全 文 ：HPLC法测定飞廉中木犀草苷的含量
杨海燕1，雷丽萍2，张 成3
(1．陕西省食品药品检验所;2．陕西天士力药业有限公司;3．陕西省医疗器械检测中心，陕西 西安 710061)
摘要:目的 建立飞廉药材中木犀草苷的含量测定方法。方法 色谱条件为 Kromasil 色谱柱(4． 6 mm × 250 mm，5 μm) ，甲醇-
1%冰醋酸溶液(31∶69)为流动相，流速 1． 0 ml·min －1，柱温 30℃，检测波长 350 nm。结果 木犀草苷峰与其它峰分离良好，在
0． 019 3 ～ 0． 969 6 μg范围内呈良好的线性关系，加样回收率为 95． 8%，RSD = 3． 1%(n = 6)。结论 通过该方法可以对飞廉中
的木犀草苷进行定量控制，达到控制药材质量的目的。
关键词:飞廉;高效液相色谱法;木犀草苷
HPLC determination of Lutrolin-7-O-glucoside in Cardui crispi L herba
YANG Hai-yan1，LEI Li-ping2，ZHANG Cheng3
(1． Shaanxi Provincial Institute for Food and Drug Control;2． Shaanxi Tianshili Pharmaceutical Industry Co．，Ltd;
3． The Medical Equipment Examination Center of Shaanxi，Xi’an 710061，China)
Abstract:Objective To establish an HPLC method for the determination of Lutrolin-7-O-glucoside in Cardui crispi L herba． Methods
The separation and assay was performed on Kromasil column (4． 6 mm × 250 mm，5 μm)at column temperature of 30 ℃，methanol-
1% acetic acid solution (31∶69)as mobile phase at a flow rate of 1． 0 ml·min －1 ． The detection wavelength was 350 nm． Results Lu-
trolin-7-O-glucoside peak was well separated from other peaks and had good linear relationship in the range of 0． 019 3 ～ 0． 969 6 μg(r
= 0． 999 9)． The recovery rate was 95． 8%，and RSD = 3． 1% (n = 6)． Conclusion This method is simple，sensitive and reliable to
be used in the determination of Lutrolin-7-O-glucoside in Cardui crispi L herba．
Key words:Cardui crispi L herba;HPLC;Lutrolin-7-O-glucoside
飞廉为菊科植物飞廉 Carduus crispus L的干燥地上部分，
别名马刺蓟、刺萝卜、牛扎口，刺盖、老牛锉、大力王、飞轻
等［1］，在陕西常作为大蓟药用，具有凉血止血、祛瘀消肿之功
效，临床常用于衄血、吐血、尿血、便血、崩漏下血，外伤出血，
痈肿疮毒，泌尿系统感染，现代药理试验表明飞廉在降压及心
血管系统的治疗上有潜在的应用价值［2-3］。全国分布较广，蒙
药、藏药中也有药用的历史［4］。飞廉全草中含有丰富的黄酮
及黄酮苷类，黄酮苷是其主要的活性成分之一［5］，藏药标准
中以芦丁作为定性指标，但通过实际考察测定，飞廉中芦丁的
含量［6］很少，而木犀草苷的含量相对较多［7］，所以选用木犀
草苷作为考察指标，对飞廉的质量加以控制。
1 仪器与试药
岛津 LC-2010 HT型全自动高效液相色谱仪，岛津 UV-2550
紫外分光光度计(日本，岛津)，Sartorius AG ME 235S 电子分析天
平，Sartorius BS 224S 型电子分析天平(德国，赛多利斯)。KQ-
500DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
甲醇(色谱纯，Tedia 公司，美国)、水为超纯水。其余试
剂均为分析纯。
木犀草苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号
111720-200905，供含量测定用，含量 96． 5%) ，实验所用飞廉
药材一部分为自采药材，一部分为市售药材，经陕西省食品药
品检验所郭耀武主任药师及笔者鉴定。
2 色谱条件
色谱柱:Kromasil 100-5C18色谱柱(250 mm × 4． 6 mm，5
μm) ，柱温 30℃;流动相:甲醇-1%冰醋酸溶液(31∶ 69)［8］，流
速为 1． 0 ml·min －1;检测波长为 350 nm［9］;进样量为 10 μl。
3 溶液的制备
3． 1 对照品溶液 精密称取木犀草苷对照品 5． 01 mg 和
4． 69 mg，置 50 ml量瓶中，加 70%乙醇溶解，并稀释至刻度，
摇匀，再精密量取 1 ml，加 70%乙醇稀释至 10 ml 量瓶中，定
容至刻度，摇匀，即得。
参考文献:
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(收稿日期:2012 － 04 － 10)
·1621·安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2012 Sep;16(9)
3． 2 供试品溶液 取飞廉药材适量，粉碎，过三号筛，取 1 g，
精密称定，置锥形瓶中，精密加入 70%乙醇 25 ml，称定重量，
超声处理(功率 300 w，频率 40 kHz)1 h，放冷，用 70%乙醇补
足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0． 45 μm)滤过，取续滤液
作为供试品溶液。
4 方法和结果
4． 1 色谱行为与系统适用性试验 在上述色谱条件下木犀
草苷峰与其它峰分离良好，理论板数以木犀草苷峰计不低于
3 000，对照品、样品色谱图见图 1。
A
B
图 1 飞廉 HPLC色谱图
注:A．对照品色谱图;B．样品色谱图;1．木犀草苷
4． 2 检测波长的确定 取木犀草苷的流动相溶液，以流动相
为空白，在 200 ～ 400 nm范围内进行光谱扫描，结果在 351． 8
处有最大吸收，参考《中国药典》2010 年版一部金银花的含量
测定方法，将检测波长选定为 350 nm。
4． 3 线性关系考察 精密吸取两种对照品溶液适量(①每 1
ml含木犀草苷 10． 02 μg，纯度 96． 5%，实际浓度为 9． 669 3
mg·L －1，进样体积分别为 2、5、10 μl;②对照品溶液每 1 ml
含木犀草苷0． 100 2 mg，纯度 96． 5%，实际浓度为 96． 693 mg
·L －1，进样体积分别为 2、5、10 μl)使相当于对照品
0． 019 338，0． 048 345，0． 096 69，0． 193 38，0． 483 45，0． 966 9
μg 注入液相色谱仪，以峰面积积分值为纵坐标，以进样量
(μg)为横坐标，绘制标准曲线，结果表明木犀草苷在进样量
为 0． 019 3 ～ 0． 969 6 μg范围内呈良好的线性关系，直线方程
为:Y = 3． 210 8 × 106X － 10 912． 5，r = 0． 999 9。
4． 4 精密度试验 精密吸取对照品溶液，连续进样 6 次，测
定峰面积积分值，结果 RSD为 0． 52%，表明精密度良好。
4． 5 稳定性试验 精密吸取样品溶液 10 μl，每隔 3 h进样 1
次，测定峰面积积分值，结果在 18 h内 RSD为 2． 8%，表明基
本稳定。
4． 6 重复性试验 取同批(长安 1)飞廉药材粉 6份，按 3． 2供
试品溶液的制备方法制备供试液，进行含量测定，结果平均含量
为 0． 125 7 mg·g －1，RSD为 2． 3%。结果表明重复性较好。
4． 7 回收率试验 取同批(长安 1)飞廉药材粉 0． 5 g，精密
称定，精密加入浓度为 3． 532 μg·L －1(纯度 96． 5%，实际浓
度为 3． 408 μg·L －1)的木犀草苷对照品溶液 25 ml，称定重
量，超声处理(功率 300 W，频率 40 kHz)1 h，放冷，用 70%乙
醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0． 45 μm)滤过，取续
滤液作为供试品溶液。
按上述 4． 1 色谱条件测其含量，计算加样回收率，见表
1。结果平均回收率为 95． 8%，RSD为 3． 1%，n = 6。
表 1 木犀草苷加样回收率测定结果
序号 取样量 / g
原有
量 /mg
加入
量 /mg
测得总
量 /mg
回收
率 /%
1
2
3
4
5
6
0． 506 5
0． 503 6
0． 519 6
0． 506 4
0． 500 4
0． 491 7
0． 068 7
0． 063 3
0． 065 3
0． 063 7
0． 062 9
0． 061 8
0． 085 2
0． 085 2
0． 085 2
0． 085 2
0． 085 2
0． 085 2
0． 149 2
0． 147 4
0． 149 6
0． 146 7
0． 142 2
0． 140 2
94． 48
98． 71
98． 94
97． 42
93． 08
92． 02
4． 8 样品测定 按上述色谱条件对 5 批飞廉药材进行含量
测定，结果分别为 0． 013 4%、0． 020 4%、0． 016 7%、0． 008
5%、0． 007 3%，根据所测结果规定飞廉药材含木犀草苷应不
低于 0． 005 0%。
5 讨论
从相关文献来看，木犀草苷含量测定方法较少报道，《中
国药典》一部金银花中木犀草苷含量测定采用梯度洗脱的方
法，对仪器要求较高，我们通过对流动相的选择，最终采用等
度洗脱也获得了较好的分离。
在试验中我们比较了甲醇、乙醇、70%甲醇、70%乙醇、
50%乙醇、30%乙醇作为提取溶剂时木犀草苷的含量，结果以
70%乙醇提取率最高，所以选择提取溶剂为 70%乙醇;也比
较了超声处理 20、30、40、50、60 min 和回流 60 min 时的提取
率，结果超声处理 50 和 60 min 的含量基本一致，为最高，最
终选择以超声处理 60 min 为宜，还比较了分别精密加入 20，
25，50 ml的 70%乙醇溶液时木犀草苷的含量，结果以 25 ml
的含量最高，所以加入 25 ml。
从 5 批药材含量测定结果来看，从市场上买来的药材均
为切制后的饮片，含量较低，炮制是否对木犀草苷的含量有影
响，有待进一步考察。
回收率实验可能由于所加入的对照品溶液浓度只有
3． 408 mg·L －1，又没有避光操作，溶液相对不太稳定，导致回
收率 RSD大于 3． 0%，提醒回收率实验时尽量避免浓度过小。
参考文献:
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