全 文 ：［收稿日期］ 20111009(006)
［通讯作者］ * 陈玉杰，研究生，讲师，从事生物活性成份的分离与鉴定，Tel:15288804547，E-mail:yjie79@ 126． com
蒲公英水提物对大鼠溃疡性结肠炎的实验研究
陈玉杰 *
(济宁医学院 基础医学与法医学院，山东 济宁 272067)
［摘要］ 目的:研究蒲公英水提物对大鼠溃疡性结肠炎疗效及机制。方法:将 60 只大鼠随机分成正常对照组(等容蒸馏
水) ，模型组(等容蒸馏水) ，柳氮磺胺嘧啶(SASP，400 mg·kg － 1)组，蒲公英水提物高、中、低剂量组(150，100，50 mg·kg － 1)。2，
4，6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇溶液 100 mg·kg － 1灌肠制备溃疡性结肠炎大鼠模型，造模 10 d 后，ig 给药，2 mL /次，1 次 / d，连
续 14 d，实验第 14 天断头取血和结肠标本，观察黏膜大体形态及组织学改变，酶标记免疫吸附测定法(ELISA)法测定血清白
细胞介素-6(IL-6) ，白细胞介素-10 (IL-10) ，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，SP 免疫组织化学染色法检测结肠组织转录因子核
因子-κB (NF-κB)p65 表达。结果:蒲公英水提物高、中、低剂量组与模型组比较，大鼠组织大体形态评分显著下降，分别为
(5. 11 ± 0. 43) ，(6. 11 ± 0. 31) ，(7. 01 ± 0. 38) ，(7. 89 ± 0. 31)分(P ＜ 0. 05)。病理组织学评分显著下降，分别为(8. 11 ±
1. 23) ，(9. 37 ± 1. 12) ，(10. 12 ± 1. 32) ，(12. 17 ± 1. 56)分(P ＜ 0. 05)。血清 IL-6 显著降低，分别为(68. 53 ± 18. 21) ，(71. 41 ±
13. 38) ，(80. 24 ± 15. 29) ，(89. 91 ± 19. 13)ng·L － 1(P ＜ 0. 05)。IL-10 水平显著升高，分别为(35. 61 ± 4. 19) ，(29. 39 ± 4. 91) ，
(21. 83 ± 5. 63) ，(19. 51 ± 4. 98)ng·L － 1(P ＜ 0. 05)。TNF-α 显著下降，分别为(36. 27 ± 8. 35) ，(46. 29 ± 9. 32) ，(64. 18 ±
8. 98) ，(71. 27 ± 8. 81) ng·L － 1 (P ＜ 0. 05，P ＜ 0. 01)。NF-κB p65 表达降低，分别为(0. 301 ± 0. 038) ，(0. 351 ± 0. 053) ，
(0. 389 ± 0. 041) ，(0. 411 ± 0. 086)%，(P ＜ 0. 05，P ＜ 0. 01)。高剂量组在各项检测指标与 SASP 组之间差异无显著性。结论:
蒲公英水提物治疗溃疡性结肠炎具有一定的疗效。
［关键词］ 蒲公英水提物;溃疡性结肠炎;白细胞介素-6;白细胞介素-10;肿瘤坏死因-α;转录因子核因子-κB
［中图分类号］ R285． 5 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)08-0205-04
Effect of Dandelion Extract in Ulcerative Colitis Rats
CHEN Yu-jie*
(College of Basic and Forensic Medicine，Jining Medical College，Jining 272067，China)
［Abstract］ Objective:To observe therapeutic effect and mechanism of Dandelion extract in rat ulcerative
colitis (UC)model． Method:Sixty rats were randomly divided into control group，model group， sulfasalazine
group (SASP，400 mg·kg － 1) ，high-dose，medium-dose and low-dose group of Dandelion extract (50，100，
150 mg·kg － 1)． Trinitrobenzene sulphonic acid (TNBS，100 mg·kg － 1)was instilled into the colon of rats to
induce ulcerative colitis． These groups were given relevant drugs with 2 mL，once a day for 14 d． On the day 14，
the rats were sacrificed to collect blood and colon specimens． The morphology and histological changes of mucous
membrane were observed，ELISA was performed to detect the levels of interleukin-6 (IL-6) ，interleukin-10 (IL-
10)and tumor necrosis factor-α (TNF-α) ，and streptavidin-perosidase (SP)was performed to detect expression
of nuclear factor-κB (NF-κB)p65. Result:Compared with model group (7. 89 ± 0. 31，12. 17 ± 1. 56) ，the
Dandelion extract at high-dose， medium-dose and low-dose could reduce the morphologic score of mucous
membrane significantly (5. 11 ± 0. 43) ，(6. 11 ± 0. 31) ，(7. 01 ± 0. 38) ，(P ＜ 0. 05) ，and histological changes
was (8. 11 ± 1. 23) ，(9. 37 ± 1. 12) ，(10. 12 ± 1. 32) respectively，(P ＜ 0. 05)． The level of IL-6 and TNF-α
was decreased (68. 53 ± 18. 21) ，(71. 41 ± 13. 38) ， (80. 24 ± 15. 29) ，(36. 27 ± 8. 35) ， (46. 29 ± 9. 32) ，
(64. 18 ± 8. 98)ng·L － 1 compared with model group (89. 91 ± 19. 13) ，(71. 27 ± 8. 81)ng·L － 1 (P ＜ 0. 05，
P ＜ 0. 01)． Expression of NF-κB p65 was reduced from (0. 411 ± 0. 086)% to (0. 301 ± 0. 038)%，(0. 351 ±
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中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 8
Apr．，2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.08.072
0. 053)%，(0. 389 ± 0. 041)% (P ＜ 0. 05，P ＜ 0. 01)． But there was no obvious difference between Dandelion
extract high-dose group and SASP group． Conclusion:These results indicated that Dandelion extract has effects on
ulcerative colitis．
［Key words］ Dandelion extract;ulcerative colitis;IL-6;IL-10;TNF-α;NF-κB p65
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)是一组病
因不明的慢性肠道炎症，临床主要表现为腹泻、腹痛
和脓血便，多呈反复发作慢性过程，是一种多基因参
与的免疫系统和靶器官的疾病。UC 临床治疗以激
素、水杨酸制剂和免疫抑制剂等为主，但疗效不够满
意，且长期应用有较多的不良反应［1］。蒲公英含有
多种有效成分，具有抗炎、免疫调节等作用［2］。本
研究旨在观察蒲公英水提物对三硝基苯磺酸
(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎模型大鼠血清白介素-
6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-
α)水平及核转录因子-κB(NF-κB)p65 表达的影
响，为蒲公英水提取作为 UC 治疗的新药提供实验
依据。
1 材料
1. 1 动物 SD 大鼠，清洁级，雌雄各半，体重250 ～
300 g，河南省动物实验中心提供，合格证号为 SCXK
(豫)2008-0001。
1. 2 试药 蒲公英，购自张仲景大药房，济宁医学
院 药学院王建安老师鉴定为药用蒲公英 Taraxacum
offtcinale F． H Wigg;三硝基苯磺酸(TNBS，Simga，批
号 20090212) ;柳氮磺胺吡啶(SASP，上海三维制药
有限 公 司，批 号 20090812) ;大 鼠 IL-6 (批 号
20090124 )、 IL-10 (批 号 20090602 )、 TNF-α
(20090501、核转录因子(NF-κB，批号 20090405)酶
联免疫(ELISA)试剂盒均购自于深圳晶美生物工程
有限公司。
1. 3 仪器 酶联免疫检测仪(美国热电-芬兰雷勃
MK3 型酶标仪) ，BP-190S 电子天平(德国 Sartorius
公司) ，Beckman 台式高速离心机(Beckman 公司)。
2 方法
2. 1 动物分组和 UC 模型的建立 SD 大鼠适应性
饲养 1 周后随机分为正常对照组，模型组，蒲公英水
提物高、中、低剂量治疗组，柳氮磺胺吡啶阳性对照
组(SASP 组) ，每组 10 只。除正常组外，其余每组
用 400 mL·L － 1乙醇溶液将 TNBS 配制成 50 g·L － 1的
溶液，采用乌拉坦麻醉大鼠后，将直径 2 mm，长约
12 cm 的塑胶管由大鼠肛门轻缓插入深约 8 cm 处，
将 TNBS 按 100 mg·kg － 1推入大鼠结肠，诱导溃疡性
结肠炎的形成［3］。模型制备 10 d 后，随机选取模型
大鼠 4 只剖腹摘取直肠和结肠，0. 9%氯化钠清洗后
肉眼观察结肠充血及水肿情况，确定造模成功。
2. 2 蒲公英的煎煮 蒲公英加 10 倍量水，煎煮 1
h，煎煮 2 次，过滤，合并 2 次滤液，浓缩至每 1 mL
相当于 1 g 原药材，同时稀释成所需要浓度。
2. 3 给药 造模成功后，蒲公英低、中、高剂量治疗
组分别予以 50，100，150 mg·kg － 1剂量给药，阳性对
照组(SASP 组)予以 400 mg·kg － 1给药。正常对照
组和模型组给与 2 mL 蒸馏水，各组均每日 ig1 次，
每次 2 mL，连续 14 d。
2. 4 标本采集 末次给药后，禁食不禁水 12 h，断
头取血，取全血标本 2 mL 于试管中，以 4 000 r·
min － 1离心 15 min 取血清，于 － 20 ℃冰箱冷冻保存。
将结肠与直肠取出生理盐水冲洗干净后 4% 多聚甲
醛固定，进行肉眼大体形态评分，肠组织部分石蜡包
埋，4 μm 连续切片，HE 染色。
2. 5 大体形态及组织学评分 大体形态按
Ekstrom［4］标准进行评分，组织学评分参照 Dieleman
等［5］标准，根据结肠溃疡深度、范围、炎症程度进行
评分。
2. 6 生化指标的测定 按照 ELISA 试剂盒说明书
分别测定血清 IL-6，IL-10，TNF-α 水平。
2. 7 NF-κB p65 表达情况 按照试剂盒说明书进
行免疫组化染色(SP 法)检测 NF-κB p65 表达。采
用图像分析技术，计数镜下单位面积(1 mm × 1
mm)内的平均阳性细胞数量，评估染色强度和阳性
细胞数量分级，染色积分为 2 者乘积［6］。
2. 8 统计方法 采用 SPSS 16. 0 统计学软件进行
统计分析。计量资料以 珋x ± s 表示，多组间均数的比
较采用单因素方差分析，两组间比较采用 t 检验。
P ＜ 0. 05有统计学意义。
3 结果
3. 1 各组大体形态评分和病理组织学评分 模型
组结肠黏膜明显充血、水肿、糜烂和溃疡;病理学检查
可见炎性细胞浸润，上皮细胞脱落形成浅溃疡，模型
组组织大体评分和病理组织学评分显著高于对照组
(P ＜ 0. 01) ;SASP 和中、高剂量组大体评分和病理组
织学评分较模型组显著下降(P ＜ 0. 05) ，溃疡数量减
少，充血水肿减轻，伴少量炎性细胞浸润，见表 1。
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Vol． 18，No． 8
Apr．，2012
表 1 大鼠结肠组织大体形态和病理组织评分(珋x ± s，n = 10)
组别
剂量
/mg·kg － 1
大体形态评分 病理组织学评分
正常对照 － 0 ± 0 1. 08 ± 0. 37
模型 － 7. 89 ± 0. 312) 12. 17 ± 1. 562)
SASP 400 4. 87 ± 0. 593) 8. 37 ± 0. 613)
蒲公英水提物 50 7. 01 ± 0. 38 10. 12 ± 1. 32
100 6. 11 ± 0. 31 9. 37 ± 1. 123)
150 5. 11 ± 0. 433) 8. 11 ± 1. 233)
注:与正常对照组比较1)P ＜ 0. 05，2)P ＜ 0. 01;与模型组比较
3)P ＜ 0. 05，4)P ＜ 0. 01(表 2 ～ 3 同)。
3. 2 对溃疡性大鼠 IL-6，IL-10，TNF-α 水平的影响
模型组血清 IL-6，TNF-α 含量较正常对照组显著
升高(P ＜ 0. 01) ，IL-10 含量明显降低(P ＜ 0. 01)。
SASP 和蒲公英水提物中、高剂量组 TNF-α，IL-6 含
量较模型组显著降低(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ，IL-10
含量明显升高(P ＜ 0. 05)。高剂量治疗组与 SASP
疗效差异无统计学意义。见表 2。
表 2 蒲公英水提物对溃疡性大鼠 IL-6，IL-10，
TNF-α水平的影响(珋x ± s，n = 10) ng·L － 1
组别
剂量
/mg·kg － 1
IL-6 IL-10 TNF-α
正常对照 － 51. 69 ± 11. 27 41. 27 ± 5. 87 31. 39 ± 9. 27
模型 － 89. 91 ± 19. 132) 19. 51 ± 4. 982) 71. 27 ± 8. 812)
SASP 400 62. 39 ± 13. 463) 38. 27 ± 4. 814) 35. 71 ± 8. 294)
蒲公英水提物 50 80. 24 ± 15. 29 21. 83 ± 5. 63 64. 18 ± 8. 98
100 71. 41 ± 13. 383) 29. 39 ± 4. 91 46. 29 ± 9. 323)
150 68. 53 ± 18. 213) 35. 61 ± 4. 193) 36. 27 ± 8. 354)
3. 3 对溃疡性大鼠 NF-κB p65 表达的影响 与
NF-κB p65 表达相比，模型组表达较正常组显著升
高 (P ＜ 0. 01)。与模型组相比，SASP 和中、高剂量
组阳性细胞显著降低(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01)。见
表 3。
表 3 蒲公英水提物对溃疡性大鼠 NF-κB
p65 表达的影响(珋x ± s，n = 10)
组别 剂量 /mg·kg － 1 NF-κBp65 阳性细胞 /%
正常对照 － 0. 213 ± 0. 271
模型 － 0. 411 ± 0. 0862)
SASP 400 0. 279 ± 0. 0384)
蒲公英水提物 50 0. 389 ± 0. 041
100 0. 351 ± 0. 0533)
150 0. 301 ± 0. 0384)
4 讨论
大量研究表明，免疫调节异常在 UC 的发病中
占有重要地位，促炎细胞因子与抗炎细胞因子相互
作用失去平衡，继之导致结肠组织免疫损伤，从而产
生一系列临床症状。其中 IL-6，IL-10 与 UC 的具有
密切相关性［7］。IL-6 为促炎症因子，IL-6 升高程度
与局部炎症程度相一致。 IL-10 为一种抑炎性细胞
因子，血浆 IL-10 浓度降低炎性反应，促使溃疡的形
成。TNF-α 作为一种重要的免疫介质，常与 T 淋巴
细胞以及其他一些因子构成复杂的免疫调节网
络［8］。此外，TNF-α 还可通过激活转录因子核因
子-κB (NF-κB)通路，上调 IL-6，IL-8 等促炎介质表
达，使早期炎症迁延，正因为 IL-6，IL-10，TNF-α，NF-
κB 表达都与 UC 的发生、发展有密切的关系，检测
UC 患者的相关含量，可作为临床判断 UC 患者病变
严重程度和活动性指标。
蒲公英是菊科多年生草本植物，含有多种有效
成分，蒲公英水提液降低癌细胞活性，能发挥抗肿瘤
作用的有效成分，并在有效预防化学致癌方面有很
大的发展前景，可安全用于临床肿瘤治疗，能增强动
物的免疫功能［9］。能有效清除超氧阴离子自由基、
羟自由基［10］。本研究应用 TNBS 诱导大鼠溃疡性
结肠炎模型，并以蒲公英水提物进行治疗。结果显
示模型大鼠血清 TNF-α，IL-6 水平较对照组明显升
高，IL-10 水平降低，NF-κB p65 表达增加，说明模型
大鼠存在促炎因子与抗炎因子失衡，经治疗后，高、
中剂量组大鼠血清的 TNF-α，IL-6 水平显著降低，
IL-10 水平显著升高，NF-κB p65 表达降低。显示蒲
公英水提物能通过调节细胞因子的水平使肠黏膜免
疫调节紊乱得以恢复，促进溃疡愈合。而且，实验显
示高剂量蒲公英水提物与 SASP 组在各项检测指标
差异无统计学意义，这为临床上应用提供了理论和
实验依据。
［参考文献］
［1］ 陈爱民，刘永芬，熊雯雯，等 ． 芪仙汤对溃疡性结肠炎
患者血清 TNF-α，IL-8 的影响及疗效观察［J］． 中国
实验方剂学杂志，2011，17(8) :255．
［2］ 姜宁，宋新波 ．蒲公英的药理研究进展［J］． 中国中医
药杂志，2008，12(6) :19．
［3］ 奚苗苗，张三奇，顾宜，等 ．果胶-酮洛芬前药对大鼠实
验性溃疡性结肠炎的治疗作用［J］． 第三军医大学学
报，2009，30(13) :1231．
［4］ Ekstrom G M． Oxazolone-induced colitis in rats:effects
of budesonide，cyclosporin A，and 5-aminosalicylic acid
［J］． Scand J Gastroenterol，1998，33 (2 ) :174．
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陈玉杰:蒲公英水提物对大鼠溃疡性结肠炎的实验研究
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
［5］ Dieleman L A， Palmen M J， Akol H， et al．
Chronicexperimental colitis induced by dextran sulphate
sodium ( DSS ) is characterized by Th1 and Th2
cytokines ［ J］． Clin Exp Immunol， 1998，114
(3) :385．
［6］ 陈建权，刘建平，郎晓猛，等 ． 泄浊解毒方对溃疡性结
肠炎大鼠 IL-10、TNF-α 及 NF-κB 表达的影响［J］． 中
华中医药杂志，2010，25(3) :423．
［7］ 李楠，王雪明，翟俊山，等 ． 复方血竭对溃疡性结肠炎
大鼠模型结肠组织细胞因子的调节作用［J］． 中国实
验方剂学杂志，2008，14(1) :53．
［8］ 刘晓玲，王汝俊，李燕舞，等 ． 康肠宁对 DNCB 诱导的
大鼠实验性溃疡性结肠炎的治疗作用［J］． 中国新药
与临床药理，2010，21(3) :248．
［9］ 吴晓春，杜胜利，陈海生 ． 蒲公英的研究与应用［J］．
药学实践杂志，2002，4(20) :247．
［10］ 陈景耀，龚祝南，宰学明，等 ． 蒲公英提取物黄酮类物
质成分及其抗氧化活性的初步研究［J］． 中国野生植
物资源，2001，20(3) :22．
［责任编辑 聂淑琴］
［收稿日期］ 20110121(003)
［通讯作者］ * 孙玉华，硕士，研究员，硕士研究生导师，从事心血管药理学、糖尿病药效学研究，Tel:0991-2812070，E-mail:sunyuh1117@
yahoo． com． cn
复方杞鹰颗粒治疗糖尿病周围神经病变的研究
孙玉华 * ，徐磊，张兰兰，哈木拉提，庞市宾，刘晓燕，胡梦颖
(新疆维吾尔自治区药物研究所，乌鲁木齐 830004)
［摘要］ 目的:研究复方杞鹰颗粒对大鼠糖尿病周围神经病变的治疗作用。方法:用 Wistar 大鼠，高脂、高糖饮食 8 周，
小剂量 STZ 35 mg·kg － 1 ip 12 周后，形成 2 型糖尿病周围神经病变模型，复方杞鹰颗粒低、中、高剂量(1. 17，2. 34，4. 68 g·kg － 1)
治疗 8 周。测定坐骨神经、尾神经传导速度，全血黏度、糖化血红蛋白、测定坐骨神经醛糖还原酶和 Na + /K + ATP 酶活性。结
果:复方杞鹰颗粒有较好的降血糖作用，同时可抑制糖化产物的形成;可改善糖尿病周围神经病变大鼠的血液流变学指标;可
以增加糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经中 Na + /K + -ATP 酶的活性;可以延缓糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经中醛糖还
原酶的活性的升高，改善神经功能。结论:复方杞鹰颗粒可以改善糖尿病周围神经病变所引起的神经损害。
［关键词］ 复方杞鹰颗粒;糖尿病周围神经病变;血液流变学;Na + /K + -ATP 酶;醛糖还原酶
［中图分类号］ R285． 5 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)08-0208-04
Experimental Study on Effect of Compound Qiying Granule on Diabetic
Peripheral Neuropathy in Rats
SUN Yu-hua* ，XU Lei，ZHANG Lan-lan，Hamlati，PANG Shi-bin，LIU Xiao-yan，HU Meng-ying
(Xinjiang Institute of Meteria Medica，Urumchi 830004，China)
［Abstract］ Objective: To observe the therapeutic action of compound Qiying granules on diabetic
peripheral neuropathy in rats． Method:The model of diabetic peripheral neuropathy was established as follows:
the rats were given high-fat and high-sugar feed for 8 weeks，and then injected streptozocin (35 mg·kg － 1) by
intraperitoneal injection for 12 weeks，next the model rats were treated by compound Qiying granules for 8 weeks．
Result:The results showed that compound Qiying granule has preferable effect on regulating level of the blood
sugar and restraining producing of saccharify products simultaneously，improving parameters of hemorheology and
the activity of Na + /K + ATP-ase and postponing enhancement activity of aldose reductase． Conclusion:Compound
Qiying granule can protect against nerve injury caused by diabetic peripheral neuropathy in diabetes type II rats．
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Apr．，2012