全 文 ：［收稿日期］ 20120511(008)
［基金项目］ 国家重大新药创制专项(2009ZX09103-323)
［第一作者］ 邵帅，博士研究生，讲师，从事药物化学、中药化学
及 新 药 研 究 开 发，Tel:13689822307，E-mail:
ss36038612@ 163. com
［通讯作者］ * 严铭铭，博士研究生，教授，从事中药化学及新
药研究开发
小飞蓬药材薄层鉴别与含量测定
邵帅，严铭铭 * ，毕胜男，万志强，黄耀玲
(长春中医药大学，吉林 长春 130117)
［摘要］ 目的:探讨小飞蓬药材定性、定量检测方法。方法:采用 TLC 鉴别小飞蓬中的槲皮素，HPLC 测定小飞蓬中槲皮
素的含量。结果:TLC 以正己烷-乙酸丁酯-甲酸(6∶ 5∶ 1)为展开系统，可以清晰地检测槲皮素;HPLC 采用日本岛津 Shimadzu
C18(4. 6 mm × 250 mm，5 μm)色谱柱，流动相-甲醇-0. 4%磷酸(47∶ 53) ，检测波长 257 nm，流速 1 mL·min
－ 1，柱温 30 ℃，槲皮
素在 0. 504 ～ 1. 134 μg 呈良好线性关系，平均回收率分别为 97. 97% %，RSD 分别为 1. 2 %。结论:该法可作为小飞蓬药材的
定性、定量检测方法。
［关键词］ 小飞蓬;槲皮素;TLC;HPLC
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)24-0101-03
Identification and Determination of Erigeron canawdensis
SHAO Shuai，YAN Ming-ming* ，BI Sheng-nan，WAN Zhi-qiang，HUANG Yao-ling
(Changchun University of Traditional Chinese Medicine，Changchun 130117，China)
［Abstract］ Objective: To discuss detection method of the qualitative and quantitative of Erigeron
canawdensis． Method:TLC was used to determine quercetin of E． canawdensis． The content of quercetin was
determined by HPLC． Result:n-Hexane-butyl acetate-formic (6∶ 5∶ 1)is used as TLC deployment system． It may
clearly detect quercetin;Shimadzu C18 (4. 6 mm × 250 mm，5 μm)column was used in HPLC with mobile phase
methanol-0. 4% phosphoric acid (47∶ 53)． The detection wavelength was set at 257 nm and the flow rate was 1 mL
·min － 1;the column temperature was at 30 ℃ ． The linear range of quercetin were respectively 0. 504-1. 134 μg，and
their average recovery were respectively 97. 97%，RSD were respectively 1. 2% ． Conclusion:This method is
used as detection method of the qualitative and quantitative of E． canawdensis．
［Key words］ E． canadensis;quercetin;TLC;HPLC
菊科植物小飞蓬又名祁州一枝蒿、白花蛇舌草、
竹叶艾、鱼胆草、苦蒿、破布艾、臭艾、小山艾，主产于
东北地区及内蒙古、山西、陕西、山东、浙江、云南等
地，为民间药材。据《长白山植物药志》记载，其性
凉，味辛，苦，具有清热利湿、散瘀消肿的功效，主治
肠炎，痢疾，传染性肝炎，胆囊炎;外用治牛皮癣，跌
打损伤，疮疖肿毒，风湿骨痛，外伤出血;鲜叶捣汁治
中耳炎，眼结膜炎［1］。本课题组以小飞蓬为原料，
对其有效组分群及活性成分进行了系统地研究，从
中提取分离出具有重要药用前景的有效组分群［2］。
为了更好的开发和利用这一民间药用资源，本研究
通过对小飞蓬药材薄层鉴别及含量测定等方面的研
究，建立了小飞蓬药材标准，为更有效地控制小飞蓬
这一民间药材的质量及开发新药提供参考。
1 仪器与试剂
日本岛津高效液相色谱仪，METTLER TOLEDO
电子天平，硅胶 G 预制薄层板(青岛海洋化工厂) ，
HPLC 级甲醇(美国 Fisher 公司) ，其他试剂均为分
析纯。对照品槲皮素(中国药品生物制品检定所) ;
5 个不同产地的小飞蓬药材(来源于吉林省长白县、
蛟河、吉林农大、磐石、左家)经长春中医药大学邓
明鲁教授鉴定为小飞蓬 Erigeron canadensis L． 的干
·101·
第 18 卷第 24 期
2012 年 12 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 24
Dec．，2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.24.029
燥全草。
2 方法与结果
2. 1 定性鉴别
2. 1. 1 对照品溶液制备 取槲皮素对照品适量，分
别加乙醇制成每 1 mL 含 0. 5 mg 的溶液，作为对照
品溶液。
2. 1. 2 供试品溶液制备 取 5 批小飞蓬药材粗粉
各 10 g，加 95%乙醇 150 mL，回流提取 1 h，滤过，滤
液蒸干，残渣加甲醇拌样上聚酰胺，分别用水，50%
乙醇，95%乙醇洗涤，弃去水与 50%乙醇洗脱液，收
集 95%乙醇洗脱液浓缩至 5 mL，作为供试品溶液。
2. 1. 3 按照薄层色谱法［3］试验，分别吸取上述供
试品和对照品液各 15 μL，分别点于同一硅胶 G 薄
层板上，用正己烷-醋酸丁酯-甲酸(6 ∶ 5 ∶ 1)为展开
剂，展开，取出，晾干，喷以 3% 三氯化铝乙醇溶液，
加热至 105 ℃，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试
品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相
同颜色的荧光斑点。见图 1。
图 1 五产地小飞蓬药材薄层色谱鉴别
2. 2 定量测定
2. 2. 1 色谱条件 Shimadzu C18 (4. 6 mm × 250
mm，5 μm)柱，流动相甲醇-0. 4%磷酸(47 ∶ 53) ，检
测波长 257 nm，流速 1 mL·min － 1，柱温 30 ℃［4］。
2. 2. 2 对照品溶液制备 分别精密称取槲皮素
2. 02 mg 置 50 mL 量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻
度，摇匀制成对照品溶液。
2. 2. 3 供试品溶液制备 取小飞蓬药材粗粉 10 g，
加 95%乙醇 200 mL，回流提取 1 h，滤过，滤液蒸干，
残渣加甲醇拌样上聚酰胺，分别用水，50% 乙醇，
95%乙醇洗涤，弃去水与 50% 乙醇洗脱液，收集
95%乙醇洗脱液浓缩至 50 mL，作为供试品溶液。
2. 2. 4 线性关系考察 精密吸取所配制对照品溶
液 8. 0，10. 0，12. 0，14. 0，16. 0，18. 0 μL 注入高效液
相色谱仪中。按照上述色谱条件测定峰面积，以峰
面积为纵坐标，对照品的进样量为横坐标，绘制标准
曲线。计算得槲皮素的回归方程为 Y = 1 070X +
23. 685(r = 0. 999 9)。结果表明，槲皮素在 0. 504 ～
1. 134 μg 线性关系良好。
2. 2. 5 精密度试验 精密吸取对照品液 10 μL，按
上述色谱条件测定，重复进样 5 次，记录所得峰面积
的积分值，测得槲皮素的 RSD 为 0. 44%，试验结果
表明精密度良好。
2. 2. 6 稳定性试验 精密吸取新制备的供试品溶
液分别于配制后室温放置 0，2，4，6，8，10，12 h，精密
吸取 10 μL，按照上述色谱条件测定峰面积积分值，
槲皮素的 RSD 1. 34%，结果表明供试品溶液在 12 h
内稳定性良好。
2. 2. 7 重复性试验 分别称取同批小飞蓬药材粗
粉 5 份，按上述供试品溶液制备，精密吸取 10 μL，
按上述色谱条件测定峰面积积分值，槲皮素的 RSD
1. 41%，重复性良好。
2. 2. 8 回收率试验 精密称取已测定含量的小飞
蓬药材粗粉(长白山)6 份，每份 5 g，分别加槲皮素
1 mg，按供试品溶液制备方法制备，测定。槲皮素平
均回收率为 97. 97%，RSD 1. 20%。见表 1。
表 1 槲皮素加样回收率试验
样品中
量 /mg
加入量
/mg
实测值 回收率 /% 平均值 /% RSD /%
1. 39 1. 02 2. 39 97. 95
1. 31 1. 06 2. 36 99. 22
1. 35 1. 01 2. 34 98. 49
97. 97 1. 203
1. 29 1. 04 2. 31 98. 15
1. 30 1. 03 2. 32 98. 24
1. 32 1. 02 2. 30 96. 05
2. 2. 9 样品的含量测定 精密称取采自不同地区
的 5 份小飞蓬药材粗粉各 10 g，按 2. 2. 3 项下供试
品溶液制备，分别精密吸取对照品溶液及各供试品
溶液各 10 μL，按上述色谱条件依次进样，以外标法
计算其中槲皮素质量分数为 0. 025 3%。见表 2，图
2，3。
3 讨论
小飞蓬中黄酮为其有效组分群，槲皮素为黄酮
类化合物，易溶于乙醇、甲醇、乙酸乙酯等有机溶剂，
常采用回流、超声等提取方法［5］。本实验曾比较了
不同溶剂(乙醇、甲醇、乙酸乙酯)提取;不同提取方
法(回流、超声) ;不同提取时间，结果表明以乙醇回
流提取 1 h 最佳。
鉴别实验中比较了多种展开系统，并用不同薄
层板进行展开，结果采用硅胶 G 薄层板，以正己烷-
乙酸丁酯-甲酸(6∶ 5 ∶ 1)为展开剂，Rf 值适中，斑点
·201·
第 18 卷第 24 期
2012 年 12 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 24
Dec．，2012
表 2 不同产地小飞蓬中槲皮素含量测定
样品
取样量
/ g
含量 /%
平均含量
/%
长白县
5. 05 0. 028 6
0. 028 6
5. 02 0. 028 7
蛟河
5. 06 0. 022 8
0. 022 8
5. 04 505. 9 0. 022 7
吉林农大
5. 01 0. 023 5
0. 023 5
5. 03 0. 023 6
磐石
5. 08 0. 026 3
0. 026 4
5. 09 0. 026 5
左家
5. 06 0. 025 5
0. 025 5
5. 08 0. 025 6
图 2 对照品 HPLC 图谱
图 3 5 个产地小飞蓬 HPLC 图谱
分离较好，经喷 3%三氯化铝乙醇溶液显色后，斑点
清晰，重复性好。含量测定实验中曾比较了不同种
类的流动相，经反复实验以甲醇-0. 4%磷酸(47∶ 53)
为流动相，分离效果最好［6］。
槲皮素为黄酮类化合物，所以在实验中我们选
择几种适合分离黄酮类成分的树脂，以树脂的吸附
量、洗脱量和在洗脱物中槲皮素的含量为指标，对树
脂类型进行筛选。综合考虑多种因素，最终筛选出
聚酰胺树脂，其对小飞蓬中槲皮素的吸附量大，解吸
容易，吸附后浸膏中有效成分的含量高，是一种性能
良好吸附剂。
［参考文献］
［1］ 中国科学院《中国植物志》编辑委员会 ． 中国植物志 ．
第 74 卷［M］．北京:科学出版社，1985:327.
［2］ 邵帅，严铭铭，毕胜男，等 ． 小飞篷化学成分研究［J］．
中国药学杂志，2009，44(14) :1053.
［3］ 国家药典委员会 ．中国药典 ．一部［S］． 北京:中国医药
科技出版社，2010:附录ⅥB．
［4］ 孟宪生，沙明，曹爱民，等 ． HPLC 法测定莲须中槲皮
素和山奈酚的含量［J］．中成药，2003，25(12) :1004.
［5］ 危华玲，杨青，韦红音 ． 高效液相色谱法测定山楂叶提
取物中槲皮素的含量［J］． 中国实验方剂学杂志，
2006，10(8) :10.
［6］ 鞠成国，王巍，赵焕军，等 ． HPLC 测定急性子中总黄酮
的含量［J］．中国实验方剂学杂志，2012，18(1) :77.
［责任编辑 顾雪竹］
·301·
邵帅，等:小飞蓬药材薄层鉴别与含量测定