全 文 ：通讯作者:邓祖磊 Tel:(0552)3012569 E-mail:
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al08@ 163． com
参 考 文 献
1 直接接触药品的包装材料和容器国家标准［S］． YBB00222005．
2005
2 直 接 接 触 药 品 的 包 装 材 料 和 容 器 国 家 标 准［S］．
YBB002020052005
3 直接接触药品的包装材料和容器国家标准［S］． YBB00142003．
2003
4 直接接触药品的包装材料和容器国家标准［S］． YBB00142003．
2003
5 陈芳，梅蕾，潘杰，等． 气相色谱法测定氯乙烯单体含量的不确
定度评定［J］． 中国医药工业杂志，2007，38(11) :777-779
6 陈泱，沈好文，裘婧，等．气相色谱-质谱联用法检测药品包装用
聚氯乙烯类硬片材料中 5 中邻苯二甲酸酯类塑化剂的研究［J］．
药物分析杂志，2014，34(9) :1650-1654
7 周强，徐辉． 偏二氯乙烯-氯乙烯共聚树脂加工性能的改进［J］．
化工生产与技术，2008，15(2) :54-56
8 EP［S］． 8． 0 版． 2014． 378
9 周强，徐辉． 聚氯乙烯(PVC)管材中氯乙烯单体的溶解沉淀-顶
空-气相色谱法测定［J］． 分析测试学报，2010，29(10) :1083-
1086
10 徐洁，阳勇，张太伦，等． 头孢呋辛酯分散片包装材料和药物相
容性研究［J］． 中国药师，2013，16(5) :696-698
(2016-02-01 收稿 2016-03-09 修回)
HPLC法同时测定田基黄颗粒中 3 种黄酮类成分的含量
赵丹1 邓祖磊2 葛德洲2 刘浩1 (1．蚌埠医学院药学系 安徽蚌埠 233000;2．蚌埠市食品药品检验中心)
摘 要 目的:建立测定田基黄颗粒中 3 种黄酮类成分含量的高效液相色谱方法。方法:用 ZOＲBAX Eclipse XDB-C18色谱
柱，流动相为甲醇-0． 2%磷酸溶液(42 ∶ 58) ，检测波长为 350 nm，流速1． 0 ml·min －1。结果:异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素分别在
4． 572 ～ 114． 300 μg·ml －1、7． 028 ～ 175． 700 μg·ml －1、2． 195 ～ 54． 880 μg·ml －1浓度范围内呈良好线性关系(r 分别为
0． 999 8、0． 999 8、0． 999 9) ;平均加样回收率分别为98． 01%(ＲSD = 1． 24%，n = 6)、98． 14%(ＲSD = 0． 98%，n = 6)、97． 00%
(ＲSD = 1． 09%，n = 6)。结论:该方法专属性强、操作简便，可以用于田基黄颗粒的质量控制。
关键词 高效液相色谱法;田基黄颗粒;异槲皮苷;槲皮苷;槲皮素
中图分类号:Ｒ927． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2016)07-1415-03
Simultaneous Determination of Three Flavonoids in Tianjihuang Granules by HPLC
Zhao Dan1，Deng Zulei2，Ge Dezhou2，Liu Hao1(1． Department of Pharmacy，Bengbu Medical College，Anhui Bengbu 233000，China;
2． Bengbu Institute for Food and Drug Control)
ABSTＲACT Objective:To establish an HPLC method for the simultaneous determination of three flavonoids in Tianjihuang gran-
ules． Methods:A ZOＲBAX Eclipse XDB-C18 column was used． The mobile phase was methanol-0． 2% phosphoric acid solution (42
∶ 58)． The detection wavelength was 350 nm and the flow rate was 1． 0 ml·min －1 ． Ｒesults:The linear range of isoquercitrin，quer-
citrin and quercetin was 4． 572-114． 300 μg·ml －1(r = 0． 999 8) ，7． 028-175． 700 μg·ml －1(r = 0． 999 8)and 2． 195-54． 880 μg·
ml －1(r = 0． 999 9) ，respectively． The average recovery was 98． 01%(ＲSD = 1． 24%，n = 6) ，98． 14%(ＲSD = 0． 98%，n = 6)and
97． 00%(ＲSD = 1． 09%，n = 6) ，respectively． Conclusion:The method is specific and simple，which can be used for the quality con-
trol of Tianjihuang granules
KEY WOＲDS HPLC;Tianjihuang granules;Isoquercitrin;Quercitrin;Quercetin
田基黄又名地耳草，具有清热利湿、解毒消肿、散瘀止痛
之功效［1］。田基黄中主要活性成分是异槲皮苷、槲皮苷等黄
酮类成分，有文献报道采用 HPLC法测定田基黄注射液中槲
皮素的含量和 HPLC法测定田基黄注射液中槲皮苷和异槲
皮苷的含量［2，3］。田基黄颗粒具有清热利湿、散瘀消肿的功
效，主要用于病毒性肝炎属肝胆湿热证，是由田基黄制成的
单味制剂，目前标准中仅对槲皮素含量进行了测定，操作步
骤也较为繁琐［4］。为了全面控制药品质量，确保该制剂的疗
效，本文建立了同时测定田基黄颗粒中异槲皮苷、槲皮苷、槲
皮素含量的高效液相色谱法，现报道如下。
1 仪器与试药
1． 1 仪器
Agilent 1260 高效液相色谱仪(含 DAD检测器) ;Sartori-
us BP211D电子天平(德国 Sartorius公司，感量0． 01 mg)。
1． 2 试药
异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素对照品(中国食品药品检定研
究院，供含量测定用，批号分别为 111809-201403、111538-
201105、100081-201408)甲醇为色谱纯;水为重蒸水;其他试
剂均为分析纯;田基黄颗粒:蚌埠火鹤制药有限公司(批号:
150702、150705、150713)。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件
色谱柱:Agilent ZOＲBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(150
5141
中国药师 2016 年第 19 卷第 7 期 China Pharmacist 2016，Vol． 19 No． 07
mm ×4． 6 mm，5 m) ;流动相:甲醇-0． 2%磷酸溶液 (42 ∶
58) ;检测波长:350 nm;流速:l． 0 ml·min －1;柱温:30 ℃;进
样量:10 l。
2． 2 供试品溶液的制备
取田基黄颗粒适量，研细，取约0． 5 g，精密称定，置具塞
锥形瓶中，精密加入甲醇 25 ml，密塞，称定重量，加热回流
60 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取
续滤液，用0． 45 m滤膜滤过，即得。
2． 3 对照品溶液的制备
精密称取异槲皮苷对照品11． 43 mg、槲皮苷对照品
17． 57 mg、槲皮素对照品13． 72 mg分别置 20，20，50 ml 量瓶
中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。分
别精密量取上述对照品储备液 1 ml 至 25 ml 量瓶中，加甲
醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液。
2． 4 阴性样品溶液的制备
按处方比例，取除田基黄以外的辅料，按制备工艺要求
制备阴性样品，再按供试品溶液制备方法制备成阴性样品溶
液。
2． 5 专属性试验
取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液按上述色谱
条件测定，结果供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置
上，有相同保留时间的色谱峰，而阴性样品无干扰，见图 1。
A．对照品 B．供试品 C．阴性样品
1．异槲皮苷 2．槲皮苷 3．槲皮素
图 1 HPLC色谱图
2． 6 线性关系考察
分别精密吸取对照品储备液0． 2，0． 5，1，2，5 ml，分别置
25 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。分别精密吸取 10 l，按
上述色谱条件进样测定，记录色谱峰面积，以浓度(X，μg·
ml －1)对峰面积(Y)进行线性回归，得回归方程为:异槲皮苷
Y = 8． 69X － 12． 84，r = 0． 999 8;槲皮苷 Y = 8． 53X + 6． 71，r =
0． 999 8;槲皮素 Y = 14． 35X + 3． 52，r = 0． 999 9。结果表明，
异槲皮苷在4． 572 ～ 114． 300 μg·ml －1，槲皮苷在7． 028 ～
175． 700 μg·ml －1，槲皮素在2． 195 ～ 54． 880 μg·ml －1范围
内线性关系良好。
2． 7 精密度试验
取混合对照品溶液，按上述色谱条件连续进样 5 次，记
录异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素的峰面积，结果得异槲皮苷、槲
皮苷、槲皮素峰面积的 ＲSD 分别为0． 61%、0． 48%、0． 55%
(n = 5) ，表明仪器精密度良好。
2． 8 重复性试验
精密称取同一批号供试品(批号:150702)6 份，按供试
品溶液的制备方法制备，按上述色谱条件进样测定，记录峰
面积并计算含量。结果测得异槲皮苷平均含量为1． 153 0
mg·g －1，ＲSD 为0． 95%(n = 6) ;槲皮苷平均含量为1． 730 0
mg·g －1，ＲSD 为0． 89%(n = 6) ;槲皮素平均含量为0． 557 0
mg·g －1，ＲSD为0． 83%(n = 6) ，表明本方法重复性良好。
2． 9 稳定性试验
取同一供试品溶液(批号:150702) ，分别于 0，4，8，12，
16，18，24 h，按上述色谱条件进样测定，结果得异槲皮苷、槲
皮苷、槲皮素峰面积的 ＲSD 分别为0． 71%、0． 59%、0． 82%
(n = 7) ，表明 24 h之内供试品溶液稳定性良好。
2． 10 加样回收试验
精密称取已知含量的同一批供试品(批号:150702 )6
份，每份约0． 25 g，精密加入上述对照品储备液各0． 5 ml，常
压下挥干溶剂，然后按供试品溶液制备方法制备溶液，按上
述色谱条件进样测定，记录峰面积并计算回收率。结果表
明，异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素的平均加样回收率分别为
98． 01%(ＲSD = 1． 24%，n = 6)、98． 14%(ＲSD = 0． 98%，n =
6)、97． 00%(ＲSD = 1． 09%，n = 6)。
2． 11 样品测定
取 3 批样品，按“2． 2”项下方法制备，按“2． 1”项下色谱
条件进样测定，结果见表 1。
表 1 样品含量测定结果(mg·g －1，n =3)
批号 异槲皮苷 槲皮苷 槲皮素
150702 1． 1500 1． 7310 0． 5530
150705 1． 0160 1． 6980 0． 5480
150713 0． 9240 1． 8670 0． 5970
3 讨论
3． 1 测定波长的选择
参考文献［2 ～ 9］同时结合 DAD 光谱，发现 3 种化合物在
350 nm处均有较大吸收，因此选用 350 nm作为测定波长。
3． 2 流动相的选择
试验中曾参考相关文献［2 ～ 5］，比较过多种流动相，结果
发现以甲醇-0． 2%磷酸溶液 (42 ∶ 58)作为流动相时，可以使
3 种成分达到较好分离，且基线稳定，因此最终选择该流动
相。
3． 3 提取条件的选择
本文对甲醇、80%甲醇、乙醇等提取溶剂和回流、超声提
取方法进行了比较，结果表明甲醇回流提取效果最好。然后
又对回流提取时间做了考察，分别对样品进行回流 30 min，
45 min，60 min，90 min处理，结果表明随着回流时间延长，含
6141
www． zgys． org 研究报告
量也相应增加，但 60 min后含量无明显变化，故选择回流提
取 60 min。同时还与原标准含量测定提取方法进行了比较，
发现含量结果差别不大，因此最终选用甲醇回流提取 60
min。
3． 4 供试品溶液色谱图中有 4 个明显色谱峰，由于只有 3
种对照品，另一个峰是否为文献报道的田基黄苷还不能确
定［10］，还需要下一步试验证实。槲皮素不是田基黄的特征
成分，原标准只控制单一成分的含量已不能满足目前药品监
管，本文建立的 HPLC 同时测定异槲皮苷、槲皮苷和槲皮素
含量的方法，准确可靠，重现性好，为原质量标准完善修订提
供了参考。
参 考 文 献
1 肖培根．新编中药志［M］． 第 3 卷． 北京:化学工业出版社，2001．
90
2 虞金宝，吕武清，李才堂． HPLC法测定田基黄注射液中槲皮素的
含量［J］．中成药，2005，27(1) :100
3 林焕泽，吴秀荣．高效液相色谱法测定田基黄注射液中槲皮苷和
异槲皮苷的含量［J］．中国药房，2006，17(10) :777
4 国家药品标准［S］． YBZ05102009
5 中国药典［S］． 2015 年版．一部． 218，1085
6 俞建平，陈勇，郑建宝． HPLC测定地耳草中槲皮苷的含量［J］．中
国现代应用药学，2009，26(6) :499-500
7 田刚，彭国平．高效液相色谱法测定地耳草中槲皮素的含量［J］．
中国中药杂志，2004，29(5) :476-478
8 彭维，吴钉红，杨立伟，等． 田基黄药材的质量研究［J］． 中南药
学，2006，4(5) :340-342
9 叶立红，李鹏，彭小燕． HPLC法测定垂盆草配方颗粒中黄酮类成
分的含量［J］．中国药师，2013，16(8) :1161-1163
10 彭维，王永刚，苏微微． HPLC法同时测定田基黄中 4 个黄酮类成
分的含量［J］．中药材，2011，34(8) :1229 -1231
(2016-01-10 收稿 2016-03-14 修回)
基金项目:浙江省丽水市科技计划项目(编号:2010JYZB19)
通讯作者:王发英 Tel:13567094693 E-mail:wangfaying008@ 126． com
明胶空心胶囊中 5 种重金属元素的含量测定
王发英 吴查青 (丽水市食品药品检验所 浙江丽水 323000)
摘 要 目的:研究明胶空心胶囊中铬、铅、镉、铜、锌 5 种重金属含量。方法:采用石墨炉原子吸收法测定明胶空心胶囊中
铬、铅和镉的含量，火焰原子吸收法测定铜和锌的含量。结果:明胶空心胶囊中含铬、铅、镉、铜、锌最高分别为1． 850，0． 404，
0． 019，6． 295，5． 839 mg·kg －1。结论:该方法为明胶空心胶囊中铬、铅、镉、铜、锌的含量测定提供了可靠的检测方法，为其质
量标准的制定提供了科学依据。
关键词 明胶空心胶囊;重金属;原子吸收
中图分类号:Ｒ927． 1 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2016)07-1417-03
Determination of Five Heavy Metal Elements in Vacant Gelatin Capsule Shells
Wang Faying，Wu Chaqing(Lishui Institute for Food and Drug Control，Zhejiang Lishui 323000，China)
ABSTＲACT Objective:To determine the contents of 5 heavy mental elements，Cr，Pb，Cd，Cu and Zn，in vacant gelatin capsule
shells． Methods:Graphite furnace atomic absorption spectrometry was used to determine Cr，Pb and Cd，and flame atomic absorption
spectrometry was used to determine Cu and Zn． Ｒesults:The vacant gelatin capsule shells contained Cr，Pb，Cd，Cu and Zn up to
1． 850，0． 404，0． 019，6． 295，5． 839 mg·kg －1，respectively． Conclusion:The method can be used for the content determination of
Cr，Pb，Cd，Cu and Zn in vacant gelatin capsule shells，which provides scientific basis for the development of quality standard．
KEY WOＲDS Vacant gelatin capsule shells;Heavy metal;Atomic absorption spectrometry
胶囊剂在药品、食品及化妆品等行业使用广泛，其中所
使用的空心胶囊以明胶空心胶囊为主。明胶空心胶囊因原
料及工艺中带入的重金属及有害元素超过一定的限度将危
害人体健康，故急需对其进行限量控制。药典标准对重金属
总含量及铬有相应的控制，但并未对具体重金属元素做精确
的限量规定。因此，对明胶空心胶囊中重金属元素的控制及
完善明胶空心胶囊的质量标准具有重要意义。本文利用原
子吸收分光光度法对明胶空心胶囊中所含 Cr、Pb、Cd、Cu、Zn
等 5 种重金属元素进行测定，旨在为明胶空心胶囊的质量控
制研究提供一种可靠的理论依据。
1 实验材料
1． 1 仪器
3500AA型原子吸收分光光度计(美国 Themofisher) ;电
子天平(XS104，瑞士梅特勒公司) ;微波消解仪(CEM)。
1． 2 试药
元素标准溶液铬(GBW08614 11082)、铅(GBW08619
12075)、镉(GBW08612 13082)、铜(GBW08615 12105)、锌
(GBW08618 13082) ，均购自中国计量科学研究院;硝酸
(Merck公司)、氢氟酸(上海晶纯生化科技股份有限公司)、
磷酸氢二铵(天津市光复精细化工研究所)、磷酸二氢铵(国
药集团化学试剂有限公司)均为优级纯;水为哇哈哈纯净水。
20 批明胶空心胶囊的生产企业和批号信息等见表 5。
2 方法与结果
2． 1 铬、铅、镉、铜、锌元素的测定条件［1，2］
按照表 1和表 2 设置仪器条件，待仪器完成性能检查及
7141
中国药师 2016 年第 19 卷第 7 期 China Pharmacist 2016，Vol． 19 No． 07