。
组织培养中常用的有机添加物如椰乳、香蕉和
马铃薯等是一类含有氨基酸、激素、天然维生素以
及酶等有机物且成分较为复杂的天然复合物［１３－１６］。
多数研究证明，有机添加物对细胞和组织的增殖和
分化具有明显的促进作用，许多研究人员在天然有
机添加物的选择与应用方面做了大量的工作［１７－１８］。
本研究结果显示１５％的椰汁最适于蝴蝶兰丛生芽
增殖，１５０ｇ·Ｌ－１的马铃薯或１５０ｇ·Ｌ－１香蕉泥
也可作为低成本有机添加物，这与何松林［１９］等人
的研究结果相一致。
参考文献：
［１］李军，柴向华，曾宝珰，等．蝴蝶兰组培工厂化生产技术 ［Ｊ］．
园艺学报，２００４，（３）：４１３－４１４．
［２］潘学峰，王安石，李海珠．利用丛芽途径快速繁殖蝴蝶兰的研
究［Ｊ］．海南大学学报：自然科学版，２００５，２３（１）：４７－６０．
［３］王云惠，陈雄庭．蝴蝶兰组织培养与基因工程育种研究进展
［Ｊ］．安徽农业科学，２００７，３５ （１６）：４８２７－４８３０，４８６８．
［４］刘亮，易自力，蒋建雄，等．蝴蝶兰丛生芽、原球茎途径的组
织培养研究 ［Ｊ］．亚热带植物科学，２００８，３７ （３）：４３－４５．
［５］陈之林，叶秀粦，梁承邺．蝴蝶兰花葶的离体培养 ［Ｊ］．园艺
学报，２００３，３０ （２）：２４２－２４４．
［６］周俊辉，叶超宏，陈旭高．蝴蝶兰原球茎增殖培养的研究 ［Ｊ］．
仲恺农业技术学院学报，２００２，１５ （３）：１３－１７．
［７］王静，娄玉霞，郝再彬，等．大量元素、有机添加物、激素对蝴
蝶兰原球茎增殖的影响［Ｊ］．上海农业科技，２００４，（３）：２１－２３．
［８］邹金环，赵大勇，刘艳梅，等．蝴蝶兰组织培养快繁技术研究
［Ｊ］．北方园艺，２００５，（６）：８６－８７．
［９］曹孜义，刘国民．实用植物组织培养技术教程 ［Ｍ］．甘肃：甘
肃科学技术出版社，２００２：１７９－１８１．
［１０］ＯＲＬＩＫＯＷＳＫＡ　Ｔ，ＳＡＢＡＬＡ　Ｉ，ＫＵＣＨＡＲＳＫＡ　Ｄ．Ｔｈｅ
ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｌｅａｆ　ａｎｄ　ｓｈｏｏｔ　ｔｉｐ　ｒｅｍｏｖａｌ　ａｎｄ　ｅｘｐｌａｎｔ　ｏｒｉｅｎｔａｔｉｏｎ　ｏｎ
ａｘｉｌａｒｙ　ｓｈｏｏｔ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｏｄｉａｅｕｍ　ｖａｎｅｇａｔｕｍ　Ｂｌｕｍｅ
ｖａｒ．ｐｉｃｔｕｍ　Ｍｕｅｌ ［Ｊ］．Ａｒｇ　ｃｖ　Ｅｘｃｅｌｅｎｔ　Ｓｃｉｅｎｔｉａ　Ｈｏｒｔ，
２０００，８５：１０３－１１１．
［１１］吴宣萱，陈福旗．蝴蝶兰与朵丽蝶兰花梗芽之诱导与刻伤处
理对芽体增殖之影响［Ｊ］．台湾园艺，２００８，５４（１）：６７－７４．
［１２］ＶＡＲＳＨＡ　Ｓ， ＶＩＮＡＹ　Ｋ， ＭＡＨＡＤＥＯ　Ｇ　Ｓ．Ｉｎｄｉｒｅｃｔ
ｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｐｌａｎｔ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｈｅｌｉｃｔｅｒｅｓ　ｉｓｏｒａ　Ｌ．，
ａｎ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｐｌａｎｔ ［Ｊ］．Ｉｎ　Ｖｉｔｒｏ　Ｃｅｌ　Ｄｅｖ　Ｂｉｏｌ－
Ｐｌａｎｔ，２００８，４４ （３）：１８６－１９３．
［１３］何松林，孔德政，杨秋生，等．碳源和有机添加物对文心兰原
球茎增殖的影响 ［Ｊ］．河南农业大学学报，２００３，３７ （２）：
１５４－１５７．
［１４］ＡＬ－ＫＨＡＴＥＥＢ　Ａ　Ａ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｂｕｄ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ
ｄａｔｅ　ｐａｌｍ（Ｐｈｏｅｎｉｘ　ｄａｃｔｙｌｉｆｅｒａ　Ｌ．）ｃｖ．Ｋｈａｎｅｚｉ　ｂｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｃａｒｂｏｎ　ｓｏｕｒｃｅｓ［Ｊ］．Ｂｉｏ　ｒｅｓｏｕｒｃｅ　Ｔｅｃｈｎｏｌ，２００８，９９ （１４）：
６５５０－６５５５．
［１５］ＧＮＡＳＫＡＲＡＮｎ　Ｐ，ＸＡＶＩＥＲ　Ｒ，ＵＭＡ　ＲＡＮＩ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ａ
ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｕｓｅ　ｏｆ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｄｄｉｔｉｖｅｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｔｏｃｏｒｍ－ｌｉｋｅ
ｂｏｄｉｅｓ（ＰＬＢｓ）ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ　ｖｉｏｌａｃｅａ　ｏｒｃｈｉｄ ［Ｊ］．Ｊ
Ｐｈｙｔｏｌ，２０１０，２ （１）：２９－３３．
［１６］ＭＵＲＤＡＤ　Ｒ，ＬＡＴＩＰ　Ｍ　Ａ，ＡＺＩＺ　Ｚ　Ａ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ
ｃａｒｂｏｎ　ｓｏｕｒｃｅ　ａｎｄ　ｐｏｔａｔｏ　ｈｏｍｏｇｅｎａｔｅ　ｏｎ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ
ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｓａｂａｈ′ｓ　ｅｎｄａｎｇｅｒｅｄ　ｏｒｃｈｉｄ：Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ
ｇｉｇａｎｔｅａ［Ｊ］．Ａｓｉａ－Ｐａｃ　Ｊ　Ｍｏｌ　Ｂｉｏｌ，２０１０，１８（１）：１９９－２０２．
［１７］刘明志，朱京育．培养基、ＢＡ和复合添加物对大花蕙兰增殖
和分化的影响 ［Ｊ］．暨南大学学报：自然科学与医学版，
２０００，２１ （３）：１００－１０５．
［１８］刘晓燕，向青云，刘玲玲，等．基本培养基及附加物对蝴蝶兰
原球茎增殖效果的影响［Ｊ］．种子，２００５，２４（６）：１８－２１．
［１９］何松林，蒋要卫，任凝辉，等．培养基、添加物及碳源对蝴蝶
兰试管苗生长的影响 ［Ｊ］．河南农业大学学报，２００６，４０
（２）：１４２－１４５．
（责任编辑：黄爱萍）
９７６第７期 钟海丰等：蝴蝶兰丛生芽增殖培养条件优化研究