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不同产地短葶飞蓬中总黄酮含量的比较



全 文 :不同产地短葶飞蓬中总黄酮含量的比较
史云东 1 ,袁天军 2, 3 ,贾 琳 1 ,金 航2* (1.玉溪师范学院资源环境学院 ,云南玉溪 653100;2.云南省农业科学院药用植物研究所,云
南昆明 650223;3.云南民族大学化学与生物技术学院 ,云南昆明 650031)
摘要 [目的]研究了不同产地短葶飞蓬中总黄酮含量异同。 [方法]以紫外分光光度法(UV)对云南省 9个不同地点的野生短葶飞蓬含
量进行测定 ,并对结果进行方差分析。 [结果]短葶飞蓬中总黄酮单株最高含量达 18.539%,最低含量为 3.653%;腾冲芒棒乡 1平均含
量最高 ,禄劝县雪山乡最低。同一产地点不同植株间含量差异明显 ,最大变异系数为 25.6%,最小变异系数为 9.7%。不同产地短葶飞
蓬间总黄酮含量方差结果显示 , F=19.467, P=0.000 1<0.01, LSD最小显著差数多重比较表明 ,不同地点短葶飞蓬中总黄酮含量差异
性显著。 [结论]短葶飞蓬中总黄酮含量的高低是内在遗传和外在生长环境共同作用的结果 ,该研究结果可为云南短葶飞蓬良种选育提
供依据。
关键词 短葶飞蓬;总黄酮;紫外分光光度法
中图分类号 S567  文献标识码 A  文章编号 0517-6611(2011)04-02085-02
ComparisonofContentofTotalFlavonoidsinErigeronbreviscapus(Vant.)HandMazz.fromDifferentHabitats
SHIYun-dongetal (ColegeofResourceandEnvironment, YuxiNormalUniversity, Yuxi, Yunnan653100)
Abstract [ Objective] TostudythevariationruleoftotalflavonoidscontentinErigeronbreviscapus(Vant.)HandMazz.fromdiferenthabi-
tats.[ Method] ContentsoftotalflavonoidsinErigeronbreviscapus(Vant.)HandMazz.fromnineplacesweredeterminedbyUVmethod,
andweresubjectedtoanalysisofvariance.[ Result] Amongalltheplants, thehighestcontentoftotalflavonoidsreached18.539%, andlow-
estwas3.563%.TheErigeronbreviscapus(Vant.)HandMazz.fromMangbangVillage1 ofTengchongCountrywasrichestintotalfla-
vonoids, andthatfromXueshanVillageofLuquanCountywaslowestin.ItwasprovenfromANOVAandLSDmultiplecomparisonthatcon-
tentsoftotalflavonoidsinErigeronbreviscapus(Vant.)HandMazz.fromdifferentplacesweresignificantdiferences.[ Conclusion] Content
oftotalflavonoidsinErigeronbreviscapus(Vant.)HandMazz.isinfluencedbybothheredityandgrowthenvironment, whichprovidesevi-
dencefortheselectionandbreedingofimprovedvarietyofErigeronbreviscapus(Vant.)HandMazz.
Keywords Erigeronbreviscapus;Totalflavonoid;Uvspectrophotometry
基金项目 云南省科技创新强省计划项目(2007C0219Z-10)。
作者简介 史云东(1974-),男,云南玉溪人 ,讲师 ,从事生物技术的教
学与研究。 E-mail:syd@yxnu.net。 *通讯作者 ,副研究员 ,
硕士生导师 , E-mail:jinhang2009@126.com。
收稿日期 2010-11-24
  短葶飞蓬 [ Erigeronbreviscapus(Vant.)HandMaz.]又
名灯盏花 、灯盏细辛 ,其干燥全草为菊科短葶飞蓬属一种常
用中药材 [ 1-2] ,主产于我国云南 、四川 、贵州 、湖南 、广西 、西
藏等省区 [ 3] 。短葶飞蓬中含有野黄芩苷 、黄酮等活性成分 ,
具有散寒解表 、祛风除湿 、活血舒筋 、消食积 、止痛和扩张血
管等功效 ,对各种脑血管意外导致的瘫痪及脑炎后遗症等有
显著的治疗效果 [4] 。总黄酮能舒张 15-MPG2α所致的离体冠
状动脉收缩 ,进一步舒张离体猪冠状动脉段 [ 5] ;此外 ,黄酮类
化合物还具有抗炎 、抗菌 、抗病毒 、雄性激素等作用 [ 6-7] 。研
究表明 ,短葶飞蓬中总黄酮含量随季节变化 、个体差异 、器官
分别及生长发育期等变化有一定的差异 [ 8-9] ,但对不同地点
的短葶飞蓬中总黄酮含量的比较分析鲜见报道。为此 ,笔者
采用紫外分光光度法对不同产地的短葶飞蓬中总黄酮含量
进行测定 ,并进行分析 ,旨在为中药短葶飞蓬的良种选育和
GAP种植提供依据 。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 研究对象。于 2009年 5月收集 9个不同产地的野生
短葶飞蓬资源 ,并移栽至云南省农业科学院药用植物研究所
种植资源圃中。
1.1.2 主要试剂 。芦丁对照品 ,由中国药品生物制品检定
所提供;无水乙醇 ,市售分析纯;水为重蒸水。
1.1.3 主要仪器。UV2550双通道紫外可见分光光度仪 ,由
岛津公司生产;SY3200T型超声波清洗机 ,由上海声源超声
仪器设备有限公司生产;0.45 μm过滤膜 ,由天津 Aulomatic
science公司生产;AR1140型万分之一分析天平 ,由美国 NJ
公司生产;DFT100型中药粉碎机 ,由浙江温岭市林大机械有
限公司生产 。
1.2 方法
1.2.1 总黄酮的提取。随机取采自不同地点的短葶飞蓬各
30株 ,洗净 ,干燥后单株粉碎 ,过 80目筛 ,准确称取 1.0 g样
品 ,加水煮 2次 ,每次 1.5h,合并煎液 ,经 0.45 μm过滤膜过
滤 、浓缩 ,加无水乙醇使水醇比为 20∶80,冷藏 48 h,过滤 ,收
集滤液 ,用分光光度计比色测定 ,每个样品重复 3次。
1.2.2 总黄酮含量的测定。测定方法参考文献资料 [ 9-
10] 。计算芦丁标准品的回归方程为 A=0.445 8C-0.017 8,
R2 =0.999 4。
图 1 芦丁对照品标准曲线
Fig.1 Standardcurveofrutin
  精密吸取提取滤液 1.0ml,置于 25 ml容量瓶中 ,用浓度
为 65%的乙醇定容 ,测定吸光度 ,代入标准回归方程 ,计算总
黄酮含量。
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2011, 39(4):2085-2086, 2088 责任编辑 刘群燕 责任校对 况玲玲
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.04.173
1.3 数据处理 所有数据均由 SPSS17.0统计软件分析。
2 结果与分析
2.1 不同产地短葶飞蓬总黄酮含量比较 不同产地短葶飞
蓬中总黄酮含量测定结果见表 1。由表 1可知 ,昆明小哨 、昆
明筇竹寺 、文山丘北县 、昭通巧家药山 、昆明双龙镇 、禄劝县
转龙镇 、禄劝县雪山乡 、腾冲芒棒乡 2和腾冲芒棒乡 19个产
地的短葶飞蓬中总黄酮总体平均含量为 12.620%,总体平均
变异系数(CV)为 25.6%。各产地中腾冲芒棒乡 1产短葶飞
蓬中总黄酮平均含量最高 ,为 15.760%,单株最大含量达
18.54%,单株最小含量为 10.794%;禄劝县雪山乡产短葶飞
蓬中总黄酮平均含量最低 ,为 8.850%,单株最大含量为 14.
660%,单株最小含量为 3.650%。其他产地总黄酮含量大小
为:昆明双龙镇 >禄劝县转龙镇 >腾冲芒棒乡 2>昆明小哨
>文山丘北县 >昭通巧家药山 >昆明筇竹寺。
表 1 不同产地短葶飞蓬中总黄酮含量
Table1 ThecontentsoftotalflavonoidsinErigeronbreviscapusamong
differentplaces %
产地
Location
平均含量
Meancontent
最小值
Min
最大值
Max
变异系数
CV
昆明小哨 13.130bc 8.436 16.698 13.5
昆明筇竹寺 9.217a 6.330 13.842 21.4
文山丘北县 13.008bc 9.254 15.223 14.5
昭通巧家药山 11.472b 8.815 16.087 19.8
昆明双龙镇 15.199cd 13.150 17.639 9.7
禄劝县转龙镇 14.988cd 7.449 18.219 20.1
禄劝县雪山乡 8.845a 3.653 14.660 25.2
腾冲芒棒乡 2 14.08cd 10.456 18.562 16.0
腾冲芒棒乡 1 15.757d 10.794 18.539 18.2
总体平均值 12.616 3.653 18.562 25.6
 注:同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。
 Note:Differentletersinthesamelineindicateasignificantdiferenceat
0.05level.
  由表 1还可知 ,同一产地不同短葶飞蓬植株间总黄酮含
量变异系数不同 ,禄劝县雪山乡样品间变异系数最高 ,昆明
双龙镇样品间变异系数最小。表明禄劝县雪山乡样品间总
黄酮含量差异较大 ,昆明双龙镇样品间总黄酮含量较为平
均。以总黄酮含量为考察指标可知 ,腾冲芒棒乡 1产的短葶
飞蓬适于中药材的采集;但从含量株间变异系数及平均含量
综合考虑 ,昆明双龙镇的短葶飞蓬适于育种药材的采收。
2.2 不同产地间短葶飞蓬中总黄酮含量差异性分析 方差
分析表明 ,各产地短葶飞蓬中总黄酮含量差异极显著(F=
19.467, P<0.01)。 LSD最小显著差数多重比较结果可知 ,
昆明小哨与昆明筇竹寺 、禄劝县雪山乡 、腾冲芒棒乡 1(F=
19.467, P<0.01)之间总黄酮含量均数差分别为 3.913 3、4.2
851和 2.626 6,差异极显著;与昆明双龙镇 、禄劝县转龙镇之
间均数差分别为 2.068 6、1.857 8,差异显著。昆明筇竹寺产
短葶飞蓬中总黄酮含量与昆明小哨 、文山丘北县 、昆明双龙
镇 、禄劝县转龙镇 、腾冲芒棒乡 2、腾冲芒棒乡 1之间均数差
分别为 3.913 3、3.791 5、5.981 9、5.771 1、4.872 7、6.539 9,
差异极显著;与昭通巧家药山之间均数差为 2.254 6,差异显
著。文山丘北县产短葶飞蓬中总黄酮含量与昆明筇竹寺 、禄
劝县雪山乡 、腾冲芒棒乡 1之间均数差分别为 3.791 5、4.163
3、2.748 4,差异极显著;与昆明双龙镇 、禄劝县转龙镇之间均
数差为 2.190 4、1.979 6,差异显著。昭通巧家药山产短葶飞
蓬中总黄酮含量与昆明双龙镇 、禄劝县转龙镇 、禄劝县雪山
乡 、腾冲芒棒乡 2、腾冲芒棒乡 1之间均数差分别为 3.727 4、
3.516 6、2.626 3、2.618 1、4.285 4,差异极显著;与昆明筇竹
寺之间均数差为 2.254 6,差异显著。昆明双龙镇产短葶飞
蓬中总黄酮含量与昆明筇竹寺 、昭通巧家药山 、禄劝县雪山
乡之间均数差 5.981 9、3.727 4、6.353 7,差异极显著;与昆明
小哨 、文山丘北县之间均数差为 2.068 6、2.190 4,差异显著。
禄劝县转龙镇产短葶飞蓬中总黄酮含量与昆明筇竹寺 、昭通
巧家药山 、禄劝县雪山乡产短葶飞蓬中总黄酮含量之间均数
差分别为 5.771 1、3.516 6、6.142 9,差异极显著;与昆明小
哨 、文山丘北县之间均数差为 1.857 8、1.979 6,差异显著。
禄劝县雪山乡产短葶飞蓬中总黄酮含量与昆明小哨 、文山丘
北县 、昭通巧家药山 、昆明双龙镇 、禄劝县转龙镇 、腾冲芒棒
乡 2、腾冲芒棒乡 1之间均数差分别为 4.285 1、4.163 3、
2.626 3、6.353 7、6.142 9、5.244 5、6.911 7,差异极显著。腾
冲芒棒乡 2产短葶飞蓬中总黄酮含量与昆明筇竹寺 、昭通巧
家药山 、禄劝县雪山乡之间均数差分别为 4.872 7、2.618 1、
5.244 5,差异极显著。腾冲芒棒乡产 1短葶飞蓬中总黄酮含
量与昆明小哨 、昆明筇竹寺 、文山丘北县 、昭通巧家药山 、禄
劝县雪山乡之间均数差分别为 2.266 6、6.539 9、2.748 4、
4.285 4、6.911 7,差异极显著。
差异显著性分析结果表明 ,不同产地间短葶飞蓬中总黄
酮差异显著 ,昆明双龙镇与腾冲芒棒乡 1之间差异性不显
著 。以总黄酮含量为考察指标 ,综合考虑样品间总黄酮差异
性与平均含量 ,昆明双龙镇与腾冲芒棒乡 1两地短葶飞蓬样
品适于中药材采收。
3 结论与讨论
试验结果表明 ,不同植株 、不同产地的短葶飞蓬中总黄
酮含量均有一定差异 ,不同采集地点的短葶飞蓬中总黄酮平
均含量依次为腾冲芒棒乡 1>昆明双龙镇 >禄劝县转龙镇 >
腾冲芒棒乡 2>昆明小哨 >文山丘北县 >昭通巧家药山 >昆
明筇竹寺 >禄劝县雪山乡。植株间变异系数大小依次为禄
劝县雪山乡 >昆明筇竹寺 >禄劝县转龙镇 >昭通巧家药山
>腾冲芒棒乡 1>腾冲芒棒乡 2>文山丘北县 >昆明小哨 >
昆明双龙镇。同一产地植株间变异系数越小 ,表明植株中总
黄酮含量越稳定;含量平均值越大表明总黄酮含量越高。综
合考虑总黄酮平均含量与变异系数 ,腾冲芒棒乡 1样品适于
中药材采集 ,昆明双龙镇所产样品适于中药育种研究。
不同产地的短葶飞蓬中总黄酮含量差异显著 ,同一产地
不同植株间总黄酮含量也有一定差异。由此可知 ,短葶飞蓬
中总黄酮含量同时受到植株内部遗传基因和外在环境的影
响 ,这与许多研究中植物药效成分与自身遗传特性和生长环
境有关 [ 10]的结果一致 ,进一步证实了遗传的稳定性与变异
的选择性理论。
参考文献
[ 1] 国家药典委员会.中国药典(2010.第一部)[S].北京:中国医药科技出
版社 , 2010.
[ 2] 中华人民共和国卫生部药典委员会中国药典(1977年版一部)[S/
OL].htp:∥www.docin.com/app/p? id=29290433.
[ 3] 中国科学植物志编委会.中国植物志:第 74卷.菊科(一)[ M].北京:科
(下转第 2088页)
2086           安徽农业科学                         2011年
续表 1
序号SerialNo.
化合物名称
Compounds
分子式Molecularformula
匹配度Matchdegree
相对含量∥%Relativecontent
10 二苯基胺 diphenylamine C12H1 1N 87 0.01
11 肉豆蔻酸甲酯 myristicacid, methylester C15H30O2 97 0.02
12 1H-吲哚-3-乙腈 1H-indole-3-acetonitrile C10H8N2 96 0.14
13 十八碳三烯-1-醇 9, 12, 15-octadecatrien-1-ol C18H3 2O 93 0.20
14 棕榈酸甲酯 methylpalmitate C17H34O2 99 2.40
15 棕榈酸 palmiticacid C16H32O2 99 0.01
16 4-甲氧基-3-乙腈基-1H-吲哚 4-methoxy-3-cynanomethyl-1H-indole C11H10ON2 98 0.02
17 十八烷醇 n-octadecanol C18H3 8O 94 1.73
18 亚油酸甲酯 linoleicacidmethylester C19H34O2 99 0.82
19 亚麻酸甲酯 linolenicacidmethylester C19H32O2 99 7.16
20 油酸甲酯 oleicacidmethylester C19H36O2 99 0.64
21 植醇 phytol C20H4 0O 93 26.49
22 硬脂酸甲酯octadecanoicacid, methylester C19H38O2 99 0.15
23 亚麻酸乙酯 linolenicacid,ethylester C20H34O2 95 0.08
24 二十三烷 tricosane C23H48 96 0.33
25 二十烷酸甲酯 Eicosanoicacid, methylester C21H42O2 91 0.25
26 4-(2, 3-二氢-7-甲氧基-3-甲基-5-丙烯基-2-苯并呋喃)-2-甲氧基苯酚 4-[ 2, 3-dihydro-7-methoxy-3-meth-yl-5-(1-propenyl)-2-benzofuranyl] -2-methoxy-phenol C20H22O4 95 0.11
27 2-甘油-棕榈酸酯 2-monopalmitin C19H38O4 91 2.29
28 邻苯二甲酸二异辛酯 disooctylphthalate C24H38O4 91 0.64
29 2-甘油-亚麻酸酯 2-monolinolenin C21H36O4 95 7.84
30 二十四烷酸甲酯 Tetracosanoicacid, methylester C25H50O2 96 1.77
31 二十九烷 n-nonacosane C29H60 98 6.07
32 胆甾醇 cholesterol C27H4 6O 99 0.73
33 三十一烷 n-hentriacontane C31H64 95 0.60
34 维生素 EVitamine C29H50O2 98 1.28
35 菜油甾醇 Campesterol C28H4 8O 99 3.20
36 乙基胆甾醇 23-ethyl-cholesterol C29H5 0O 99 10.65
37 5, 24(28)-豆甾二烯-3-醇 Stigmasta-5, 24(28)-dien-3-ol C29H4 8O 81 2.87
38 α-香树素 α-amyrin C30H5 0O 99 1.73
  由表 1可知 ,高河菜提取物中含量较高的成分为植醇
(26.49%)、乙基胆甾醇 (10.65%)、 2-甘油-亚麻酸酯
(7.84%)、亚麻酸甲酯(7.16%)、二十九烷(6.07%)、菜油甾
醇(3.2%)、5, 24(28)-豆甾二烯-3-醇(2.87%)、棕榈酸甲酯
(2.4%)、2-甘油 -棕榈酸酯 (2.29%)、二十四烷酸甲酯
(1.77%)、十八烷醇(1.73%)和 α-香树素(1.73%)和维生
素 E(1.28%)等。这 13种成分占脂溶性总成分的 75.48%。
3 结论与讨论
在高河菜脂溶性成分中 ,所鉴定的成分占总成分含量
的 80.80%。其中萜类含量最高 ,占 28.26%;脂肪酸酯含
量次之 ,占 23.42%,其中以亚麻酸酯和棕榈酸酯含量较高 ,
分别为 15.08%和 4.69%;甾醇和烷烃含量也较高 ,分别占
17.45%和 7.05%。高河菜脂溶性提取物的主要成分为萜
类 、脂肪酸酯 、甾醇和烷烃 ,另外还有少量脂肪醇 、杂环及腈
等化合物。该试验首次用 GC-MS法对高河菜的脂溶性成
分进行了研究 ,对扩大其资源开发与利用具有一定的科学
意义。
参考文献
[ 1] 中国科学院昆明植物研究所.云南植物志(第六卷)[ M].北京:科学出
版社 , 1995:27.
[ 2] 朱兆云,罗天浩,寸润林,等.大理中药资源志 [ M].昆明:云南民族出版
社, 1991:83.
[ 3] 夏从龙,李龙星,周浓.白族药高河菜的生药学研究 [ J].中国民族医药
杂志 , 2005, 11(4):18.[ 4] 董晓东,李继红.高河菜种子生物学特性及其降海拔栽培的初步研究
[ J].特产研究 , 2002, 24(3):21-24.
[ 5] 沈磊 ,刘晓波 ,施贵荣 ,等.高河菜提取物对积滞化热模型大鼠消化液
成分的影响[ J].中国民族民间医药, 2009(3):1-3.
[ 6] 金星龙,翟慧泉,岳俊杰 ,等.津郊污灌区土壤及蔬菜重金属污染调查
与评价[ J].安徽农业科学, 2010, 38(7):3701-3703, 3706.
[ 7] 王建刚.五叶地锦种子中脂肪酸成分的 GC-MS分析 [ J] .安徽农业科
学, 2010, 38(29):16204-16205.
[ 8] 石岭 ,鱼红闪 ,金凤燮,等.丹参药渣中丹参酮的提取研究 [ J].安徽农业科学, 2010, 38(9):4539-4541.
(上接第 2086页)
  学出版社, 1985.
[ 4] 苏文华 ,陆结,张光飞,等.短葶飞蓬总黄酮的生态生物学分析 [ J].中
草药, 2001, 32(12):1119-1121.
[ 5] 郭济贤 , ,竺叶青 ,李颖 ,等.中药灯盏花的生药鉴定及其与两种近缘
植物对离体猪冠状动脉的作用 [ J] .上海医科大学学报, 1988, 15(3):
195.
[ 6] 吴立军.中药化学[ M] .北京:中国医药科技出版社 , 2001:103-105.
[ 7] STEFANMARTENS, AXELMITHFER.Flavonesandflavonesyn-thase
[J] .Phytochemistry, 2005, 66(20):2399-2407.
[ 8] YUEJM, ZHAOQS, LINZW, etal.PhenoliccompoundsfromErigeronbreviscapus[J].ActaBotSin, 2000, 42(3):311-315.
[ 9] SUWH, LUJ, ZHANGGF,etal.Ecologicalandbiologicalanalysisofto-
tolflavonoidsinErigeronbreviscapus[J].ChinTraditHerbDrugs, 2001,
32(12):1119-1121.
[ 10] HealthDepartmentofYunnanProvince.DrugStandardsofYunnanProv-
ince[M].Yunnan:Yun-nanUniversityPress, 1998.
2088           安徽农业科学                         2011年