全 文 ：作者简介:梁惠珍( 1977—),女 , 硕士 ,助教 , 山西中医学院
(太原　030024);王丽芳 ,山西中医学院附属第二中医院;裴妙荣 ,
单位同第一作者。
小苦苣菜水提取物中木犀草苷的含量测定
梁惠珍　王丽芳　裴妙荣
　　摘要:目的:采用 HPLC法测定小苦苣菜水提取物中木犀草苷的含量。 方法:HPLC法 , DiamonsilC18柱(4.6 mm×
250mm, 5 μm);流动相:乙腈 -0.5%冰乙酸水溶液(20∶80);流速:1.0mL· min-1 ;检测波长:350 nm。结果:木犀草苷含
量在 0.119 2 ～ 0.953 6 μg范围内线性关系良好 , 相关系数 r=0.999 9, 平均回收率为 98.94%, RSD= 1.13 %(n=6)。 结
论:该方法简便 ,可靠 , 可用于小苦苣菜药材的质量控制。
关键词:小苦苣菜;木犀草苷;HPLC
中图分类号:R282.71　文献标识码:A　文章编号:1000-7156(2010)05-0046-02
DeterminationofGaluteolininWater-ExtractofIxerlidiumChinense(Thunb.)byHPLC
LIANGHui-zhen, WANGLi-fang, PEIMiao-rong(ShanxiTCMColege, Taiyuan, 030024,
China)
Abstract:Objective:Todeterminegaluteolininwater-extractofIxerlidiumchinense(Thunb.)byHPLC.
Method:HPLCwasusedinthequantitativeanalysisofgaluteolininthesample.Theseparationwasperformedon
DiamonsilC18(4.6mm ×250 mm, 5μm)columnwithamixtureofacetonitrile-0.5 % aceticacidglacial
(20∶80)asmobilephase.Thedetectionwavelengthwassetat350 nmandtheflowratewas1.0 mL· min-1.
Result:Thelinearrangeofgaluteolinwas0.119 2 μg-0.953 6 μg(r=0.999 9), theaveragerecoverywas
98.94%, RSD=1.13% (n=6).Conclusion:Themethodissimple, reliableandgoodindetermininggaluteo-
lininIxerlidiumchinense(Thunb.).
KeyWords:Ixerlidiumchinense(Thunb.), galuteolin, HPLC
　　小苦苣菜〔Ixerlidiumchinense(Thunb)〕系菊科苦荬菜
属植物小苦苣菜的干燥全草 , 又名苦菜 , 中华苦荬菜等。
味苦 , 性寒 ,具有清热解毒 , 凉血止血等作用。主治肠炎 、
痢疾 、黄疸 、咽喉肿痛 、吐血 、尿血等症 [ 1] 。笔者通过药效
学研究证实小苦苣菜具有显著的降血糖作用。为进一步
将其制成中药制剂 , 向市场推广 , 对其水提取物的质量控
制进行了研究 , 建立了高效液相色谱法测定小苦苣菜水提
取物中木犀草苷含量的方法 ,现报道如下。
1　仪器与试剂
1.1　仪器:岛津 -高效液相色谱仪 , KQ 3200E型超声波
清洗器 , FA2104分析天平 , AB135 -S型电子分析天平 ,
SADⅢA数显恒温水浴锅。
1.2　试剂:液相用乙腈 、甲醇为色谱纯;水为重蒸馏水;其
它试剂均为分析纯;木犀草苷对照品 (批号:111720 -
200501,中国药品生物制品检验所)。
2　方法及结果
2.1　检测波长的选择:取木犀草苷对照品适量 , 加 70%乙
醇制成对照品溶液 , 用二极管阵列检测器记录其吸收光
谱 , 结果显示木犀草苷在 347.1 nm波长处有最大吸收。同
时参照 2005年版药典方法进行测定 , 结果良好 , 故本文最
终采用350 nm作为测定波长。见图 1。
图 1　小苦苣菜中木犀草苷的最大吸收波长
2.2　对照品溶液的配制:准确称取木犀草苷对照品适量 ,
加 70%的乙醇制成每1 mL含 50 μg的溶液 , 即得。
2.3　供试品溶液的制备:取本品 0.3g,精密称定 ,置 25mL
容量瓶中 ,加 70%的乙醇 20 mL, 超声处理 30 min, 放冷 , 加
70%的乙醇稀释至刻度 ,摇匀 ,滤过 ,取续滤液 , 用微孔滤膜
(0.45μL)滤过 ,即得。
2.4　色谱 条件:DiamonsilC18 ( 4.6 mm ×250mm,
5 μm);柱温:室温;流动相 [ 2]:乙腈 -0.5%冰乙酸水溶液
(20∶80);流速:1.0 mL· min-1;检测波长 350nm[ 3] 。理论
塔板数按木犀草苷峰计算 ,应不低于 4 000。见图 2、 3。
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2.5　线性关系考察 :精密吸取木犀草苷对照品 2、 4、 8、
10、12、16μL分别注入液相色谱仪中 , 依法测定其峰面积。
以木犀草苷的量(μL)为横坐标 ,峰面积值为纵坐标 , 绘制
标准曲线 , 得回归方程 Y=665.67X-6712.1,相关系数 r=
0.999 9,表明木犀草苷在 0.119 2 ～ 0.953 6 μg范围内线性
关系良好 , 见表 1。
2.6　精密度试验:精密吸取对照品溶液 10 μL, 重复进样 6
次 , 记录峰面积值 ,结果峰面积值的 RSD为 0.52%,表明仪
表 1　线性关系考察
木犀草苷(μL) 2 4 8 10 12 16
峰面积(A) 130 167 251 814 529 222 660 566 793 007 1 056 440
器精密度良好 ,见表 2。
表 2　精密度试验
序号 1 2 3 4 5 6 RSD(%)
峰面积 663 531 669 423 662 003670 957 665 560 664 586 0.52
2.7　稳定性试验:取同一样品溶液 ,分别在 0、2、4、6、10 h
进样 ,分别测定 , 记录峰面积值 , 结果木犀草苷峰面积在
10h内测定结果稳定 , RSD为 1.03%,见表 3。
表 3　稳定性试验
时间(h) 0 2 4 6 10 RSD(%)
峰面积 734 354 724 257 718 898 716 627 708 123 1.03
2.8　重复性试验 :取同一批样品(第 1批)6份 , 各约
0.3 g,精密称定 , 分别按照供试品溶液制备方法进行提取 ,
含量测定 , 计算。结果平均含量为 10.462 mg/g, RSD为
1.38%, 结果表明本方法重复性良好 ,见表 4。
2.9　加样回收率试验:采用加样回收法 ,取重复性试验所
用样品 0.15 g, 精 密加 入 木犀 草 苷的 对 照品 溶 液
(0.065 5 mg/mL)一定量 , 按供试品溶液制备方法制备 ,
依法测定木犀草苷的含量 , 平均回收率为 98.94%, RSD为
1.13% 。结果见表 5。
表 4　重复性试验
编号 1 2 3 4 5 6 RSD(%)
含量(mg/g) 10.629 10.356 10.520 10.495 10.279 10.428 1.38
表 5　回收率测定结果
取样量(g) 样品含量(mg) 加入量(mg) 测得总量(mg) 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%)
0.153 1 1.60 1.73 3.32 99.42
0.149 8 1.57 1.74 3.32 100.57
0.150 2 1.57 1.73 3.28 98.84
0.153 5 1.61 1.72 3.32 99.42 98.94 1.13
0.148 3 1.55 1.71 3.32 97.66
0.150 7 1.58 1.74 3.28 97.70
2.10　样品测定 :取 3批样品 ,依法制成供试品溶液 ,分别
精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μL, 按 2.4色谱条
件测定 , 以外标一点法计算样品中木犀草苷的含量 , 结果
见表 6。
表 6　样品中木犀草苷含量测定结果
批号 取样量(g)
含量
(mg/g)
平均含量
(mg/g) RSD(%)
1
0.308 3
0.304 8
10.229 6
10.542 5
10.327 6
10.313 4 10.353 3 1.29
2
0.303 5
0.306 5
9.940 2
9.510 7
10.024 3
9.649 1 9.781 1 2.47
3
0.302 1
0.305 0
9.046 8
9.166 7
9.024 9
9.162 8 9.100 3 0.82
3　讨论
3.1　提取方法的选择:由于提取物是小苦苣菜单味药提取
而成 ,成分相对较少 ,不需要过多的处理方法 ,即可将指标成
分木犀草苷较好的分离。故本文直接采用溶剂提取法制备
含测样品。之后又比较了 70%的乙醇回流提取和超声提取
法的提取效率, 差别不大 ,而且超声提取方法简便 ,故本方法
最终采用 70%的乙醇超声提取 ,制备供试品溶液。
3.2　流动相的选择:本文分别采用不同比例的乙腈 -
0.5%冰乙酸作流动相进行考察 , 结果木犀草苷在乙腈 -
0.5%冰乙酸溶液(20∶80)的条件下 , 和本品中其他成分有
较好的分离 , 且峰形良好 , 该方法准确 、灵敏 , 可用于本品
的质量控制。
参考文献:
[ 1] 　江苏新医学院.中药大辞典·上册 [ M] .上海:上海科学技术
出版社 , 1986:1 286.
[ 2] 　王晓飞 ,王晓静.中华苦荬菜化学成分研究 [ J].中草药 ,
2007, 38(8):1 151-1 152.
[ 3] 　国家药典委员会.中国药典(一部)[ S].北京:化学工业出版
社 , 2005:153.
(收稿日期:2010-02-26)
本文编辑:李艳萍
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