全 文 ：第18卷第1期 中国现代医学杂志 Vol.18No.1
2008年1月 ChinaJournalofModernMedicine Jan.2008
紫玉盘(uvariamicrocarpa)系番荔枝科紫玉盘属
植物,多为灌木,呈攀缘或蔓延状,有时直立,少数为
小乔木[1]。分布于我国广西、广东、台湾等地。据文献
记载,紫玉盘味苦、性甘,微温,民间用于治疗消化不
良、腹胀腹泻、跌打损伤、腰腿疼痛等症,其叶可用于
止痛消肿。有报道以紫玉盘为主药的复方感冒颗粒
剂对感冒发热[2]具有良好的疗效。紫玉盘主要成分
有内酯类[3]、多氧取代环己烯类[4,5]、生物碱类[6]、脂肪
文章编号: 1005-8982(2008)01-0047-04
·论著·
紫玉盘茎叶石油醚部位抗肿瘤作用的研究*
戴支凯 1,郭志军 2,徐 庆 1
(1.桂林医学院药理学教研室,广西 桂林 541004;
2.广西师范大学化学化工学院,广西 桂林 541004)
摘要:目的 研究紫玉盘茎叶石油醚部位的抗肿瘤活性。 方法 乙醇回流提取后分别采用石油醚、氯仿、
乙酸乙酯和正丁醇萃取有效部位。应用小鼠 S180实体瘤模型,研究紫玉盘茎叶石油醚部位的体内抗肿瘤作用。
采用MTT检测法检测紫玉盘茎叶石油醚部位的体外抗肿瘤活性。 结果 紫玉盘茎叶石油醚部位对 S180实体
瘤呈剂量依赖性抑制作用,600mg/kg组的瘤重抑制百分率达51.04%,与生理盐水组比较差异有显著性 (P<
0.01)。MTT检测显示,紫玉盘茎叶石油醚20μg/mL对SMMC-7721、SGC-7901和KB细胞的增殖有明显抑
制作用,与生理盐水组比较差异有显著性(P<0.01)。结论 紫玉盘茎叶石油醚部位具有一定的抗肿瘤作用,
其机制有待进一步研究。
关键词: 紫玉盘;抗肿瘤;S180;MTT法
中图分类号: R963 文献标识码: A
Studyonanticancerefectsofpetroleumetherfractionfrom
stemandleavesextractofUvariamicrocarpa*
DAIZhi-kai1,GUOZhi-jun2,XUQing1
(1.DepartmentofPharmacology,GuilinMedicalColege,Guilin,Guangxi541004,
P.R.China;2.SchoolofChemistry&ChemicalEngineering,Guangxi
NormalUniversity;Guilin,Guangxi541004,P.R.China)
Abstract:【Objective】ToinvestigateanticancerefectsofpetroleumetherfractionofstemandleavesofUvaria
microcarpa.【Methods】EficientingredientwasleachedfromalcoholextractofstemandleavesofUvariamicro-
carpabypetroleumether,chloroform,ethylacetoacetateandn-butylalcoholrespectively.Anticancerefectsof
petroleumetherfractionwereexperimentedbyentityS180micemodelinvivoandMTTreductiontestinvitro.【Re-
sults】 PetroleumetherfractioncouldinhibitedentityS180growthinadose-dependentmanner,theinhibitiveper-
centageofcarcinomaweightwas51.04%in600mg/kggroupandtherewasobviouslydiferentiationwhencompar-
ingwithnormalsalinegroup(P<0.01).Petroleumetherfractionat20μg/mLcouldinhibitcelgrowthofSGC-7901,
SMMC-7721andKBcellineswhencomparingwithNSgroup(P<0.01).【Conclusion】Thisstudyconfirmsthat
petroleumetherfractionofUvariamicrocarpahassignificantanticancerefect;however,themechanismremainsto
bestudied.
Keywords:Uariamicrocarpa;anticancer;S180;MTTreductiontest
收稿日期:2007-07-10
*基金项目:广西自然科学基金(桂科基0342002-3)
[通讯作者]徐 庆(1956-),男,广西桂林人,教授,硕士,从事抗病毒、抗肿瘤研究,Tel:(0773)5895801,E-mail:xq5895801@163.com
47· ·
中国现代医学杂志 第18卷
酸[7]、黄酮类[8]、萜类[9]等成分,具有抗肿瘤[10]、抗原
虫[11]、抗病毒、抗菌等作用[12～15]。我们对紫玉盘茎叶
有效部位的抗肿瘤作用进行了初步探讨。
1 材料与方法
1.1 材料
紫玉盘植物采自广西防城,由广西植物所鉴定
为 紫 玉 盘 (uvaria microcarpa)。 SMMC-7721、
SGC-7901、S180和 KB细胞株均购自中国科学院上
海细胞所。小白鼠由广西医科大学实验动物中心提
供 (SCXK桂 2003-0003)。RPMI-1640( 批 号 :
1120708)为 GIBCO产品,胰蛋白酶(批号:040524)
为Difco产品,MTT(批号:0793)为 Amressco产品,
小牛血清(批号:050623)购自杭州四季青生物工程
有限责任公司,氟尿嘧啶(5-fliorouracil,5Fu,批号:
031001)为上海旭东海普药业有限公司产品,环磷
酰胺(CTX,批号:05080221)为江苏恒瑞医药股份有
限公司产品。酶标仪(EXL-800)为美国产品。
1.2 方法
1.2.1 紫玉盘有效成分的提取 将适量紫玉盘茎叶
粉碎后,用 95%的乙醇回流提取 3次,真空浓缩制
成浸膏[16]。分别加入石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁
醇萃取,得到石油醚部位(UM-1,1g相当于生药55
g)、氯仿部位(UM-2,1g相当于生药 37g)、乙酸乙
酯部位(UM-3,1g相当于生药 220g)和正丁醇部位
(UM-4,1g相当于生药27g)。
1.2.2 UM-1抗 S180实体瘤作用 将 S180腹水癌
小鼠腹水抽出,用生理盐水按 1∶1稀释,于受试小
鼠右侧腋下背侧皮下接种 0.2mL的细胞悬液。次
日,将受试小鼠分为阴性对照组 (生理盐水,ig)、
CTX组(25mg/kg,ip)和高、中、低剂量的 UM-1组
(600、300和 150mg/kg,ig),每组10只;并按每
10g体重给予0.2mL药量给药。连续给药15d。给
药结束后次日,将肿瘤取出并称重,计算瘤重抑制百
分率。瘤重抑制百分率(%)=(阴性对照组平均瘤
重-给药组平均瘤重)/阴性对照组平均瘤重×
100%。
1.2.3 MTT检测[17] 将肿瘤细胞接种于 25mL培
养瓶,置 37℃、5%二氧化碳环境培养。待细胞约
80%融合时,进行传代培养。将对数生长期细胞稀释
为 5×104/mL,接种于 96孔板,每孔 180μL。培养
24h后,实验分为阴性对照组(生理盐水)、阳性对
照组 (5Fu,10-4mol/L)、5个 10倍梯度的试药组
(20、2、0.2、0.02和 0.002μg/mL),每组平行 5孔,
并加入相应的药物,每孔 20μL。于培养结束(48、
72h) 前 4h,加入 5mg/mL的 MTT溶液,每孔
20μL,继续培养4h。培养结束后,轻轻吸去上清,
加入含 0.04mol/L盐酸的异丙醇,每孔 150μL,待
formazan完全溶解后,于酶标仪570nm处测定吸光
度值(A值)。重复3次。以平均细胞抑制率(IR)为
评价指标。细胞抑制率=(1-实验孔A值/对照孔A
值)×100%。设定 IR>50%为敏感,IR在 30%～
50%为低度敏感,IR小于30%为不敏感。
1.3 统计学处理
实验数据用(x±s)表示,采用SPSS13.0版统
计软件进行统计,样本均数间比较用完全随机设计
的单因素方差分析。以α=0.05作为检验水准。
2 结果
2.1 紫玉盘茎叶石油醚部位(UM-1)抗 S180实体
瘤作用
结果显示,见表 1,高剂量 UM-1组对 S180的抑
制百分率达51.04%,与CTX组之间差异均无显著
性(P>0.05)。
表1 紫玉盘茎叶石油醚部位(UM-1)对小鼠S180实体瘤
的抑制作用 (x±s,n=10)
注:1)P<0.05,2)P<0.01vsNSgroup;
3)P<0.05,4)P<0.01vsCTXgroup
2.2 MTT检测
2.2.1 紫玉盘茎叶石油醚部位(UM-1)抗肿瘤作
用 UM-1对体外肿瘤细胞增殖的影响,见表2。其
中,20μg/mL的 UM-1对 SMMC-7721细胞作用 48
和 72h的抑制百分率分别为 77.39%和 82.00%,对
SGC-7901细胞的抑制百分率分别为 77.43%和
80.92%,对KB细胞的抑制百分率分别为 73.91%和
77.08%。表明SMMC-7721、SGC-7901和KB细胞对
UM-1敏感。
2.2.2 紫玉盘茎叶氯仿部位(UM-2)抗肿瘤作用
MTT检测显示,见表3,UM-220μg/mL对SMMC-
7721细胞和 SGC-7901细胞作用 72h的抑制百分
组别 剂量 平均瘤重(g) 瘤重抑制百分率(%)
阴性对照(NS)组 0.2mL/10g 0.500±0.087 -
CTX组 25mg/kg 0.275±0.0662) 45.06
高剂量UM-1组 600mg/kg 0.245±0.1052) 51.04
中剂量UM-1组 300mg/kg 0.302±0.0952) 39.65
低剂量UM-1组 150mg/kg 0.509±0.251 0
48· ·
表2 紫玉盘茎叶石油醚部位(UM-1)对不同肿瘤细胞吸光度的影响 (x±s,n=5)
注:1)P<0.05,2)P<0.01vsNSgroup;3)P<0.05,4)P<0.01vs5Fugroup
表3 紫玉盘茎叶氯仿部位(UM-2)对不同肿瘤细胞吸光度的影响 (x±s,n=5)
注:1)P<0.05,2)P<0.01vsNSgroup;3)P<0.05,4)P<0.01vs5Fugroup
表4 紫玉盘茎叶乙酸乙酯部位(UM-3)对不同肿瘤细胞吸光度的影响 (x±s,n=5)
注:1)P<0.05,2)P<0.01vsNSgroup;3)P<0.05,4)P<0.01vs5Fugroup
表5 紫玉盘茎叶正丁醇部位(UM-4)对不同肿瘤细胞吸光度的影响 (x±s,n=5)
注:1)P<0.05,2)P<0.01vsNSgroup;
3)P<0.05,4)P<0.01vs5Fugroup
第1期 戴支凯,等:紫玉盘茎叶石油醚部位抗肿瘤作用的研究
组别
SMMC-7721 SGC-7901 KB
48h 72h 48h 72h 48h 72h
阴性对照组(NS) 0.212±0.052 0.470±0.012 0.201±0.007 0.299±0.014 0.276±0.007 0.366±0.015
阳性对照组(5Fu) 0.143±0.0091) 0.245±0.0102) 0.136±0.0072) 0.162±0.0062) 0.114±0.0172) 0.107±0.0152)
UM-1-20μg/mL组 0.048±0.0012)4) 0.085±0.0322)4) 0.045±0.0012)4) 0.057±0.0032)4) 0.072±0.0022)4) 0.084±0.0092)4)
UM-1-2μg/mL组 0.151±0.013 0.250±0.0392) 0.150±0.0082) 0.191±0.0282) 0.193±0.0192) 0.216±0.0182)
UM-1-0.2μg/mL组 0.178±0.087 0.336±0.0542) 0.187±0.0061) 0.255±0.0112) 0.265±0.0212) 0.285±0.031
UM-1-0.02μg/mL组 0.177±0.040 0.361±0.0601) 0.194±0.013 0.285±0.026 0.297±0.025 0.306±0.068
UM-1-0.002μg/mL组 0.199±0.051 0.377±0.0361) 0.201±0.011 0.283±0.038 0.281±0.022 0.305±0.090
组别
SMMC-7721 SGC-7901 KB
48h 72h 48h 72h 48h 72h
阴性对照组(NS) 0.212±0.052 0.470±0.012 0.201±0.007 0.299±0.014 0.2760.007 0.366±0.015
阳性对照组(5Fu) 0.143±0.0091) 0.245±0.0102) 0.136±0.0072) 0.162±0.0062) 0.114±0.0172) 0.107±0.0152)
UM-2-20μg/mL组 0.186±0.044 0.246±0.0262) 0.164±0.0102) 0.178±0.0172) 0.181±0.0392) 0.190±0.0822)
UM-2-2μg/mL组 0.187±0.067 0.394±0.0232) 0.200±0.006 0.280±0.053 0.244±0.012 0.279±0.0102)
UM-2-0.2μg/mL组 0.198±0.031 0.402±0.1111) 0.199±0.015 0.273±0.025 0.247±0.005 0.309±0.0192)
UM-2-0.02μg/mL组 0.193±0.021 0.418±0.097 0.210±0.031 0.278±0.015 0.244±0.008 0.311±0.0102)
UM-2-0.002μg/mL组 0.193±0.006 0.422±0.088 0.202±0.010 0.293±0.023 0.269±0.026 0.338±0.0312)
组别
SMMC-7721 SGC-7901 KB
48h 72h 48h 72h 48h 72h
阴性对照组(NS) 0.212±0.052 0.470±0.012 0.201±0.007 0.319±0.014 0.276±0.007 0.366±0.015
阳性对照组(5Fu) 0.143±0.0091) 0.245±0.0102) 0.136±0.0072) 0.162±0.0062) 0.114±0.0172) 0.107±0.0152)
UM-3-20μg/mL组 0.160±0.007 0.426±0.106 0.190±0.019 0.310±0.024 0.222±0.0122) 0.260±0.0322)
UM-3-2μg/mL组 0.164±0.004 0.436±0.106 0.200±0.006 0.301±0.007 0.260±0.047 0.359±0.052
UM-3-0.2μg/mL组 0.176±0.014 0.430±0.068 0.185±0.045 0.310±0.011 0.261±0.124 0.365±0.019
UM-3-0.02μg/mL组 0.205±0.007 0.446±0.047 0.176±0.028 0.316±0.007 0.271±0.075 0.368±0.079
UM-3-0.002μg/mL组 0.216±0.009 0457±0.092 0.192±0.016 0.329±0.020 0.272±0.010 0.365±0.066
组别
SMMC-7721 SGC-7901 KB
48h 72h 48h 72h 48h 72h
阴性对照组(NS) 0.212±0.052 0.470±0.012 0.299±0.014 0.201±0.007 0.276±0.007 0.366±0.015
阳性对照组(5Fu) 0.143±0.0091) 0.245±0.0102) 0.136±0.0072) 0.162±0.0062) 0.114±0.0172) 0.107±0.0152)
UM-4-20μg/mL组 0.175±0.026 0.368±0.0402) 0.295±0.026 0.174±0.0072) 0.220±0.0142) 0.268±0.0302)
UM-4-2μg/mL组 0.235±0.025 0.382±0.105 0.302±0.009 0.185±0.022 0.250±0.0171) 0.289±0.0262)
UM-4-0.2μg/mL组 0.222±0.030 0.380±0.076 0.299±0.005 0.203±0.015 0.253±0.023 0.305±0.0341)
UM-4-0.02μg/mL组 0.229±0.017 0.386±0.108 0.302±0.004 0.202±0.025 0.252±0.011 0.312±0.048
UM-4-0.002μg/mL组 0.226±0.021 0.396±0.099 0.310±0.015 0.197±0.007 0.263±0.019 0.337±0.046
49· ·
率分别为47.60%和40.33%,对KB细胞作用48和
72h的抑制百分率分别为 34.48%和 48.06%。表明
SMMC-7721、SGC-7901和KB细胞对UM-2低度敏
感。
2.2.3 紫玉盘茎叶乙酸乙酯部位(UM-3)抗肿瘤
作用 UM-3对 SMMC-7721、SGC-7901细胞无明
显的抑制作用(P>0.05),20μg/mL的 UM-3对KB
细胞作用 48、72h的抑制百分率分别为 19.73%和
28.93%。表明 UM-3对 SMMC-7721、SGC-7901和
KB细胞不敏感,见表4。
2.2.4 紫玉盘茎叶正丁醇部位(UM-4)抗肿瘤作
用 UM-4对体外肿瘤细胞增殖的影响,见表 5所
示 。 其 中 ,UM-4 20μg/mL 对 SMMC-7721、
SGC-7901细胞作用 72h的抑制百分率分别为
21.57%和13.34%,对KB细胞作用48、72h的抑制
百分率分别为 20.27%和 26.80%。表明 UM-4对
SMMC-7721、SGC-7901和KB细胞不敏感。
3 讨论
紫玉盘属植物盛产于广西,深入研究其药理作
用对于推进中药现代化和开发广西植物资源具有重
要的意义。笔者在预实验中发现,紫玉盘茎叶的氯
仿部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位对小鼠S180实
体瘤生长无明显的抑制作用。本研究发现,紫玉盘
茎叶石油醚部位具有抑制小鼠S180实体瘤生长的作
用,与CTX组间差异无显著性。MTT检测显示,紫玉
盘茎叶石油醚部位对 SMMC-7721、SGC-7901和
KB细胞敏感,与有关文献报道[10]一致,其中,紫玉盘
茎叶石油醚部位 20μg/mL组的抗肿瘤作用优于
10-4mol/L的 5Fu组(P<0.01),有进一步研究的价
值;氯仿部位对这三种细胞低度敏感;而紫玉盘茎叶
乙酸乙酯部位和正丁醇部位对上述三细胞株体外增
殖无明显的抑制作用。以上结果表明,紫玉盘茎叶
石油醚部位是紫玉盘抗肿瘤作用的主要活性部位,
具有从中开发抗肿瘤药物的前景,继续从紫玉盘茎
叶石油醚部位中分离提取抗肿瘤活性成份对寻找新
的抗肿瘤新药具有十分重要的意义,其抗肿瘤机制
有待进一步研究。
参 考 文 献:
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(顾 靓 编辑)
中国现代医学杂志 第18卷
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