全 文 :中国花卉园艺·半月刊88
应 用 研 究
鼠尾草‘五月夜’(Salvia nemorosa‘May Night’)植株整齐,分枝较好,花期5~9月,是优良的多年生花坛及背
景植物材料,也可以成丛成片点缀于林缘、路旁、篱旁,在花坛花卉中应用较多。
1 材料和方法
1.1 试验材料
鼠尾草‘五月夜’健康植株,取生长健壮、无病虫害、带侧芽的茎段作为外植体。
1.2 试验条件
接种后的材料置于温度为25℃±2℃的培养室内培养,以日光灯为光源,光照强度为2000lux,每天光照时间为12小时。
1.3 试验方法
1.3.1 无菌材料的获得 分别在2月和5月中午11∶00至下午2∶00之间,取生长健壮的茎段为外植体,用洗衣粉洗刷外
植体5min,自来水洗干净后,用流水冲洗0~30min后移到超净工作台上,分别用75%酒精处理0~60s和1%次氯酸钠溶液
处理10~40min后,无菌水洗5遍,吸干外植体表面的水分,接种到MS基本培养基中。7天后统计外植体污染率。
1.3.2 增殖培养 将得到的无菌外植体接种到不同的增殖培养基上,选用MS为基本培养基,加入不同浓度的6~BA、NAA,
附加6~BA浓度为0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、3mg/L,附加NAA浓度为0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.3mg/L,
一个月后统计增殖率,筛选出增殖率高且增殖的芽较健壮的激素配比。
1.3.3 生根培养 获得一定数量的增殖苗后,将鼠尾草苗转到生根培养基中。以1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的
NAA,设立4个浓度,依次为0、0.01mg/L、0.1mg/L和0.5mg/L,2周后统计生根率和根生长状况。
1.3.4 移栽 选取生长势良好、植株健壮的生根苗,在温室
炼苗后从瓶中取出,洗净其根部的培养基,栽植在穴盘中,一
个月后统计成活率。
1.4 统计方法
成活率=成活外植体数/接种总外植体数;增殖率=增
殖出苗数/原苗数;生根率=生根苗数/总苗数。
2 结果与分析
2.1 不同灭菌时间的成活情况
从表1可以看出,在2月和5月两个接种时间里,2月份
的成活率普遍高于5月份,且在2月份不需要流水冲洗,在不
鼠尾草组培研究简报
汪永诚 李丽芳
(北京市花木公司 北京 100044)
表1 外植体灭菌效果对比
接 种 流水冲洗 酒精处理 1%次氯酸钠处理 成活率
时 间 (min) (s)(min) (%)
2月 0 0 10 87.5
2月 0 0 15 92.9
2月 0 0 20 94.4
2月 0 0 30 80.0
5月 0 30 15 75.0
5月 0 30 20 81.0
5月 30 30 35 36.0
5月 30 30 40 26.0
5月 30 60 20 50.0
5月 30 60 30 86.0
5月 30 60 35 60.0
摘 要 本文通过对鼠尾草‘五月夜’的组培研究,得到了鼠尾草‘五月夜’的组培方法。外植体灭
菌用1%次氯酸钠处理20min,接种到MS+BA2mg/L+NAA0.2mg/L的培养基上进行增殖,生根培养基为
1/2MS+NAA0.1mg/L,生根2周左右可进行移栽。
关键词 鼠尾草 组织培养
892009/04/15第08期
Yan jiu
用酒精灭菌的情况下,只用1%次氯酸钠灭菌20min,即可达到
理想的灭菌效果,成活率达94.4%。而在5月份,在流水冲洗
30min,酒精灭菌1min,1%次氯酸钠处理30min的情况下,成
活率也可达到86.0%,低于2月份接种的成活率。
2.2 不同浓度激素对‘五月夜’增殖的影响
将获得的无菌外植体转接到增殖培养基上,2周后接种茎尖
的基部增殖出小芽,并逐渐形成芽丛。在接种后一个月统计增殖
的情况,统计结果见表2。
从表2可以看出,激素浓度的不同对鼠尾草的增殖有明显的
影响。茎尖的增殖率在BA2mg/L、NAA0.2mg/L时,增殖率最
高为3.6%,但不定芽较弱,且易出现玻璃化现象。而在BA1mg/L、
NAA0.1mg/L时增殖率也较高,为3.2%,且芽较壮,因此选
MS+BA1mg/L+NAA0.1mg/L为增殖培养基。
2.3 不同浓度激素对‘五月夜’生根的影响
将生长健壮的芽转接到不同生根培养基上。2周后芽的基部上开始出现小突
起,随后1周发育为不定根。随着时间的推移,根不断增多,长成为完整的再生
植株。3周后观察生根的情况,其统计结果见表3。
从表3中可以看出,激素浓度的不同对鼠尾草组培苗的生根有一些影响,在
1/2MS中即可达到一个较好的生根效果。当添加了NAA0.1mg/L时,生根率最
高达到96%。
2.4 生根苗的移栽
生根2周后,选取生长势良好、植株健壮的组培苗,在温室内炼苗两天,用温水洗净根部培养基后移栽到128穴盘中,移
栽基质配比为草炭∶松针∶珍珠岩∶蛭石=5∶2∶2∶1,pH值为6.0左右,一个月左右即可满穴。
3 小结
鼠尾草的组培流程是:2月份取外植体较易灭菌,外植体灭菌用1%次氯酸钠处理20min,接种到MS+BA1mg/L+NAA0.1mg/L
的培养基上进行增殖培养,生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L,生根2周左右即可进行移栽。
表2 ‘五月夜’增殖培养基对比
外 基本 BA浓度 NAA浓度 增殖率
植体 培养基 (mg/L) (mg/L) (%)
茎 MS 0.5 0.052
茎 MS 1 0.13.2
茎 MS 2 0.23.6
茎 MS 3 0.3
表3 ‘五月夜’生根培养基对比
基本培养基 NAA浓度(mg/L) 生根率(%)
1/2MS
0 63
0.1 96
0.3 85
接种 增殖培养 生根培养
瓶苗移栽