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短葶飞蓬种子活力测定方法的初步研究



全 文 :短葶飞蓬种子活力测定方法的初步研究
董志渊,李林玉,王 馨,杨 斌,杨丽英,李绍平* (云南省农业科学院药用植物研究所,云南昆明 650223)
摘要 [目的]研究短葶飞蓬种子活力的测定方法。[方法]比较种子数目、培养温度对种子发芽的影响,并采用 TTC 染色测定种子活
力。[结果]测得种子出苗率为 15. 37%,与培养第 6天的种子发芽数目比例接近; 100和 700粒种子发芽试验的重复间发芽率差异较大,
300和 500粒种子发芽试验的发芽率差异较小;经 TTC染色后,短葶飞蓬种子呈现不同类型,可将全部着色和下部着色的种子认定为具
有活力的种子,其比例为 15. 00%,该数值与发芽势和出苗率接近,试验误差较小。[结论]该方法准确可靠,可用于初步测定短葶飞蓬的
种子活力。
关键词 短葶飞蓬( Erigeron breviscapus) ;发芽势;发芽率; TTC染色
中图分类号 S567. 23 + 9 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611( 2013) 03 -01034 -02
Preliminary Research on the Detection Method for Seed Vigor of Erigeron breviscapus
DONG Zhi-yuan et al ( Institute for Medical Plant,Yunnan Academy of Agricultural Sciences,Kunming,Yunnan 650223)
Abstract [Objective]To research the detection methods for seeds vigor of Erigeron breviscapu. [Method]Effects of seed number and culti-
vation temperature on the germination rate were detected; TTC staining was used to detect the seed vigor. [Result]The germination rate at the
6th day was 15. 37%,which was close to the emergence rate of seeds. Germination rate varied greatly in germination tests of 100 and 700
seeds; but there are relatively few differences in the germination tests of 300 and 500 seeds. After TTC staining,E. breviscapu showed differ-
ent characteristics. The overall colored seeds and bottom colored seeds could be regarded as vigorous seeds,the proportion of which was
15. 00% . This value was close to the germination potential and germination rate. Thus,the experimental error was small. [Conclusion]This
method was accurate and reliable and could be used for the preliminarily detection of seed vigor of E. breviscapu.
Key words Erigeron breviscapus; Germination potential; Germination ratio; TTC staining
基金项目 云南省应用基础研究面上项目( 2010CD099) ;云南省社会发
展科技计划项目( 2012CG029) 。
作者简介 董志渊( 1979 - ) ,男,云南石林人,研究员,博士,从事药用
植物种质资源评价与利用研究。* 通讯作者,副研究员,从
事药用植物研究,E-mail: kmlshp@ 163. com。
收稿日期 2012-11-29
短葶飞蓬(Erigeron breviscapus)又名灯盏花、灯盏细辛,
为菊科(Compositae)飞蓬属(Erigeron)多年生草本植物,以全
草入药,始载于《滇南本草》,现已载入《中华人民共和国药
典》中,具散热解表、活血化瘀、通经活络、舒经治瘫、祛风除
湿和消炎止痛等功效,广泛用于治疗缺血性脑血管疾
病[1 -2]。云南短葶飞蓬野生资源丰富,约占全国灯盏细辛资
源总蕴藏量的 95%,是云南重要的天然药用植物和道地药
材,现已列为云南省重点发展的 5大系列药品之一[3]。
短葶飞蓬主要采用种子进行繁殖。其种子普遍存在种
子成熟度低、种子活力易散失等问题[4]。因此,有必要开展
短葶飞蓬种子质量及其检测方法研究,有效检测种子质量,
满足生产需要。目前,关于短葶飞蓬种子质量研究较少,仅
有李艳兰等对短葶飞蓬种子外部形态、净度和发芽率等进行
了初步研究[5]。笔者重点开展短葶飞蓬种子活力检测方法
研究,以期完善短葶飞蓬种子质量评价方法和技术体系,有
效评价种子的优劣。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 研究对象。短葶飞蓬种子,经鉴定为 Erigeron brevis-
capus的成熟种子。
1. 1. 2 主要仪器。GC-250 型光照培养箱,购自上海悦丰仪
器仪表有限公司。
1. 1. 3 主要试剂。TTC,购自 Amresco 公司;其他试剂均为
分析纯,市售。
1. 2 方法
1. 2. 1 种子发芽进程。在 24 ℃光照条件下,在滤纸上进行
发芽试验,重复 3 次,每次 100 粒种子,每 2 d 统计 1 次发
芽数。
1. 2. 2 种子数目对试验稳定性的影响。选取不同的种子粒
数(100、300、500和 700粒) ,在 24 ℃光照条件下,进行发芽
试验,设置 3次重复,统计发芽率。
1. 2. 3 培养温度对发芽试验的影响。分别设置培养温度为
20、24和 28 ℃,采用 300 粒种子进行发芽试验,分别设置 3
次重复,统计发芽率。
1. 2. 4 TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)染色。随机取 100
粒种子,重复 3次,放在水中前处理 24 h,再放入浓度 1%的
TTC溶液中,在 30 ~35 ℃条件下染色 4 h,染色结束后,用清
水漂洗,鉴定种子的染色状况,设置 3次重复。
2 结果与分析
2. 1 种子发芽曲线 研究表明,第 4天种子开始发芽,发芽
率为(2. 33 ± 1. 53)%;第 6 天发芽数目迅速增加,发芽率达
到(15. 33 ±3. 21)%;第 8天开始发芽数目增加逐渐降低;第
14天发芽停止。
2. 2 种子数目对种子发芽的影响 图2表明,采用100粒种
子进行发芽试验,种子发芽率为(27. 33 ± 4. 16)%;300 粒种
子的发芽率为(23. 89 ± 1. 02)%;500 粒种子的发芽率为
(26. 00 ±1. 22)%;700粒种子的发芽率为(23. 71 ± 3. 38)%。
不同种子数目的发芽率差异不显著(P > 0. 05) ,但种子数目
为100和700粒的发芽率标准差较大,种子数目为300和500
粒的发芽率标准差较小。
2. 3 温度对种子发芽的影响 培养温度为 20 和 28 ℃时,
发芽率较低;其中 20 ℃时发芽率为(20. 00 ± 1. 85)%,28 ℃
时发芽率为(20. 33 ± 1. 45)%;培养温度为 24 ℃时,发芽率
责任编辑 石金友 责任校对 况玲玲安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2013,41(3):1034 - 1035
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2013.03.132
图 1 短葶飞蓬种子发芽进程
图 2 种子数目对种子发芽的影响
达到(23. 89 ± 1. 02)%。统计结果表明,不同培养温度(20、
24和 28 ℃)的种子发芽率差异显著(P <0. 05)。
2. 4 TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)的测定 图 3 表明,
TTC染色后,整体着色深的种子占(12. 33 ± 2. 08)%,整体着
色浅的种子占(6. 33 ± 1. 15)%,上端着色的种子占(5. 67 ±
3. 21)%,下端着色的种子占(2. 67 ± 0. 58)%,无色的种子占
(73. 00% ±3. 46)%。
注:1.着色深;2.着色浅;3.上端着色;4.下端着色;5.无色
图 3 短葶飞蓬种子 TTC染色结果
3 结论与讨论
发芽势是衡量种子活力的重要指标,主要指种子在发芽
试验初期阶段下,在一定的时间内,集中发芽粒数占供试种
子粒数的百分比。研究发现,短葶飞蓬种子培养第 6天种子
发芽数目迅速增加,发芽数目占总发芽数目的 50%以上。试
验结果表明,出苗率为 15. 37%,与培养第 6天种子发芽数目
比例接近。因此,将短葶飞蓬发芽试验第 6 天的发芽粒数占
供试种子粒数的百分比定义为该植物的种子发芽势较适宜。
种子发芽试验中每次重复一般采用 100 粒种子[6 -8]。
短葶飞蓬种子饱满度低,较低种子数目的发芽率可能存在较
大误差。试验分别采用 100、300、500和 700粒种子进行种子
发芽试验,发现100和700粒种子的发芽试验,重复间发芽率
差异较大,300和 500 粒种子的发芽试验,发芽率差异较小。
因此,短葶飞蓬的种子发芽试验中采用 300 或 500 粒种子进
行发芽试验较适宜。
温度是影响种子发芽的重要因素之一。试验表明,不同
的环境温度,种子发芽率存在明显差异[9 -11]。研究发现,温
度对短葶飞蓬种子发芽影响明显,其中 24 ℃培养条件下种
子发芽率较高,可作为该植物种子发芽试验的环境温度。
TTC是检验种子活力的重要方法,广泛应用到川牛膝、
甘草、射干等植物种子活力测定中[6,10,12],而不适用于水青树
种子的活力检测[13]。试验发现,经 TTC染色后,短葶飞蓬种
子呈现不同类型,依据 TTC染色鉴定种子活力的原理,可将
全部着色,下部着色的种子认定为具有活力的种子,其比例
为 15. 00%,该数值与发芽势、出苗率接近。因此,TTC 可作
为检测短葶飞蓬种子活力的快速方法进行应用。
参考文献
[1]国家药典委员会.中国药典(2005版,一部)[S].北京:化学工业出版
社,2005:100.
[2]史云东,袁天军,贾琳,等.不同产地短葶飞蓬中总黄酮含量的比较
[J].安徽农业科学,2011,39(4):2085 -2086,2088.
[3]邱璐,瞿礼嘉,虞泓,等.灯盏花的研究进展[J].中草药,2005,36(1):
141 -144.
[4]俞宏渊,陈宗莲.灯盏细辛的家化栽培[J].云南植物研究,2002,24(3):
115 -120.
[5]李艳兰,杨淑艳,杨向红.灯盏花种子的品质检验[J].云南农业科技,
2008(2):37 -38.
[6]刘千,吴卫,罗浩,等.川牛膝种子质量检验方法研究[J].中国中药杂
志,2011,36(11):1421 -1426.
[7]李红莉,李隆云,徐有明.不同贮藏方式对青蒿种子发芽的影响[J].中
国中药杂志,2009,34(12):1585 -1587.
[8]郭巧生,张贤秀,王艳茹,等.夏枯草种子品质检验及质量标准初步研
究[J].中国中药杂志,2009,34(7):812 -816.
[9]刘琰璐,张昭,戴灵超,等.黄檗种子质量检验规程及分级标准研究
[J].中国中药杂志,2011,36(23):3227 -3232.
[10]于福来,王文全,方玉强,等.甘草种子质量检验方法研究[J].中国中
药杂志,2011,36(6):746 -750.
[11]吾拉尔古丽,王建华,李先恩.板蓝根种子发芽试验标准化研究[J].
种子,2005,24(6):34 -36.
[12]畅晶,张媛媛,李莉,等.射干种子品质检验及质量标准研究[J].中国
中药杂志,2011,36(7):828 -832.
[13]罗靖德,甘小洪,贾晓娟,等.濒危植物水青树种子的生物学特性[J].
云南植物研究,2010,32(3):204 -210.
[14]ZHANG Z Y,QIN S Y,WANG W Q,et al. Effects of Storage Condition on
Seed Vigor of Three Medicinal Plants[J]. Medicinal Plant,2012,3(4):5
-8.
[15]杨青林,王艳芝,季志强,等.电导率法测定玉米种子活力试验初报
[J].内蒙古农业科技,2011(4):33,36.
530141 卷 3 期 董志渊等 短葶飞蓬种子活力测定方法的初步研究