全 文 ： ［收稿日期］ ２０１２－０９－０７；２０１２－１１－１６修回
［基金项目］ 国家社会科学基金项目“白族民间医药文化调查研究”（１２ＸＭＺ０３３）；贵州省科学技术基金项目“民族药攀援耳草化学成分及
药理活性研究”［黔科合Ｊ字ＬＫＭ（２０１１）０６］
［作者简介］ 何可群（１９７１－），女，副教授，硕士，研究方向：药用植物学和分析化学。Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｅｋｅｑｕｎ２００４＠１６３．ｃｏｍ
［文章编号］１００１－３６０１（２０１３）０１－００２３－００７７－０３
贵州鼠尾草的总黄酮含量测定
何可群１，卢文芸１，李相兴２，赵宇中１，杨 琼１
（１．贵州民族大学 化学与环境科学学院，贵州 贵阳５５００２５；２．贵州民族大学 民族学与
社会学学院，贵州 贵阳５５００２５）
［摘 要］为了探明贵州鼠尾草中的黄酮类物质含量，为其合理开发和科学利用提供参考，采用超声辅
助提取法和紫外可见分光光度法对其总黄酮含量进行测定。结果表明：贵州鼠尾草中的总黄酮含量为
１４．６９％。因此，贵州鼠尾草中的黄酮类物质含量较丰富。
［关键词］鼠尾草；分光光度法；总黄酮含量；贵州
［中图分类号］ＴＳ２０１ ［文献标识码］Ａ
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｏｔａｌ Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｆｒｏｍ
Ｓａｌｖｉａ ｃａｖａｌｅｒｉｅｉ ｉｎ Ｇｕｉｚｈｏｕ
ＨＥ Ｋｅｑｕｎ１，ＬＵ Ｗｅｎｙｕｎ１，ＬＩ Ｘｉａｎｇｘｉｎｇ２，ＺＨＡＯ Ｙｕｚｈｏｎｇ１，ＹＡＮＧ Ｑｉｏｎｇ１
（１．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｇｕｉｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｆｏｒ Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｇｕｉｙａｎｇ，Ｇｕｉｚｈｏｕ
５５００２５；２．Ｅｔｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｓｏｃｉｏｌｏｇｙ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｇｕｉｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｆｏｒ Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｇｕｉｙａｎｇ，Ｇｕｉｚｈｏｕ
５５００２５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ Ｓ．ｃａｖａｌｅｒｉｅｉ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ ａｎｄ ｖｉｓｉｂｌｅ
ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ ｉｔｓ ｒａｔｉｏｎａｌ ｅｘｐｌｏｉｔａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ
ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ Ｓ．ｃａｖａｌｅｒｉｅｉ ｗａｓ １４．６９％．Ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｔｌｙ，ｔｈｅ Ｓ．ｃａｖａｌｅｒｉｅｉ
ｗａｓ ｏｆ ｖｅｒｙ ａｂｕｎｄａｎｔ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｓａｌｖｉａ ｃａｖａｌｅｒｉｅｉ；ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ；ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｃｏｎｔｅｎｔ；Ｇｕｉｚｈｏｕ
唇形科（Ｌａｍｉａｃｅａｅ）鼠尾草属（Ｓａｌｖｉａ）植物中
有许多极具药用开发价值的品种，如民间常用云南
鼠尾草（Ｓａｌｖｉａ ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ Ｃ．Ｈ．Ｗｒｉｇｈｔ）和甘西
鼠尾 草 （Ｓａｌｖｉａ ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ Ｍａｘｉｍ）替 代 丹 参
（Ｓａｌｖｉａ ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ）作药使用［１－３］。贵州鼠尾草
（Ｓａｌｖｉａ ｃａｖａｌｅｒｉｅｉ Ｌéｖｌ．）又名紫背鼠尾草、朱砂
草、血盆草、反背红、叶下红等，其以全草入药，具有
凉血解毒，散瘀止血功效。用于肺结核咯血、衄血、
血痢、血崩、刀伤出血、月经过多、胃腕痛的治疗；外
用治疗跌打损伤，疖肿等［４－７］，是贵州苗族、侗族等少
数民族的常用植物药。蔡亚玲等［８］的研究结果表
明，贵州鼠尾草的化学成分主要为萜类、黄酮类和酚
酸类，其总三萜酸含量为１．０５％；王和英等［９］从贵
州鼠尾草全草中分离出乌苏酸、白桦酸、迷迭香酸及
胡萝卜苷等化学成分。目前，国内外还未见有关贵
州鼠尾草总黄酮测定的研究报道，为此，笔者采用超
声辅助提取法和紫外可见分光光度法测定贵州鼠尾
草的总黄酮含量，以期为该民族药资源的进一步合
理开发和科学利用提供科学依据。
１ 材料与方法
１．１ 材料
１．１．１ 样品采集 贵州鼠尾草采自贵阳市花溪十
里河滩，经贵州民族大学民族药物研究所卢文芸副
教授鉴定为贵州鼠尾草（Ｓａｌｖｉａ ｃａｖａｌｅｒｉｅｉ Ｌéｖｌ．），
标本保存于贵州民族大学化学与环境科学学院药学
教研室。
１．１．２ 试剂 氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝、无水
乙醇和石油醚均为分析纯，芦丁对照品（色谱纯），购
自贵州迪大科技有限责任公司。
１．１．３ 仪器 ７５６ＰＣ紫外－可见分光光度计（上海
舜宇恒平科学仪器有限公司），ＭＥＴＴＬＥＲＡＥ２４０
电子分析天平（上海天平仪器厂），ＢＧＺ－３０电热鼓风
干燥箱（上海博迅实业有限公司医疗设备厂），
ＳＧ３２００ＨＥ超声清洗仪（上海冠特超声仪器有限公
司），数显恒温水浴锅（常州博远实验分析仪器有限
公司）。
１．２ 方法
１．２．１ 样品预处理 将洗净自然晾干的贵州鼠尾
草在电热鼓风干燥箱中于（６０±１）℃烘５ｈ，粉碎，
过四号筛备用。
１．２．２ 样品溶液的制备［１０－１２］ 精确称取干燥、研
碎的贵州鼠尾草粉末２．００ｇ，按１∶２０的固液比用
体积分数为７０％的乙醇浸泡、超声提取３０ｍｉｎ（超
声频率４０ＫＨｚ，功率１５０Ｗ）２次，提取结束后，合
并提取液、过滤、冷却、用沸程３０～６０℃的石油醚萃
贵州农业科学 ２０１３，４１（１）：７７～７９
Ｇｕｉｚｈｏｕ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
取除去叶绿素，浓缩，用７０％的乙醇定容至１００
ｍＬ、摇匀备用。
１．２．３ 芦丁标准溶液的制备 精确称取干燥至恒
重的芦丁标准品２７．５ｍｇ，置５０ｍＬ容量瓶中，加７０％
乙醇适量，置水浴上微热使其溶解，冷却，加入７０％乙
醇至刻度，摇匀，使芦丁含量为０．５５０ｍｇ／ｍＬ。
１．２．４ 标准曲线的绘制［１３－２０］ 精确吸取质量浓度
为０．５５０ｍｇ／ｍＬ的芦丁标准溶液０ｍＬ、０．２５ｍＬ、
０．５０ｍＬ、１．００ｍＬ、２．００ｍＬ、３．００ｍＬ、４．００ｍＬ分
别置于７支１０ｍＬ比色管中，加体积分数为７０％的
乙醇补足至５．０ｍＬ，分别加入５０ｇ／Ｌ亚硝酸钠溶
液０．４０ｍＬ，摇匀，放置６ｍｉｎ后，精确加入５０ｇ／Ｌ
硝酸铝溶液０．４０ｍＬ，摇匀，放置６ｍｉｎ，再精确加入
４０ｇ／Ｌ氢氧化钠溶液４．００ｍＬ，并用体积分数为
７０％的乙醇稀释至刻度，摇匀，静置１２ｍｉｎ。以试
剂空白为对照，于一定波长下测定吸光度Ａ，并以吸
光度为纵坐标，显色液中芦丁的质量浓度 Ｃ（ｍｇ／
ｍＬ）为横坐标绘制标准曲线，计算芦丁溶液的线性
回归曲线方程及相关系数。
１．２．５ 测定波长的选择 精确吸取芦丁标准溶液
（０．５５０ｍｇ／ｍＬ）和贵州鼠尾草提取液各１．００ｍＬ，
分别置于２支１０ｍＬ比色管中，显色后，以相应试
剂为空白，分别在２００～７００ｎｍ处扫描，以确定波
长的最大吸收值。
１．２．６ 样品测定［１３－２０］ 精确量取１．２．２所得贵州
鼠尾草乙醇提取液５份，每份１．００ｍＬ，按标准曲线
绘制方法加显色剂处理，于确定波长处测定贵州鼠
尾草的吸光度Ａ，代入回归方程计算出贵州鼠尾草
的总黄酮含量。
１．２．７ 重复性试验 精确称取２．００ｇ贵州鼠尾草
全草样品５份，按１．２．２方法制溶液，根据１．２．６进
行测定，计算平均含量及ＲＳＤ值。
１．２．８ 加样回收率试验 精确称取５０．００ｍｇ贵
州鼠尾草全草样品３份，再精确加入芦丁标准溶液
（浓度为０．５５０ｍｇ／ｍＬ）４．００ｍＬ，按样品含量测定
方法（１．２．２及１．２．６）进行提取、测定，计算加标回
收率及ＲＳＤ值。
２ 结果与分析
２．１ 标准曲线的绘制
以吸光度（Ａ）为纵坐标，芦丁浓度Ｃ（ｍｇ／ｍＬ）
图１ 芦丁标准曲线
Ｆｉｇ．１ Ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｕｒｖｅ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｕｔｉｎ
为横 坐 标，绘 制 标 准 曲 线，得 回 归 方 程 Ａ ＝
９．９２６ １Ｃ＋０．０１３，Ｒ２＝０．９９９ ７。结果（图１）表明，
芦丁浓度在０．０１３ ７５～０．２２０ ０ｍｇ／ｍＬ范围内与
吸光度呈良好的线性关系。
２．２ 测定波长的确定
由图２、图３看出，芦丁标准溶液和贵州鼠尾草
样品溶液显色后，在５１０ｎｍ处均有较平缓的吸收
峰，适于定量测定。
２．３ 贵州鼠尾草中的总黄酮含量
经测定，贵州鼠尾草样品中总黄酮的平均含量
为１４．６９％，重复性试验ＲＳＤ 为１．２２％。说明，精
密度较高。
２．４ 加样回收率
测定３份样品的回收率为９７．３０％～９７．９７％，
ＲＳＤ为０．３４４％。说明，该方法测定的样品具有较
高的回收率，准确度符合分析要求。
３ 结论与讨论
黄酮类化合物是植物药中广泛存在的化学成分
之一，由于其显著的生理活性，近年，已成为中草药
的研究热点，对黄酮类物质进行深入研究是开发新
药的良好途径，目前已开发出如灯盏花总黄酮、黄芩
总黄酮、甘草总黄酮、银杏叶总黄酮、葛根总黄酮等
一些有价值的药品。研究结果表明，贵州鼠尾草全
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贵 州 农 业 科 学
Ｇｕｉｚｈｏｕ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
草的总黄酮含量较高，为１４．６９％。说明，贵州鼠尾
草干燥全草中黄酮类物质含量较丰富。
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（责任编辑：陈 静
櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁
）
（上接第７６页）
促进了可溶性糖向生物碱、蛋白质等其他物质的转
化，以此保持铁皮石斛较高的光合作用，增加其药用
价值，但详细机理还有待于进一步研究。
蛋白质是生物体内重要的有机化合物，是生命
活动的物质基础，不仅参与体内各种物质代谢，同时
又能参与信息传递和保障机体本身的防御作用。从
微观上来说，可溶性蛋白质能够维持细胞的结构，并
作为一种渗透调节物质，保持细胞水势，促进细胞新
陈代谢，是植物生命能力的体现［１２］。水杨酸预处理
后铁皮石斛幼苗可溶性蛋白质的含量显著增加，从
而保证了铁皮石斛较高的生命力。
游离脯氨酸是植物体内最有效的渗透调节物质
之一，同时，脯氨酸还在稳定生物大分子结构、降低
细胞酸性、解除氨毒以及作为能量库调节细胞氧化
还原势等方面起重要作用，是植物抗逆性强弱的生
理指标之一。张伟等［１９］的研究显示，ＳＡ预处理在
正常供水条件下具有迅速促进植物体内脯氨酸积累
的效应，能够模拟干旱，提高抗旱性。试验结果表
明，ＳＡ处理后，在非胁迫条件下，铁皮石斛幼苗中
脯氨酸含量明显增加，说明，ＳＡ预处理能够增加铁
皮石斛的抗渗透胁迫能力，从而增强其抗逆性。
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（责任编辑：刘 海）
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何可群 等 贵州鼠尾草的总黄酮含量测定
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